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农杆菌介导的海岛棉茎尖再生体系及其遗传转化影响因子的研究
被引量:
11
1
作者
翁琴
陈全家
+3 位作者
孔庆平
张国政
武金玲
曲延英
《新疆农业大学学报》
CAS
2007年第4期63-67,共5页
采用根癌农杆菌LBA4404和EHA105介导,对海岛棉的茎尖再生体系及其转化影响因子进行了研究。茎尖培养与棉花体细胞胚胎发生相比,不同基因型的茎尖再生频率差异不明显;在9种不同的激素组合中,以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L与1/2MSB5+IBA 0...
采用根癌农杆菌LBA4404和EHA105介导,对海岛棉的茎尖再生体系及其转化影响因子进行了研究。茎尖培养与棉花体细胞胚胎发生相比,不同基因型的茎尖再生频率差异不明显;在9种不同的激素组合中,以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L与1/2MSB5+IBA 0.1 mg/L对茎尖的再生效果较好;获得较高转化频率的海岛棉培养条件为:海岛苗茎尖在OD600值为0.6-0.8农杆菌菌液中感染20-30 min,共培养3 d后进行转接,在含有不同激素和抗生素的各类培养基中进行抑菌和筛选继代培养,选择压以50-150 mg/L梯度进行;农杆菌以EHA105菌株的转化效果较好;抗性苗用SDS-CTAB法提取其总DNA,进行PCR扩增检测,有7株PCR检测呈阳性反应。由此,初步证明外源抗虫基因已经进入到再生植株的细胞核中。
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关键词
海岛棉茎尖
遗传转化
根癌农杆菌
BT基因
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职称材料
题名
农杆菌介导的海岛棉茎尖再生体系及其遗传转化影响因子的研究
被引量:
11
1
作者
翁琴
陈全家
孔庆平
张国政
武金玲
曲延英
机构
新疆农业大学农学院
新疆农科院经济作物研究所
出处
《新疆农业大学学报》
CAS
2007年第4期63-67,共5页
基金
新疆维吾尔自治区攻关项目(2001BA507A04-P01)
文摘
采用根癌农杆菌LBA4404和EHA105介导,对海岛棉的茎尖再生体系及其转化影响因子进行了研究。茎尖培养与棉花体细胞胚胎发生相比,不同基因型的茎尖再生频率差异不明显;在9种不同的激素组合中,以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L与1/2MSB5+IBA 0.1 mg/L对茎尖的再生效果较好;获得较高转化频率的海岛棉培养条件为:海岛苗茎尖在OD600值为0.6-0.8农杆菌菌液中感染20-30 min,共培养3 d后进行转接,在含有不同激素和抗生素的各类培养基中进行抑菌和筛选继代培养,选择压以50-150 mg/L梯度进行;农杆菌以EHA105菌株的转化效果较好;抗性苗用SDS-CTAB法提取其总DNA,进行PCR扩增检测,有7株PCR检测呈阳性反应。由此,初步证明外源抗虫基因已经进入到再生植株的细胞核中。
关键词
海岛棉茎尖
遗传转化
根癌农杆菌
BT基因
Keywords
G. barbadense shoot apex
genetic transformation
Agrobacterium
BT Gene
分类号
S562.032 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
农杆菌介导的海岛棉茎尖再生体系及其遗传转化影响因子的研究
翁琴
陈全家
孔庆平
张国政
武金玲
曲延英
《新疆农业大学学报》
CAS
2007
11
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