海带硫酸多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用

近年来人们发现某些藻类多糖具有明显的抗肿瘤作用[1]。我们从海带中提取了一种天然生物大分子海带多糖(Ｌａｍｉｎａｒｉｎｓｕｌｆａｔｅ,ＬＡＳ),由Ｌ岩藻糖、Ｄ半乳糖等糖基组成的硫酸酯化多聚物,平均分子量为1.5×105。该多糖对小鼠肉瘤Ｓ180的抑制率可达86.5%。本研...

海带硫酸多糖的提取、纯化及其理化分析

目的研究海带硫酸多糖 (LPS)的提取制备及其组分的纯化和理化性质。方法采用酶解法从海带提取制备LPS,海带浆加入纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶 ,50℃水解 4h。取滤液加入氯化钙 ,离心去除海藻酸钙。取上清液加入十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)与LPS结合沉淀 ,离心收集CTAB LPS沉淀物。加入氯化钙溶液进行盐解 ,将LPS游离释放出来 ,加入乙醇使LPS析出。离子交换色谱和凝胶过滤色谱法分离纯化其多糖组分。结果酶解提取法的收率为 5‰ ,色谱法分离得到 4个主要多糖组分 ,测定其分子量分别为 2 1 0、1 2 0、40 0和 1 4 0kD。酶解法的提取收率高于水煮法。

海带硫酸多糖的降解、分离纯化及理化性质分析

文章采用自由基方法降解海带硫酸多糖,然后通过琼脂糖凝胶电泳、凝胶色谱等方法进行分离纯化;分别利用硫酸酚法和明胶比浊法,测定糖的含量和硫酸根的含量;MN纤维素膜层析和气相色谱测定单糖组成;利用超滤和凝胶过滤测定降解多糖的分子质量等。海带硫酸多糖可以被自由基有效地降解,降解之后海带硫酸多糖的多糖含量、硫酸根含量及单糖组成基本没有变化,分子质量可被降解到10000～15000左右。

海带硫酸多糖蛋白复合物的气相色谱分析

为开发海洋资源,对海带有效成分海带硫酸多糖蛋白复合物(glycocalyx of sulfated polysaccharide from Lami-naria japonica,GPL)的结构组成进行分析。GPL为本实验室制备,经检测GPL中硫酸基含量为29.12%,总糖27.8%,蛋白质12.69%。通过衍生化处理,然后采用气相色谱仪分析该多糖蛋白复合物的单糖组成。结果表明GPL是主要有岩藻糖聚合而成的复合物,另外含有甘露糖、半乳糖、葡萄糖和木糖等。

羟自由基降解海带硫酸多糖的可行性研究

低分子量海带硫酸多糖已被证明有多种生物学功能,但提取得到的海带硫酸多糖分子量很大,需要进一步降解。目前常用的一些降解方法都有一定缺点,急需寻找新的降解方法。羟自由基作为一种高活性物质,对生物大分子有强的破坏作用。根据这种性质,推断羟自由基可以成为降解多糖的有力工具。文章总结了国际国内利用自由基降解多糖的进展,研究了自由基降解多糖的机制,并对自由基降解海带硫酸多糖前景进行了展望。

海带硫酸多糖的自由基降解

文章采用自由基法降解海带硫酸多糖,然后通过琼脂糖凝胶电泳来分析降解时不同维生素C浓度、降解的连续性、各种不同海带硫酸多糖,以及海藻酸、透明质酸、硫酸软骨素在自由基降解时的特点。实验发现海带硫酸多糖可以连续被自由基有效的降解,并且该方法可适用于各种多糖,这有可能为海带硫酸多糖的大规模降解提供一种很好的方法。

海带硫酸多糖对镉毒害甜瓜幼苗的保护作用

以"二叶一心"期甜瓜(Cucumis melo L.)为材料,研究了沙培条件下不同浓度(0、0.1、0.25、0.35、0.7、1.1、2.2 g.L-1)的海带硫酸多糖对150 mg.kg-1氯化镉(CdCl2.2.5H2O)毒害下甜瓜幼苗的保护作用。结果表明,甜瓜幼苗的镉积累量、叶绿素含量、生物量、蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量、膜透性以及抗氧化酶活性均与海带硫酸多糖浓度的变化具有相关性。随灌施海带硫酸多糖浓度的升高,甜瓜叶片和根系中镉积累量和渗透势持续下降,0.25 g.L-1和0.35 g.L-1的海带硫酸多糖水平下无显著差异,与其他浓度水平差异显著(P<0.05);叶绿素含量、生物量、蛋白质含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶活性呈先上升后下降趋势,0.35 g.L-1海带硫酸多糖水平下含量最高;MDA和膜透性则表现为先下降后上升趋势,且0.35 g.L-1海带硫酸多糖水平下含量最低。综合来看,当海带硫酸多糖的浓度低于0.35 g.L-1时,对镉毒害下的甜瓜幼苗有一定保护作用,高于0.35 g.L-1时,不仅没有缓解镉毒害的作用,反而加重对甜瓜幼苗的伤害。

海带硫酸多糖对人宫颈癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的:探讨海带硫酸多糖(LPS)对人宫颈癌细胞株HeLa的体外生长、凋亡及细胞周期的影响。方法:以不同浓度的LPS处理HeLacell,用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定细胞增殖情况,细胞染色法观察细胞凋亡的形态,用流式细胞仪记录细胞周期改变、bcl-2及NF-κBp65基因表达情况。结果:LPS使细胞增殖能力下降,细胞出现凋亡的形态学改变,细胞周期受到阻滞,bcl-2蛋白与NF-κBp65的表达随着LPS浓度的增加与作用时间的延长而降低。结论:LPS明显抑制人宫颈癌细胞株的生长,并通过影响bcl-2、NF-κBp65基因蛋白的表达促进宫颈癌细胞凋亡。

海带硫酸多糖的分离纯化及性质研究

[目的]研究海带硫酸多糖的纯化方法、理化性质和生物学活性。[方法]海带粗多糖经离子交换纤维素分离纯化;采用硫酸酚法、比浊法、HPLC法分别研究多糖含量、硫酸根含量和分子量等理化性质;采用促小鼠脾淋巴细胞增殖试验研究其提高免疫功能的作用。[结果]得到3种纯化的海带硫酸多糖,LPS-1、LPS-2、LPS-3,对其中LPS-3的理化性质检测表明,其糖含量为36.90%,硫酸基含量为11.91%,分子量2.69×106D。LPS-3能明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖,具有有丝分裂原样作用,对地塞米松引起的小鼠脾淋巴细胞增殖抑制具有显著的拮抗作用,但LPS-3不具有协同有丝分裂原ConA的作用。[结论]该分离方法可得到3种纯化的海带硫酸多糖,其中LPS-3具有显著提高免疫活性的作用。

海带硫酸多糖对胶质瘤细胞增殖的抑制作用

目的探讨海带硫酸多糖(LPS)对大鼠胶质瘤细胞(C6)的体外生长及细胞周期的影响。方法以不同浓度的LPS处理C6细胞,用细胞计数法测定细胞增殖情况,流式细胞仪记录细胞周期的改变,用比色法测定谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)的含量变化。结果随着LPS浓度的增加与作用时间的延长,LPS使细胞增殖能力下降,细胞周期阻滞在G0/G1期,且LPS可以降低GSTs的活性。结论 LPS可明显抑制C6细胞的增殖,并通过阻滞细胞周期促进C6细胞凋亡;LPS还可抑制GSTs活性。

羟自由基降解法对海带硫酸多糖生理活性的影响

目的:研究羟自由基降解对海带硫酸多糖理化性质和生理活性的影响。方法:分别利用Harber-Weiss和Fenton体系降解海带硫酸多糖。采用硫酸酚法、比浊法、HPLC法研究降解前后多糖的糖含量、硫酸根含量、分子量等理化性质的变化。采用促小鼠脾淋巴细胞增殖实验研究降解前后多糖的生物学功能变化。结果:经羟自由基降解,海带硫酸多糖的分子量明显降低,降解前后多糖的各项理化性质变化不大。降解前后多糖都能明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖,两者作用效果差异不明显(P>0.05),但降解后多糖能更快的发挥作用。结论:羟自由基降解对海带硫酸多糖的理化性质无影响,但能更好的发挥海带硫酸多糖的生理功能。

海带硫酸多糖降解研究进展

海带硫酸多糖是一种高分子量杂多糖,具有多种生物学功能.介绍了降解海带硫酸多糖的有关方法及其功能.根据近几年国内外相关文献以及本实验室的工作,海带硫酸多糖的降解可分为酸解法、碱解法、酶解法、盐解法、氧化降解以及超声波、γ-射线、自由基降解法.自由基降解海带硫酸多糖是一种可行的可用于大量制备低分子量多糖的新技术.降解之后的海带硫酸多糖有广泛的生物学功能,具有巨大的开发前景,这种方法也可用于其它多糖的降解.

海带硫酸多糖对小鼠腹腔巨噬细胞激活及细胞毒作用的影响

目的:探讨海带硫酸多糖(LPS)对小鼠腹腔巨噬细胞MΦ的激活及细胞毒作用,为研究LPS作用机体抑制S-180细胞生长的作用提供实验依据。方法:小鼠随机分为5组,生理盐水NC为对照组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为实验组,分别腹腔注射不同浓度的LPS 20、40、80和120mg/kg·d,连续注射2 d,然后制备腹腔MΦ效应细胞和用传代8 d龄腹水型S-180瘤细胞制备靶细胞,使效:靶之比为5:1,在96孔培养板上进行MΦ细胞毒活性测定。结论:海带硫酸多糖能激活小鼠腹腔巨噬细胞,对S-180肿瘤细胞具有较好的杀伤作用。

海带硫酸多糖对小鼠腹腔巨噬细胞IL-1分泌功能的研究

研究海带硫酸多糖(Laminaria polysaccharide sulfate,LPS)对小鼠腹腔巨噬细胞IL-1分泌功能的影响.用不同浓度的海带硫酸多糖培养小鼠腹腔巨噬细胞,产生的IL-1再培养胸腺细胞,最后用MTT颜色反应法测定胸腺细胞的增生情况.IL-1在1:5和1:10稀释度下,以浓度15μg/ml的LPS作用效果最好,A值分别为0.034和0.026;而在1:20的稀释度下,则以30μg/ml的LPS作用效果最好,A值为0.037.在三种稀释度下LPS对胸腺细胞的诱生曲线皆成倒"U"形,说明海带硫酸多糖具有免疫调节作用,可以诱导胸腺细胞的增生.

海带硫酸多糖降解产物的抗氧化活性研究

采用体外实验研究海带硫酸多糖降解组分SL3、HSL5对大鼠肝脂质过氧化的保护作用及对超氧阴离子自由基的清除作用.结果显示:原糖、组分SL3及组分HSL5皆能清除超氧阴离子自由基,并对自发性脂质过氧化和H2O2诱导的脂质过氧化具有保护作用;组分HSL5抗脂质过氧化作用最明显、清除超氧阴离子能力也最强.

海带硫酸多糖的分离纯化研究

酶解法提取得海带多糖,分别经过季铵盐沉淀法、乙醇沉淀法、离子交换层析、凝胶层析进行纯化后,酶解海带液的回收率达60%,提取率为3.2%。

从海带根中提取纯化褐藻硫酸多糖

海带根粉碎后 ,经过酶解 ,去除褐藻酸 ,得到酶解液 ;通过DE 4 1、DE 80离子交换柱层析 ,得到海带硫酸多糖(FGS)F1 F8的 8种不同组分 ;再用Sepharose 2B凝胶柱层析纯化 ,获得层析纯F1 F8的FGS .我们初步测定了 8种FGS的分子量、单糖组分及其摩尔比 .FGS为一类含有鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖以及硫酸根的杂多糖 .

海带褐藻多糖硫酸酯对腺嘌呤诱导的小鼠高尿酸血症的拮抗作用

本文探讨了海带褐藻多糖硫酸酯(fucoidan from Laminaria japonica,FL)对腺嘌呤诱导的小鼠高尿酸血症的拮抗作用。首先利用腺嘌呤灌胃法建立高尿酸血症动物模型,再以不同剂量(0.100、0.150、0.200 g/kg)的海带褐藻多糖硫酸酯治疗4周,最后对小鼠血清尿酸、肌酐、肝脏匀浆液中腺苷脱氨酶(ADA)和黄嘌呤氧化酶(XOD)的活性及小鼠肾脏组织病理学变化进行检测(HE染色)。结果表明,与空白组相比,腺嘌呤能极显著升高小鼠血清尿酸、肌酐水平、肝脏XOD及ADA活性(P<0.01)。与模型组相比,海带褐藻多糖硫酸酯各剂量均能极显著降低小鼠血清尿酸、肌酐水平、肝脏XOD及ADA活性(P<0.01)。光镜观察结果显示,与模型组相比,海带褐藻多糖硫酸酯治疗组小鼠的肾损伤有一定程度恢复。综上所述,海带褐藻多糖硫酸酯对腺嘌呤诱导的小鼠高尿酸血症有一定程度的缓解作用。

超声波降解海带硫酸化多糖的研究

以超声功率,多糖浓度和作用时间为影响因素设计正交实验,优化海带硫酸化多糖的降解工艺.降解产物的特性粘度为0.987mL/mg、分子量为46.4KD,超声波可以有效降解海带硫酸化多糖,降解之后海带硫酸化多糖的多糖含量、硫酸根含量无有变化.

海带多糖硫酸酯对bFGF诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究海带多糖硫酸酯WPS、WPS-1、WPS-2和WPS-3对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法:采用组织贴块法培养VSMC并用免疫组织化学染色法对VSMC进行鉴定;采用bFGF诱导VSMC增殖;以MTT法检测海带多糖硫酸酯对bFGF诱导的VSMC增殖的影响;黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶产超氧阴离子自由基(O2-.)体系测定海带多糖硫酸酯对O2-.的清除力。结果:在0.1～1mg/mL质量浓度范围内,WPS、WPS-1和WPS-3对bFGF诱导的VSMC增殖具有抑制作用,其中WPS的增殖抑制性表现显著。WPS-2则对VSMC增殖基本无影响。在O2-.清除力上,WPS-2对O2-.清除率仅为34%,而其他组分自由基清除率均超过70%。结论:WPS、WPS-1和WPS-3对bFGF诱导的VSMC增殖均有显著抑制作用,且抑制作用可能与它们的自由基清除能力相关。