海带蛋白的提取和活性研究

采用5％NaOH、0．15mol／L NaCl、0．1mol／L磷酸盐缓冲液、0．15mol／L NaCl及0．06％纤维素酶和1％SDS溶液提取新鲜海带中的蛋白质，并采用Brrddford的方法测定提取的蛋白质含量。结果表明，采用5％NaOH＋0．06％纤维素酶浸泡，然后经超声波破碎，离心取上清液进行100％饱和度的（NH4）2SPO4沉淀，对所得沉淀透析后冻干所得海带蛋白质的含量较多。时间飞行质谱表明蛋白质分子量为872～7705m／z。抑菌试验表明海带蛋白对大肠杆菌、产气杆菌、金色葡萄球菌具有抑制作用。同时，以海带蛋白（5mg／kg）对高血压模型大鼠灌胃具有良好的降压作用。

海带蛋白提取工艺研究

以海带粉为原料,采用酶法提取海带蛋白,研究了酶添加量、料液比、pH、提取时间、温度等因素对海带蛋白提取率的影响。经单因素及正交试验得出海带蛋白的最佳提取条件为:液料比75,pH值11,提取时间5 h,酶添加量320 u/g。各因素对酶法提取海带蛋白的影响次序为:液料比>酶添加量>pH值>提取时间。

超声辅助酶解海带蛋白制备抗氧化肽及其活性研究

海带是一种食药两用的海生褐藻植物,营养丰富,其蛋白质含量高、氨基酸种类齐全、比例适当,是酶法制备生物活性肽的理想蛋白原料。实验以海带蛋白为原料,以DPPH自由基清除率为评价指标,采用单因素试验和响应面试验优化超声辅助酶解海带蛋白制备抗氧化肽工艺,探讨酶种类,超声时间、酶底比、酶解温度、pH和超声功率对制备抗氧化肽的影响,并采用Box-Behnken试验设计的响应面(response surface methodology,RSM)分析方法优化工艺。结果表明,中性蛋白酶为最佳酶,酶解海带蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺条件为酶底比2.3%、超声时间91min、超声功率240、酶解温度44℃,所得的DPPH自由基清除率为84.25%。对所得抗氧化肽DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、还原能力、羟基自由基清除率测定,结果表明其具有较好的抗氧化活性。本实验为酶解海带蛋白制备抗氧化肽工艺优化及海带蛋白抗氧化肽在抗氧化保健食品中的开发应用提供了依据。

响应面法优化海带蛋白提取工艺

采用碱酶法提取海带蛋白,从温度、料液比、pH、酶添加量、提取时间等五方面,对其提取工艺进行了研究。经单因素及响应面实验得出,海带蛋白的最佳提取条件为:温度50℃,液料比75,pH值11,酶添加量335u/g,提取时间5h。

海带硫酸多糖蛋白复合物的气相色谱分析

为开发海洋资源,对海带有效成分海带硫酸多糖蛋白复合物(glycocalyx of sulfated polysaccharide from Lami-naria japonica,GPL)的结构组成进行分析。GPL为本实验室制备,经检测GPL中硫酸基含量为29.12%,总糖27.8%,蛋白质12.69%。通过衍生化处理,然后采用气相色谱仪分析该多糖蛋白复合物的单糖组成。结果表明GPL是主要有岩藻糖聚合而成的复合物,另外含有甘露糖、半乳糖、葡萄糖和木糖等。

酶解海带蛋白制备抗菌肽的工艺优化

为优化碱性条件下海带抗菌肽的制备工艺,以海带蛋白为原料,采用碱性蛋白酶酶解以获得具有抗菌活性的多肽。通过酶解p H、酶底比、酶解时间及酶解温度等单因素试验,探讨了抗菌肽对大肠杆菌抑菌率的影响,并利用响应面法优化制备抗菌肽的最佳工艺条件。结果表明,最佳抗菌肽制备条件为:pH 11、酶底比7.6%、酶解时间4.6 h、酶解温度39.9℃。回归方程预测抑菌率可达30.62%,在最佳酶解条件下,3次验证试验测得抗菌肽对大肠杆菌的抑菌率为30.14%,与预测结果基本一致。该工艺操作便捷,为海带深加工利用提供理论依据。