中药复方海康灵对东莨菪碱所致痴呆小鼠学习记忆影响及其机制的实验研究

目的:观察中药复方海康灵对东莨菪碱诱导的记忆障碍小鼠学习记忆的的影响,并进一步探讨其可能的作用机制。方法:各组小鼠除正常对照组、东莨菪碱组(模型组)灌服生理盐水外,海康灵药物组(低、中、高3个剂量组)灌服海康灵合剂,石杉碱甲组(阳性对照组)灌服哈伯因(HupA),连续灌胃22d。从第16天起进行Morris水迷宫行为测试,连续7d。行为测试结束后,进行小鼠脑组织和血清中生化指标检测,包括丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及乙酰胆碱酯酶(AchE)的含量测定,以及血清中三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和总胆固醇(T-CHO)的含量测定。结果:预先给予小鼠海康灵22d可改善东莨菪碱导致的小鼠记忆障碍,使脑组织和血清中抗氧化酶SOD、GSH-Px及AchE活性升高,而MDA含量降低,与模型组相比,海康灵药物组血清中三酰甘油和总胆固醇水平均明显降低,高密度脂蛋白水平明显升高。结论:海康灵对东莨菪碱引起的小鼠学习记忆能力障碍有改善作用,其作用机制可能与其对抗小鼠体内自由基生成、降低胆固醇和血脂水平及改善中枢胆碱能系统功能有关。

中药复方海康灵含药血清对过氧化氢诱导的神经细胞凋亡的影响

目的观察海康灵对SH-SY5Y神经细胞凋亡、细胞内线粒体膜电位和钙离子的影响。方法采用血清药理学方法,用流式细胞仪观察海康灵对过氧化氢(H2O2)损伤的SH-SY5Y神经细胞凋亡、细胞线粒体膜电位和钙离子的影响。结果与模型组比较,海康灵含药血清能明显抑制H2O2引起的SH-SY5Y神经细胞的凋亡,稳定线粒体膜电位,抑制钙离子内流。结论以上结果提示,海康灵可通过抑制胞浆钙离子升高,进而稳定线粒体膜电位,从而发挥其抑制神经细胞凋亡的作用。

HPLC测定海康灵中大黄酸、大黄素的含量

目的建立用高效液相色谱法测定海康灵中大黄酸、大黄素含量的检测方法。方法用美国Waters公司生产的2690型高效液相色谱仪,依利特HypersilC18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-0.3醋酸(87∶13);检测波长为434nm;流速为1.0mL·min-1;柱温为26°C。结果大黄酸在1.47～29.4μg·mL-1、大黄素在1.16～23.2μg·mL-1范围内呈良好线性关系;回收率大黄酸为96.8,大黄素为97.9;RSD大黄酸为2.0,大黄素为1.0。结论本方法检测快速,定量准确,重现性好,可用于海康灵的含量测定。

海康灵含药血清在体外对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用

目的观察海康灵含药血清(HKL-serum)对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。方法采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞过氧化氢(H2O2)损伤模型。通过观察细胞形态,测定细胞存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,检测HKL-serum对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。结果同造模组比较,10%,15%HKL-serum能减轻H2O2引起的SH-SY5Y神经细胞的损伤,明显提高细胞的存活率,减少LDH的释放量。结论结果显示,HKL-serum对SH-SY5Y神经细胞损伤具有明显的保护作用。

海康灵复方对Aβ_(1-40)诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的:研究中药复方海康灵对Aβ1-40致神经细胞损伤的保护作用。方法:采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞Aβ1-40损伤模型。通过观察细胞形态、测定细胞存活率(MTT法)、Hoechst染色检测细胞凋亡,研究海康灵对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。结果:海康灵复方能减轻Aβ1-40引起的SH-SY5Y神经细胞的损伤,提高细胞的存活率,能有效抑制Aβ1-40所致的神经细胞凋亡。结论:中药复方海康灵对Aβ1-40致神经细胞损伤有保护作用。

海康灵合剂对免疫抑制小鼠免疫功能的影响研究

目的:研究海康灵合剂对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:以海康灵合剂连续灌胃14d,采用绵羊红细胞免疫法检测小鼠血清溶血素抗体水平,观察其对小鼠体液免疫的影响;用MTT法检测刀豆蛋白所致的脾淋巴细胞增殖,观察其对细胞免疫的影响;用碳粒廓清实验检测巨噬细胞的廓清指数,观察其对非特异性免疫的影响。结果:海康灵合剂可显著提高免疫功能低下小鼠血清溶血素水平,对抗环磷酰胺所致淋巴细胞增殖能力及单核巨噬细胞吞噬功能的降低。结论:海康灵合剂可以提高实验小鼠的免疫功能。

海康灵各组分抗神经细胞损伤有效部位和有效剂量的研究

目的:通过比较海康灵复方中单味药对过氧化氢(H2O2)诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用,筛选更为理想的量效关系。方法:采用体外细胞培养的方法,复制神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞H2O2损伤模型。通过MTT法测定细胞存活率,检测海康灵复方中单味药与复方对SH-SY5Y细胞损伤的保护作用。结果:根据最佳有效剂量组建的海康灵新复方(浓度为0.159g.mL-1)同单味药与原复方比较,能减轻H2O2引起的SH-SY5Y细胞的损伤,明显提高细胞的存活率。结论:海康灵新复方对H2O2诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有明显的保护作用。