“金花菌”发酵对湖北海棠叶营养物质及生物活性的影响

为探究金花菌发酵对湖北海棠叶的影响,测定不同发酵时间下湖北海棠叶提取物中多糖、可溶性蛋白、多酚含量及DPPH清除率的变化。结果表明,湖北海棠叶发酵8 d的效果最佳,提取物中多糖、可溶性蛋白含量分别比发酵前降低了48.73%、43.68%;多酚含量比发酵前提高了79.63%(p<0.05),发酵后的湖北海棠叶提取物的DPPH清除率提高了62.40%。该试验为金花菌改善湖北海棠叶茶饮品质提供了理论依据。

湖北海棠叶化学成分及其应用研究进展

湖北海棠叶是2014年卫生部第20号公告批准的新食品原料,其研究价值主要集中于生物活性成分。基于此,本文归纳了现阶段国内外湖北海棠叶生物活性成分及其提取方法,并从生物活性成分、生理功能等方面综述相关研究进展,以期为湖北海棠叶的创新应用提供思路。

湖北海棠叶活性成分、功能特性及开发利用研究进展

湖北海棠[Malus hupehensis(Pamp.)Rehder]是药食两用植物,是湖北省西部重要的优势植物资源。近年来的研究表明,湖北海棠叶中富含黄酮类、多酚类、皂苷类等多种活性成分以及多种人体所必需的微量元素如硒、锌、铁等,具有改善认知功能、抗肿瘤、保护肝脏、雌激素样活性、降血糖、调血脂、抗氧化等功效,相关产品开发仍处于初级阶段。综述了湖北海棠叶的活性成分、功能特性及开发利用情况,以期为促进湖北海棠叶的广泛应用提供参考。

响应面优化超声波辅助酶法提取湖北海棠叶抗氧化物

为研究湖北海棠叶中抗氧化物最佳提取工艺,以羟基自由基清除率为参考指标,采用响应面优化超声波辅助酶法对湖北海棠叶抗氧化物提取条件进行研究。结果表明:超声波辅助酶法最佳工艺为超声功率100 W,液料比17:1 mL∙g^(−1),超声时间32 min,加纤维素酶量2.6%,酶解时间49 min。此条件下羟基自由基清除率为89.9%±0.06%,提取物中黄酮含量14.01%,多酚含量8.93%,多糖含量7.65%,相比煎煮法、回流法、酶法和超声波法,提取物活性物质含量提高了10%以上,DPPH清除率和羟基自由基清除均提高20%以上。利用超声波辅助酶法提取湖北海棠叶抗氧化物效果较好。

不同品种和时期海棠叶红茶品质成分差异分析和评价

为探究不同品种和时期海棠叶红茶品质差异及海棠叶红茶的价值,以4月、6月和8月的7个海棠品种的嫩梢为原料制成海棠红茶,分析其主要成分、抗氧化活性、感官得分的差异性,再综合主成分分析结果和感官得分评价,得出综合品质较优的海棠品种茶和时期。结果表明,可溶性糖和单宁酸含量最高的是6月的‘亚瑟王’和‘钻石’,游离氨基酸、多酚、总黄酮和原花青素含量最高的都是4月的‘钻石’。DPPH自由基、羟自由基、亚硝酸盐的清除率和铁还原力最高的分别是6月的‘亚瑟王’、8月的‘约翰东’、4月和6月的‘钻石’。酚类物质以根皮苷为主,根皮苷含量最高的是6月的‘约翰东’。感官得分前三的品种为‘粉芭蕾’、‘约翰东’和‘钻石’,4月的感官得分最高。主成分分析综合得分前三的品种是‘钻石’、‘粉芭蕾’和‘约翰东’,4月的综合得分最高。故制作红茶品质优的海棠品种有‘钻石’、‘粉芭蕾’和‘约翰东’,且采摘时期以4月最佳。

响应面法优化超声波辅助提取湖北海棠叶中总黄酮工艺

采用超声波辅助提取湖北海棠叶中总黄酮,并利用响应面法对提取工艺参数进行优化。在料液比、乙醇体积分数、超声时间、超声功率等单因素试验基础上,进行四因素三水平的Box-Behnken设计,利用响应面法分析4个因素对湖北海棠叶中总黄酮得率的影响。超声波法提取湖北海棠叶中总黄酮的最佳工艺条件为液料比50:1(mL/g)、乙醇体积分数67.35%、超声时间3.2h、超声功率162.4W,总黄酮得率预测值为12.78%,验证值为12.76%,与理论值的相对误差为0.02%,表明该优化方法合理可行。

垂丝海棠叶多糖的超声提取及其抗氧化性质研究

在单因素实验的基础上,采用Box-Behnken中心组合实验和响应面分析法,研究提取时间、超声波功率、液料比对垂丝海棠叶多糖含量的影响,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确立最佳提取工艺为:提取时间20 min,液料比45∶1,超声波功率135W。抗氧化实验结果表明,在达到最大浓度0.74mg·m L-1时,垂丝海棠叶多糖(超声)、垂丝海棠叶多糖(煮沸)和Vc的对DPPH的清除率依次为79.9%,69.7%,64.8%,垂丝海棠叶多糖(超声)和垂丝海棠叶多糖(煮沸)对·OH自由基的清除率分别为60.1%、51.2%,垂丝海棠叶多糖(超声)还原Fe3+能力较强。

超临界CO_2萃取法与水蒸气蒸馏法提取垂丝海棠叶挥发油成分及其抗氧化活性的比较

目的比较以超临界CO2萃取与水蒸气蒸馏法提取的垂丝海棠叶挥发油成分及其抗氧化活性的差别。方法采用超临界CO2萃取法和水蒸气蒸馏法从垂丝海棠叶中提取挥发油,气相色谱-高分辨质谱(GC-HRMS)法对其成分进行分析,归一法确定其相对百分含有量。结果从超临界CO2萃取的挥发油中鉴定出30个成分,占总离子流图峰面积的65.72%;从水蒸气蒸馏法提取的挥发油中鉴定出27个,占91.96%。两种挥发油中有9种共同成分。另外,超临界CO2萃取法所得的挥发油对DPPH自由基和Na NO2的清除能力均强于水蒸气蒸馏法所得的挥发油和维生素C。结论两种不同提取工艺下垂丝海棠叶挥发油成分的差别较大,超临界CO2萃取中挥发油成分抗氧化活性较强。

三叶海棠叶中水溶性总糖含量的测定

目的测定三叶海棠叶中的水溶性总糖含量。方法三叶海棠叶的水提液经酸水解-乙酸乙酯萃取后,采用试样空白的蒽酮-硫酸比色法,以葡萄糖为对照品进行总糖含量测定。结果葡萄糖在7～35μg/mL范围内,吸光度与浓度的线性关系良好(r=0.998 1,n=6),平均回收率为94.1%,RSD=1.0%(n=6);3批三叶海棠叶中的水溶性总糖平均含量为13.1%。结论利用酸水解-乙酸乙酯萃取的差示光谱法(△A法)消除了试样基体有色和脂溶性物质的干扰,使显色后的吸收峰明显改善,结果可靠,重复性好;为三叶海棠叶中水溶性总糖的含量测定提供了一种可行的方法。

湖北海棠叶黄酮类物质提取工艺的研究

通过实验测定了湖北海棠叶中总黄酮的含量,并对湖北海棠叶黄酮提取工艺进行了研究。主要探讨了采用乙醇浸提法提取湖北海棠叶黄酮类物质的最佳工艺条件。实验结果表明:湖北海棠叶中总黄酮的含量为4.5720%;乙醇浸提法的最佳工艺参数为乙醇浓度50%、料液比1∶50、浸提温度60℃、浸提时间4 h。

湖北海棠叶的应用历史与研究现状

湖北海棠叶是我国别样茶的一种,在民间有悠久的应用历史。现代研究表明,湖北海棠叶含有丰富的黄酮类、多酚类成分,具有降血糖、降血脂、调节脂质代谢、抗氧化、抗菌消炎等多种药理活性。本文通过查阅中外文献,对湖北海棠叶的应用历史、植物形态、地理分布、化学成分和药理活性进行综述,为其系统研究和深入开发提供参考。

星点设计-效应面法优选湖北海棠叶总黄酮的提取工艺

目的优选湖北海棠叶总黄酮的提取工艺。方法采用星点设计-效应面法对湖北海棠叶有效部位的提取工艺进行优化,以乙醇浓度、溶剂用量、提取时间为自变量,以总黄酮和根皮苷含量的综合评分为因变量,将各数据输入软件中,从而从图上的较佳区域直接读出最佳的工艺条件。结果湖北海棠叶总黄酮的提取工艺条件为:用8倍量70%乙醇,回流提取2次,每次150min。结论优选的工艺参数合理、可行。

HPLC法测定三叶海棠叶中白杨素苷含量

目的建立三叶海棠叶中白杨素苷含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定,色谱柱:GeminiC18 110A柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(30∶70),流速:1.0 mL/min,柱温:4O℃,检测波长:270 nm,进样量:20μL。结果白杨素苷在2.0～20.0μg/mL范围内具有良好的线性关系(r=0.999 5),三叶海棠叶中白杨素苷的平均含量为5.05%,平均回收率为97.4%,RSD为1.2%(n=5)。结论三叶海棠叶中白杨素苷含量较高,该测定方法灵敏、结果准确、重现性好。

茶山海棠叶提取物对烟草花叶病毒活性的抑制效果

为烟草花叶病毒植物源农药的研发提供参考,采用半叶枯斑法测定茶山海棠叶提取物对烟草花叶病毒活性的影响。结果表明:茶山海棠叶的乙醇提取物,石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇和水相的液-液萃取物对烟草花叶病毒(TMV)活性均具有显著体外钝化效果;当各提取物浓度为10mg/mL时,其对TMV的抑制率为100.00%~64.13%;茶山海棠叶各提取物对TMV的初侵染抑制率为47.57%~18.62%,增殖抑制率为25.56%。

湖北海棠叶中黄酮类化合物抗氧化作用的研究

以湖北海棠叶中黄酮类化合物为研究对象,采用乙醇回流提取法,用乙醇体积分数、料液比、提取温度以及提取时间为主要考查因素,通过正交试验,确定了湖北海棠叶中黄酮类化合物的最佳提取工艺为:乙醇溶液体积分数为50%,料液比为1∶20,在80℃水浴条件下提取3h。通过定期测定猪油样品过氧化值(POV)的变化,研究了湖北海棠叶中黄酮类化合物的抗氧化性能。湖北海棠叶中黄酮类化合物对猪油具有较强的抗氧化作用,且随着其添加量的增加而增大。

离线二维高速逆流色谱分离制备湖北海棠叶中的黄酮化合物

首次利用离线二维高速逆流色谱法从湖北海棠叶中分离制备3种黄酮化合物。第一次分离以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:4:1:4,v/v)为溶剂系统,在2.5 h内分离得到纯度为96.5%的3-羟基根皮苷;第二次分离以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-0.1mol/L Cu2+水溶液(1:4:1:4,v/v)为溶剂系统,在2.0 h内分离得到纯度98.1%的槲皮素和纯度98.9%的根皮苷。最终,成功从200 mg湖北海棠叶乙酸乙酯萃取部位中制备25.4mg的3-羟基根皮苷,8.5 mg的槲皮素,31.3 mg的根皮苷。利用HPLC、ESI-MS和1H NMR对分离物进行结构鉴定。

HPLC法测定三叶海棠叶中PMAGE含量

目的建立三叶海棠叶中单一成分2-((4-(3,4-二羟基苯基)-2-氧代丁氧基-甲氧基)-2-羟基丙二酸-1-β-D-吡喃葡萄糖单酯的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定,色谱柱为Phenomenex C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-水(21∶79),流速为1.0 ml/min,检测波长为285 nm;柱温为40℃;进样量为20μl。结果PMAGE在4.5~180.0μg/ml的范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),三叶海棠叶中PMGAE的平均含量为8.12%,平均加样回收率为100.6%,RSD为1.7%(n=5)。结论三叶海棠叶中PMAGE的含量较高,本测定方法灵敏度高、结果准确、重现性好,可用于三叶海棠叶中PMAGE的含量测定。

变叶海棠叶总黄酮的分离纯化及体外抗炎活性（英文）

通过吸附和解吸附实验,考察并优化了变叶海棠叶中总黄酮的纯化工艺及工艺参数。通过比较12种不同极性的大孔吸附树脂对变叶海棠叶总黄酮的吸附、解吸附能力,最终选取AB-8树脂进行实验。结果表明,最优静态吸附、解吸附工艺参数为:pH=4下静态吸附3h;体积分数为70%的乙醇(pH=7)静态解吸附3h;最优动态吸附、解吸附工艺参数:以2 BV/h的流速上样9 BV(柱体积)样品溶液,随后在2 BV/h流速下,分别以6 BV水、6 BV体积分数为20%的乙醇、6 BV体积分数为40%的乙醇、6 BV体积分数为60%的乙醇、6 BV体积分数80%的乙醇对上样柱进行洗脱,在此条件下分离纯化,变叶海棠叶总黄酮质量分数由32.79%提高到59.18%。红外光谱显示变叶海棠叶中具备黄酮类物质特征官能团,证明黄酮类物质的存在。对精制后的变叶海棠叶总黄酮进行体外抗炎作用考察,在50~400mg/L质量浓度下,变叶海棠叶总黄酮对脂多糖诱导巨噬细胞炎症反应有明显的抑制作用,可能是通过抑制与炎症相关的基因表达来抑制NO、IL-6、IL-1β、TNF-α的分泌。

湖北海棠叶煎液药效学实验研究

对湖北海棠叶水煎液进行了体外抑菌与小鼠耐缺氧、耐低温、抗疲劳实验,结果发现湖北海棠叶水煎液对金葡菌及大肠杆菌有较好的抑菌作用,并具提高小鼠耐缺氧、耐低温与运动耐受能力的作用。

湖北海棠叶水煎剂对HSV-1病毒性结膜炎治疗作用

目的研究湖北海棠叶水煎剂对I型单纯疱疹病毒(HSV-1)所致结膜炎的治疗作用。方法采用湖北海棠叶水煎剂作为实验样品,用利巴韦林滴眼剂作对照。分别以HSV-1感染Vero细胞和家兔眼结膜,通过观察细胞病变效应判断药物抑制病毒复制的环节。对家兔眼结膜炎疾病模型进行眼结膜组织病理学检查,观察低、中、高浓度湖北海棠叶水煎剂对HSV-1兔眼结膜炎的治疗作用。结果体外实验中,湖北海棠叶水煎剂对HSV-1增殖无抑制作用。整体动物实验中,眼部给予湖北海棠叶水煎剂3,6 kg·L-1,连续给药7 d,家兔眼结膜病理性炎症反应明显减弱甚至消失,与0.9%氯化钠溶液对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。中、高剂量组家兔眼结膜炎治疗有效率分别为83.3%和100.0%。结论湖北海棠叶水煎剂可减轻HSV-1所致家兔结膜炎炎性反应。