湖北海棠总黄酮对卵巢早衰大鼠卵巢功能及骨代谢的影响

目的观察湖北海棠总黄酮对卵巢早衰大鼠卵巢功能及骨代谢的影响。方法将48只成年雌性大鼠随机分为空白组、模型组、戊酸雌二醇组及湖北海棠总黄酮高、中、低剂量组,每组8只。除空白组外,其余各组每天给予灌胃雷公藤多苷片(75 mg/kg),连续14 d,复制卵巢早衰模型。第15天起,戊酸雌二醇组给予灌胃戊酸雌二醇(1 mg/kg);湖北海棠总黄酮高、中、低剂量组分别给予灌胃湖北海棠总黄酮(160、80、40 mg/kg),每日1次,连续给药21 d。观察各组大鼠:动情周期;卵巢指数、子宫指数;血清中雌激素(E2)、孕激素(P)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平变化;卵巢、子宫形态学变化;血清碱性磷酸酶(ALP)、骨碱性磷酸酶(BALP)活性、1,25(OH)2D3含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,检测卵巢组织中ERα的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,卵巢指数、子宫指数降低,血清中E2、P水平降低,FSH水平升高(P<0. 05,P<0. 01)。与模型组比较,戊酸雌二醇组和湖北海棠总黄酮治疗组血清生殖激素水平得到明显改善(P<0. 05),卵巢内生长卵泡数量增多,子宫内膜增厚,血清中ALP活力、BALP含量降低,1,25(OH)2D3含量升高(P<0. 05,P<0. 01);血清中SOD活力增强,MDA含量降低;卵巢组织中颗粒细胞、基质细胞ERα的表达增强。结论湖北海棠总黄酮对卵巢早衰大鼠卵巢及骨质疏松具有一定的治疗保护作用,其作用机制可能与体内抗氧化能力、增强颗粒细胞内雌激素受体的表达密切相关。

Box-Benhnken试验设计优化湖北海棠总黄酮口崩片的制备工艺

目的优化湖北海棠总黄酮口崩片的制备工艺。方法以片剂的崩解时限、硬度、片重差异为评价指标,采用单因素实验确定压片方法、MCC∶乳糖的比例、崩解剂的种类及用量、润滑剂的种类、主药药量;采用Box-Benhnken试验设计,响应面分析法优化湖北海棠口崩片的最优制备工艺。结果确定最优制备工艺:湖北海棠总黄酮提取物35%、乳糖∶MCC(1∶1)37%、交联聚维酮(PVPP)12%、甘露醇15%、硬脂酸镁1%,采用全粉末压片制备。制备的片剂片重差异符合要求,平均硬度在73.8 N左右,崩解时限在24 s左右。结论湖北海棠总黄酮口崩片制备工艺可行,操作简便,能够满足工业化大生产的要求。

湖北海棠叶总黄酮对日本血吸虫感染小鼠肝纤维化的抑制作用

目的探讨湖北海棠叶总黄酮对日本血吸虫感染所致小鼠肝纤维化的保护作用。方法随机将未感染和感染日本血吸虫尾蚴昆明小鼠分成A～F6组。即未感染空白对照组(A)、模型组(B)、复方鳖甲软肝片阳性组(C)、湖北海棠叶总黄酮治疗高剂量[114mg(/kgd)]组(D)、中剂量[57mg(/kgd)]组(E)、低剂量[28.5mg(/kgd)]组(F),每组10只。感染后第42天,C、D、E、F组均用吡喹酮驱虫治疗,500mg/(kgd)2日疗法,之后各组开始灌胃给药持续治疗60d,A组和B组生理盐水灌胃对照。实验结束处死小鼠,留取肝脏组织和血清,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)含量,计算肝体指数,测定肝组织中羟脯氨酸(HYP)。苏木素伊红和Masson胶原纤维染色观察小鼠肝组织变性、虫卵肉芽肿与胶原沉积等病理改变。结果与A组相比,B、C、D、E、F组小鼠肝脏有明显虫卵肉芽肿形成、胶原沉积与肝纤维化,伴有不同程度肝细胞炎性损伤坏死。血清中ALT、AST、HA和肝组织中HYP含量均明显升高(P<0.05或P<0.01)。与B组相比,湖北海棠叶总黄酮高、中、低剂量组ALT、AST、HA和HYP含量及肝体指数均明显降低(P<0.05或P<0.01),肝组织坏死与胶原沉积明显减轻,虫卵肉芽肿面积减小。结论湖北海棠叶总黄酮具有抗血吸虫性肝纤维化作用。

湖北海棠总黄酮对成骨细胞增殖分化及破骨细胞活性的影响

目的:探讨湖北海棠总黄酮及其主要成分根皮苷对大鼠成骨细胞增殖分化及破骨细胞活性的影响。方法:取新生大鼠颅骨,用改良组织块消化法分离成骨细胞。MTT法检测药物对成骨细胞增殖的影响,对硝基苯二钠基质动力学法测定细胞内碱性磷酸酶(AKP)的活性。分离培养大鼠破骨细胞。加药共培后检测抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)活性,检查骨吸收陷窝变化。结果:湖北海棠总黄酮能明显促进成骨细胞增殖;提高成骨细胞内碱性磷酸酶活性。湖北海棠主要成分根皮苷能提高成骨细胞内碱性磷酸酶活性;降低抗酒石酸酸性磷酸酶活性,减少骨吸收陷窝数目,与对照组比较差异有统计学意义。结论:湖北海棠总黄酮能促进成骨细胞的增殖和分化,其主要成分根皮苷能促进成骨细胞的分化,抑制破骨细胞的活性和嗜骨活性。

湖北海棠叶总黄酮改善衰老大鼠认知功能障碍的研究

目的探讨湖北海棠Malus hupehensis(Pamp.)Rehd.叶总黄酮对衰老大鼠认知功能障碍的影响。方法选取48只雌性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、VC组及湖北海棠叶总黄酮高、中、低剂量组(150、300、600 mg/kg),每组8只。其中模型组大鼠ip D-半乳糖200 mg/kg,对照组ig给予等量生理盐水;VC组ig VC溶液200 mg/kg;湖北海棠叶总黄酮组ig湖北海棠叶总黄酮150、300、600 mg/kg。连续给药6周,并根据体质量调整给药量。记录大鼠日常活动能力、体质量、记忆功能、氧化指标、炎性因子和病理变化的情况。结果与对照组比较,模型组大鼠体质量减轻,学习记忆能力减退,并且脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活力显著下降(P<0.01),MDA水平显著增加(P<0.01)。大鼠脑组织中炎性因子一氧化氮(NO)、总一氧化氮合成酶(T-NOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量显著增加(P<0.01)。与模型组比较,湖北海棠叶总黄酮能显著缩短Morris水迷宫实验中衰老大鼠到达平台的潜伏期和到平台的距离,并降低其穿越平台的次数(P<0.01);湖北海棠叶总黄酮能够显著提高脑组织中抗氧化酶SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA水平(P<0.05、0.01);湖北海棠叶总黄酮还可显著降低炎性因子NO、T-NOS和iNOS含量(P<0.05、0.01)。结论湖北海棠叶总黄酮对衰老大鼠的认知功能障碍有改善作用,其机制与通过抗氧化、抗炎作用、恢复神经细胞完整性有关。

昆明山海棠根茎的化学成分研究

目的研究昆明山海棠Tripterygium hypoglaucum根茎的化学成分。方法采用95%乙醇渗漉提取昆明山海棠根茎的化学成分,运用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、中压液相等色谱分离手段对提取物进行分离纯化,并结合核磁共振、质谱等波谱技术进行结构鉴定。结果从昆明山海棠中分离得到12个化合物,分别鉴定为3β-羟基-4-羟甲基-阿松香-8,11,13-三烯-7-酮(1)、3β-乙酰齐墩果酸(2)、大黄素甲醚(3)、canophyllal(4)、大黄酚(5)、quinone 21(6)、tripterifordin(7)、雷酚萜B(8)、3,4-二甲氧基苯酚(9)、integracin A(10)、雷公藤红素(11)、β-谷甾醇(12)。结论化合物1为1个新二萜类化合物,命名为海棠酮;化合物8~10为首次从该植物中分离得到。