产细菌素海洋乳酸菌的筛选及细菌素抑菌机制

【目的】筛选海洋源产细菌素乳酸菌,探讨细菌素抑菌机制。【方法】从市售海鱼的肠道中筛选出一株对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠埃希菌(Escherichia coli)有较强抑菌效果的菌株GOFEL226,通过16S rDNA序列鉴定乳酸菌,用乙酸乙酯提取细菌素,利用分光光度法、电导率法、扫描电镜技术探究细菌素的抑菌机制。【结果】菌株GOFEL226为戊糖乳植物杆菌(Lactiplantibacillus pentosus),GFEB226细菌素对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小抑菌质量浓度为0.883 mg/mL;其对指示菌的生长有明显的抑制作用,可导致细胞的蛋白质、核苷酸、带电离子泄漏到细胞外,对细胞膜具有破坏作用。【结论】GFEB226细菌素可通过破坏革兰阳性和革兰阴性菌的细胞膜,使其胞内物质泄漏到胞外,进而导致细胞的死亡。

产胞外多糖海洋乳酸菌的筛选及其多糖发酵工艺优化

【目的】筛选产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的海洋乳酸菌,优化产EPS的发酵工艺,为海洋源乳酸菌胞外多糖的开发利用提供参考。【方法】通过菌落观察、革兰染色、接触酶检验,从湛江沿海的海水、海泥、红树林土壤及鱼肠中初步分离乳酸菌;利用菌落拉丝法结合多糖产量筛选出产EPS的乳酸菌;对EPS产量最高的菌株进行16S rDNA鉴定;以DPPH自由基清除率和总还原力为判据初步评估EPS的抗氧化能力;采用单因素及正交实验得到该菌株产EPS的最佳条件。【结果与结论】共筛出4株产EPS的乳酸菌,分别命名为LAN4、LAH5、LAF1和LAY1。其中以菌株LAN4的EPS产量最高,为(94.63±5.86)mg/L。经16S rDNA鉴定,LAN4为发酵黏液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)。5 mg/mL的LAN4 EPS可清除50.02%的DPPH自由基,总还原力相当于224.74μg/mL的维生素C。菌株LAN4产EPS的最佳培养条件为:葡萄糖添加量30 g/L,酵母蛋白胨添加量40 g/L,发酵时间16 h,发酵温度41℃,在此条件下培养LAN4菌株EPS的产量为(307.53±26.78)mg/L。

海洋源乳酸菌AI-2类群体感应抑制剂对单增李斯特菌抑制效果研究

单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)AI-2类群体感应系统调控的生物被膜与毒力因子是导致其高致病率与高死亡率的主要原因。以测定报告菌哈维氏弧菌BB170的发光值作为筛选指标,对16株海洋源乳酸菌代谢产物中筛选L. m AI-2信号分子的群体感应抑制剂(QSIs),并通过测检QSIs对L. m的MIC值、生长曲线、动力形成、生物被膜形成量,评价QSIs对L. m的控制效应。结果表明:从16株海洋源乳酸菌中筛选到6株乳酸菌的乙酸乙酯提取物对L. m AI-2信号分子活性有良好的抑制作用,占筛选菌株的37.5%,且抑制率均达75%以上,其中菌株Pediococcus pentosaceus zy-B-1乙酸乙酯提取物QSI-B-1抑制率最高(98.5%),并对L. m作用的MIC值为250μg/mL,随着QSI-B-1浓度的增加,对L. m菌落生长与动力形成的抑制作用逐渐加强,形成的生物被膜结构愈加疏松。本研究为利用从海洋环境中筛选乳酸菌源L. m QSIs提供依据。