海洋破囊壶菌Δ~4-脂肪酸脱饱和酶基因在酿酒酵母中的表达

以质粒pGEM-TFAD4为模板,扩增获得1.6kb的Δ4-脂肪酸脱饱和酶基因(FAD4)。将FAD4酶切后连接到HindⅢ/XbaⅠ处理过的pYES2.0载体,构建重组表达质粒pYFAD4。转化酿酒酵母缺陷型菌INVScl,通过SC-U选择性培养基筛选阳性克隆子。添加外源脂肪酸C22:5底物,半乳糖诱导表达。气相色谱分析表明阳性克隆子总脂肪酸中出现了二十二碳六烯酸C22:6(占酵母总脂肪含量的41.13%),Δ4-脂肪酸脱饱和酶基因在酿酒酵母中得到了表达。

植物激素对破囊壶菌生长与产DHA的影响

研究了植物激素对破囊壶菌 (Thraustochytriumroseum)MF2产DHA的影响作用。实验结果表明 :植物激素对T .roseumMF2的生长和产DHA有很大影响 ;赤霉素 (GA)能促进DHA的合成 ,6 苄基腺嘌呤 (BA)能显著促进T .roseumMF2的生长 ,二者的配合使用能明显增加DHA的产量 ;培养基中适宜的添加量为 2mg LGA和 3mg LBA ,可使DHA产量达到 982mg L。

海洋微生物发酵生产廿二碳六烯酸(综述)

廿二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,简称DHA)对人体健康有重要影响.目前DHA主要分离纯化自海洋鱼油,但存在诸多不利因素.研究表明海洋微生物具有大规模工业化生产DHA的潜力.本文综述了近年来在DHA生产菌种选育和发酵条件调控等方面取得的进展.

脂肪酸延长酶和脱饱和酶在酿酒酵母中的共表达

将一种同时含C20-Δ5脂肪酸碳链延长酶(TFD5)基因和C22-Δ4脂肪酸碳链脱饱和酶(FAD4)基因的双基因共表达质粒转化于Saccharomyces cerevisiae中,形成了工程菌株SC.PYFTD5-FAD4.并对工程菌株SC.PYFTD5-FAD4进行了诱导表达,可直接转化底物二十碳五烯酸(EPA,20:5△5,8,11,14,17n-3)生成二十二碳五烯酸(DPA,22:5△4,7,10,13,16n-3)和二十二碳六烯酸(DHA,22:6△4,7,10,13,16,19n-3).