海洋细菌Vibrio agarivorans-1产琼胶酶培养基优化及其酶学性质

以琼胶酶的酶活力为指标,对海洋细菌Vibrio agarivorans-1的培养基组分进行优化,并研究琼胶酶粗酶液的酶学性质。通过单因素和正交试验对海洋细菌Vibrio agarivorans-1的培养条件进行优化,结果表明最佳营养组分为：酵母膏的质量浓度为12g/L,琼脂粉质量浓度为3g/L,NaCl质量浓度为45g/L,在该条件下酶活力达到7.689U/g。其粗酶液的最适反应温度为40℃,最适反应pH为7,在pH范围为6~8的内酶活性较稳定,温度在20~40℃时酶的稳定性较好,但温度达到80℃基本失活。

中国南海海域海洋深层水细菌多样性

中国南海与作为海洋生物多样性中心的印太珊瑚大三角区具有一定的环境与生物连通性,其生境多样,为各种生物类群提供了有利的热带和亚热带海洋环境栖息地,具有极其丰富的生物多样性,是中国海洋生物多样性热点地区,也是重要的海洋生物多样性资源宝库。海洋细菌在生态系统循环中发挥重要作用,通过对南海海洋深层水细菌的探测,可以更加清晰地了解西太平洋和印太交汇区的生物多样性。研究基于参加开放项目获得的南海的深海站点水样,采用高通量测序进行了16S rRNA基因序列测序,分析了南海深海海水细菌群落多样性、菌群构成和多样性特征。该站点南海海洋深层水测定的细菌分属于15门、20纲、24目、86科、140属、150种,表明该区海洋深层水细菌群落丰富。测得优势菌属包括类芽胞杆菌属(Paenibacillus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、海旋菌属(Thalassospira)、噬甲基菌属(Methylophaga)、拟杆菌属(Bacteroides)、纤细芽胞杆菌属(Gracilibacillus)、海洋芽胞杆菌属(Oceanobacillus)、海源菌属(Idiomarina)、嗜油菌属(Oleiphilus)、食碱菌属(Alcanivorax),这些属的细菌在生物材料或药物、生物燃料、水处理、降解石油烃等方面均有开发利用的潜力。属内的解淀粉芽孢杆菌(Lentibacillus amyloliquefaciens)、施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)、柴油食烷菌(Alcanivorax dieselolei)、三浦半岛盐乳杆菌(Halolactibacillus miurensis)、海迪茨氏菌(Dietzia maris)可以具体鉴定到种,这些深海细菌目前已在产抗生素、生物防治、石油降解、反硝化等方面被开发利用。基于高通量测序显示出采样点南海海洋深层水细菌具有独特菌群特征和多样性,有其极为丰富的生物学开发利用价值。

产蛋白酶海洋细菌Bacillus sp.4sp5分离鉴定及降解南极磷虾原肌球蛋白的研究

目的从海洋样品中筛选产蛋白酶海洋细菌及可以降解南极磷虾原肌球蛋白(tropomyosin,TM)的蛋白酶。方法采用透明圈法筛选产蛋白酶菌株,并根据聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)和酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)确定降解效果最佳菌株,对其产的蛋白酶的酶学特性及降解原肌球蛋白条件进行研究。结果最佳为菌株4sp5,经16SrDNA鉴定为Bacillus sp.。蛋白酶的最适作用温度和pH分别为60℃和9。Na^(+)和K^(+)对蛋白酶活有促进作用,其对有机溶剂敏感,表面活性剂对其影响较小。3种抑制剂均可抑制酶的活性。当加酶量为24U/mL时,7.0h能够有效地降解南极磷虾原肌球蛋白,经ELISA试剂盒测定,其致敏性消除率达98.63%。结论菌株4sp5及其产生的蛋白酶在南极磷虾原肌球蛋白脱敏作用中具有应用前景。

产细菌素海洋乳酸菌的筛选及细菌素抑菌机制

【目的】筛选海洋源产细菌素乳酸菌,探讨细菌素抑菌机制。【方法】从市售海鱼的肠道中筛选出一株对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠埃希菌(Escherichia coli)有较强抑菌效果的菌株GOFEL226,通过16S rDNA序列鉴定乳酸菌,用乙酸乙酯提取细菌素,利用分光光度法、电导率法、扫描电镜技术探究细菌素的抑菌机制。【结果】菌株GOFEL226为戊糖乳植物杆菌(Lactiplantibacillus pentosus),GFEB226细菌素对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小抑菌质量浓度为0.883 mg/mL;其对指示菌的生长有明显的抑制作用,可导致细胞的蛋白质、核苷酸、带电离子泄漏到细胞外,对细胞膜具有破坏作用。【结论】GFEB226细菌素可通过破坏革兰阳性和革兰阴性菌的细胞膜,使其胞内物质泄漏到胞外,进而导致细胞的死亡。

海洋鱼类细菌性疾病防治研究进展

简述了海洋鱼类主要的细菌性疾病及其危害,介绍了目前抗生素的应用以及耐药性和残留积累。指出,噬菌体治疗、疫苗接种、生物表面活性剂、抗菌肽和合成肽、益生菌、中草药以及精油等,在预防和治疗各种鱼类细菌性疾病方面极具优势。提出,应结合鱼的种类、致病的病原体、疾病的发展阶段、养殖设施的状况,探索出更好、更可持续的海产养殖细菌性鱼病防治技术,为人类提供更安全的食物和更安全的环境。

海洋红酵母、光合细菌和EM菌对锦鲤色素稳定性的影响研究

在水产养殖中,益生菌作为饲料添加剂既能促进鱼生长发育和新陈代谢,同时又能增加鱼体光亮度。海洋红酵母、光合细菌和EM菌具有丰富的营养和生物活性物质,同时含有天然色素——虾青素。本试验中,以锦鲤幼鱼为研究对象,采取拌料投喂方式,将海洋红酵母、光合细菌和EM菌应用于锦鲤的养殖试验中,旨在探析海洋红酵母、光合细菌和EM菌对锦鲤体色的影响。

海洋细菌Aeromonas hydrophila和Vibrio vulnificus对单萜柠檬烯的生物转化产物分析

研究了南海海洋细菌嗜水性气单胞菌Aerom onas hydrophila(5-213)和创伤弧菌Vibrio vulnificus(13-203)在培养基中添加单萜(D)-柠檬烯后提取产物的组成变化情况。经GC-MS分析发现该两细菌对(D)-柠檬烯有显著的生物催化转化作用,能对底物进行不同程度的氧化、还原、水解、酯化、开环等反应,并产生丰富的系列结构不同的其它萜类化合物:包括单萜、倍半萜、二萜、以及三萜等。通过单萜微生物转化和生物合成必将获得新的活性萜类产品,也为丰富的天然单萜资源的开发与利用提供新的途径和方法。

海洋黏细菌防治甘蔗梢腐病的筛选评价

【目的】明确来源于广西北部湾的海洋黏细菌对甘蔗梢腐病病原真菌的生物防治潜力,为研发有效防治甘蔗梢腐病的生物农药提供科学依据和物质基础。【方法】以来源于广西北部湾不同海洋生境的12种62株黏细菌为研究对象,以2株广西蔗区甘蔗梢腐病优势病原菌甘蔗镰孢菌(Fusarium sacchari)9DF-3-2和FS-2-1为靶标,通过平板对峙培养法评价黏细菌对甘蔗镰孢菌的拮抗作用,初步筛选出潜力活性菌株;利用透析膜对峙培养法、菌丝裂解法和菌丝生长速率法等从拮抗作用方式、对病原菌菌丝生长的影响等方面评价潜力活性菌株对甘蔗镰孢菌的生物防治潜力。【结果】通过平板对峙培养法从62株黏细菌中发现47株黏细菌对2株甘蔗镰孢菌9DF-3-2和FS-2-1具有明显的抑制作用,其活性菌株率达75.8%,有18株黏细菌对2株甘蔗镰孢菌的抑菌直径大于1.000 cm,其中以叶柄黏球菌(Myxococcusstipitatus)T163和蜂窝囊菌(Melittangiumsp.)T269的抑制作用最强。黏细菌胞外发酵液对甘蔗镰孢菌菌丝裂解试验结果显示,黏细菌T163和T269的胞外发酵液对2株甘蔗镰孢菌的菌丝抑制作用最明显;透析膜平板隔离试验结果显示,黏细菌T269、T163和T071受透析膜隔离后对甘蔗镰孢菌仍具有很好的抑制作用;黏细菌发酵提取物抗菌活性测定结果显示,黏细菌T163和T269的发酵提取物对2株甘蔗镰孢菌均具有较好的抑制作用,其中浓度为100.0μg/mL的T163发酵提取物的抑菌活性最好,其对9DF-3-2和FS-2-1的抑制中浓度(EC50)分别为13.97和84.58μg/mL。【结论】来源于广西北部湾的海洋黏细菌T163和T269对甘蔗梢腐病病原菌甘蔗镰孢菌表现出较好的生物活性,具有开发成绿色生物防治剂的潜力。

一株海洋真菌与细菌共培养次级代谢产物的研究

对海洋真菌Penicillium janthinellum HK1-6与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)ATCC 43300共培养的次级代谢产物进行分离纯化与结构鉴定,综合运用多种色谱方法从共培养发酵产物中分离得到5个化合物,采用NMR等光谱方法并参照文献将其分别鉴定为吲哚-3-乙酸(1)、青霉酸(2)、diorcinol(3)、orcinol(4)和paraherquanide N(5)。同时采用质谱-分子网络及GNPS平台技术鉴定了3个吲哚生物碱类化合物notoamide B(6)、paraherquanide F(7)和paraherquamide E(8)。该研究表明,共培养是激活微生物沉默基因簇,发现抗生素类化合物的一种有效方法。

东山湾海带养殖区海洋浮游细菌的群落结构变化

对福建省东山湾一处海带养殖区海水中浮游细菌群落进行考察,以了解在海带生长不同阶段海洋浮游细菌的群落结构变化特征。结果表明,在未挂养海带前,海水中的优势浮游细菌为亚硫酸杆菌属细菌,在海带生长的凹凸期、薄嫩期、厚成期、成熟期,海水中优势浮游细菌分别为假单胞菌属、普里斯特氏菌属、假交替单胞菌属、假交替单胞菌属细菌。该研究深化了对海洋细菌与海带相互作用的认识,为海带生长过程中的科学管理提供了理论依据。

海洋型冰川表碛与退缩区土壤微生物群落特征——以阿扎冰川和米堆冰川为例

以藏东南阿扎冰川和米堆冰川为研究区,采用细菌16S rRNA基因扩增子测序和真菌ITS测序技术,研究了冰川表碛与退缩区不同植被演替阶段土壤中微生物群落特征及土壤化学性质影响.结果表明,两条冰川表碛与退缩区土壤中共发现细菌门38个,其中Proteobacteria(40%)、Actinobacteriota(23%)、Bacteroidota(14%)为优势群,共发现真菌门7个,Basidiomycota(47%)和Ascomycota(45%)为优势群.阿扎和米堆冰川表碛中Patescibacteria、RCP2-54、Bacteroidota、Gemmatimonadota和Acidobacteriota的菌群丰度存在显著差异,米堆冰川表碛和退缩区土壤中微生物群落结构和丰度存在显著差异(P<0.05),而退缩区三个演替阶段之间的群落结构差异不显著.适应极端环境的微生物群落在表碛中丰度最高,而随着演替进程参与植物定殖或与植物共生的微生物群落丰度与多样性显著增加,微生物群落的α多样性上升,NMDS模型也逐渐接近重叠,群落结构在植被演替后期逐渐趋于稳定,.除全钾外,养分含量在两条冰川表碛中均较低,随着植被演替土壤pH值逐渐降低而养分逐渐增加,演替后期显著高于前两阶段.表碛中的微生物群落与pH值和全钾显著正相关(P<0.05),而退缩区土壤中则与速效钾、硝酸盐氮、全磷、可溶性有机碳显著正相关(P<0.05),并以磷限制为主.

拮抗猕猴桃溃疡病致病菌的海洋细菌的筛选与鉴定

猕猴桃溃疡病是一种严重威胁猕猴桃生产的毁灭性细菌性病害,其致病菌为丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)。本实验旨在利用印度洋海泥中分离出来的115株海洋细菌,从中筛选出对丁香假单胞菌有拮抗作用的海洋细菌。运用滤纸片扩散法对海洋细菌进行初筛,得到33株具有拮抗丁香假单胞菌作用的海洋细菌,利用牛津杯法复筛,筛选出1株海洋细菌NO.357具有最优的抑制效果。对NO.357进行形态学鉴定和生理生化鉴定,通过16S r DNA序列测定和构建系统发育树,鉴定NO.357为低温甲基杆菌(Methylobacterium frigidaeris)。本实验为进一步研究海洋细菌对猕猴桃溃疡病致病菌的拮抗作用以及猕猴桃健康种植奠定基础。

9-羧基fascaplysin递送系统构建及抑制胞内细菌感染初步研究

针对病原体细菌引起的长期和难治愈的胞内感染难题,以ZIF-8为载体,9-羧基fascaplysin为抗菌活性试剂,构建了药物递送体系.用X射线光谱、扫描电镜、紫外-可见光谱、热重和傅里叶红外光谱对制备的材料进行了表征.该系统具有高热稳定性,并保持与ZIF-8一样的晶体微结构.该体系在感染的酸性微环境中表现出pH响应性,并可控地释放药物.初步研究结果表明,在胞内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染模型中,药物递送系统显示出以浓度依赖方式抑制胞内细菌感染的活性;而在相同条件下,游离9-羧基fascaplysin无法抑制胞内细菌感染.以ZIF-8为载体的pH响应性药物递送系统是具有潜力的治疗胞内细菌感染的材料.

蓝藻在微塑料上定植并对海洋生态系统产生的影响

近年来微塑料在海洋中的不断积累,引发了人们对海洋生态系统功能及生态多样性的关注,其中包括蓝藻在微塑料上定植所产生的影响。在微塑料上定植,会对蓝藻的生长和形态、光合作用和脂肪酸产生不同的影响。而蓝藻的定植则会改变微塑料的物化特性,同时还表现为降解微塑料或延缓光老化过程。通过定植作用,蓝藻与微塑料产生相互作用,影响海洋生态系统初级生产力的同时,通过食物链的逐级传递,对整个海洋生态系统产生影响。本研究对蓝藻定植于微塑料在海洋生态系统中的研究现状进行概述,强调未来需要进一步开展的研究工作,以更好地理解蓝藻的定植对彼此及整个生态系统的潜在影响,这将为制定有效的保护措施和管理策略提供重要的科学依据。

西印度洋产纤维素酶细菌的筛选及酶学特性初步研究

本研究从西印度洋表层沉积物中筛选获得1株高抗性、稳定性好的纤维素酶高产菌株XN149,通过形态学、革兰氏染色、生理生化鉴定以及16S rRNA基因序列分析对菌株进行分类鉴定,并研究了其酶学特性。结果表明,菌株XN149为漳州芽孢杆菌(Bacillus zhangzhouensis),具有较高的产纤维素酶能力。酶学特性研究表明,该菌株所产纤维素酶的最适反应温度为65℃,最佳pH为6.0,该条件下发酵48 h后粗酶液酶活力为(60.19±0.31) U/mL。在30~60℃及pH为5.0~8.0时酶活性稳定性较高,Fe3+、Mn2+对该酶活性有一定的促进作用,Ba2+对其酶活性具有抑制作用。综上,漳州芽孢杆菌XN149是一株高产纤维素酶菌株,所产纤维素酶具有良好的耐热性和一定的酸碱耐受性,具有潜在的产业应用开发价值。

东山湾海带养殖区沉积物中细菌群落结构变化

漳州市东山湾是福建省海带养殖的重要基地之一,对其中一处海带养殖区沉积物中的细菌群落进行了考察,了解在海带不同生长阶段该沉积物中细菌群落的结构组成。调查发现在海区未挂养海带前,该处沉积物中的优势细菌为芽孢杆菌属细菌。在海带生长的凹凸期、薄嫩期、厚成期、成熟期,沉积物中的优势细菌类群分别为类芽孢八叠球菌属、盐芽孢杆菌属、亚硫酸杆菌属、亚硫酸杆菌属细菌。

海水源反硝化细菌的筛选及其降氨氮效果的确定

从深圳红树湾海水中分离反硝化细菌,对平板菌落进行观察及镜检,排除杂菌影响,获得9株具有反硝化能力的菌株,经16S rDNA PCR鉴定后对9株菌进行氨氮去除量的测定,结果表明:9株菌均能去除一定量的氨氮,其中尤以PAEI01(Pseudomonas aestusnigri)、MFL01(黄色细杆菌)、AJO01(约氏不动杆菌)氨氮去除能力最强,其中PAEI01氨氮去除率可达78.24%。对PAEI01氨氮降解能力进行优化确认,在pH8.5、温度25℃、转速150r/min的培养条件下,该菌株氨氮降解效果最好,氨氮去除率为84.08%。

海洋细菌的分子鉴定分类

从南海海底沉积物中分离到一批细菌,克隆了其中产抗菌活性物且培养形态多变的细菌ZS110的16SrDNA,通过测定和比较16SrDNA的部分序列,对ZS110进行了分子鉴定,结果表明它是一株适应了海洋环境的芽孢杆菌属(Bacillus)的枯草芽孢杆菌种(Bacillussubtilis).

南海海洋细菌Pseudomonas sp.产生的一种抗肿瘤蓝色素

Pseudomonassp.是从大亚湾表面海水分离到的一株新的海洋细菌,在改变培养条件之后,能产生不同的次级代谢产物。从该菌培养液的脂溶性部分分离得到一种蓝色素Blue-1,它的结构通过NMR,2D-NMR,FABMS,元素分析得到确定,与从陆生菌Chromobacteriumviolacewn(Bacillusvidaceus)中分离得到紫色杆菌素(violacein)的结构一致。抗肿瘤活性试验结果表明,Blue-1对肿瘤细胞生长有很强的抑制作用,对MCG803的IG50为4.6μg/mL,对BEL-7402的IC50为6.8μg/mL。

海洋沉积物中特有细菌类群的初步探讨

通过构建 16SrRNA基因文库对中国南海南沙海区沉积物中细菌多样性进行分析 ,并将获得的16SrRNA基因序列与国际基因数据库GenBank进行相似性比较及聚类分析 ,结果发现来自海洋沉积物的未能培养的微生物往往组成一簇 ,并与现已获培养并鉴定的微生物自然分开 ,这一现象表明 。