消油剂对海湾扇贝(Argopecten irradians)的急性毒性效应

本研究以海湾扇贝(Argopecten irradians)为研究对象,通过96 h半静水毒性实验,探讨了消油剂、0号柴油分散液(WAF)与0号柴油乳化液(CEWAF)对海湾扇贝24 h、48 h、72 h、96 h急性毒性效应。结果显示,消油剂对海湾扇贝的24 h、48 h、72 h和96 h半致死浓度(95%可信限)分别为1905(1570-2451 mg/L)、1293(1070-1556 mg/L)、1015(721-1348 mg/L)、846 mg/L(660-1020 mg/L);WAF对海湾扇贝的24 h、48 h、72 h和96 h半致死浓度(95%可信限)分别为36.57(29.42-48.96 mg/L)、23.10(21.07-25.39 mg/L)、14.99(13.66-16.41 mg/L)、11.31 mg/L(8.37-14.47 mg/L);CEWAF对海湾扇贝的24 h、48 h、72 h和96 h半致死浓度(95%可信限)分别为12.71(10.78-15.55 mg/L)、8.51(7.99-9.07 mg/L)、6.56(4.46-7.74 mg/L)、5.42 mg/L(4.51-6.29 mg/L)。消油剂、0号柴油分散液、0号柴油乳化液对海湾扇贝96 h安全浓度分别为84.6、1.13、0.54 mg/L。随着实验时间的延长,消油剂、WAF和CEWAF对海湾扇贝的半致死浓度(LC_(50))均呈逐渐降低之势,半致死浓度与时间呈幂函数关系,其关系式分别为y=12242x^(–0.583)、y=564.37x^(–0.848)、y=89.987x^(–0.613)。在受试溶液中暴露相同时间,海湾扇贝的半致死浓度从高到低依次为消油剂、WAF和CEWAF,说明CEWAF对海湾扇贝的毒性大于消油剂和WAF,这对于在养殖海区使用消油剂处理溢油事故具有重要的指导意义。

不同贝壳颜色海湾扇贝(Argopecten irradians)家系的建立及生长发育研究

海湾扇贝是雌雄同体的贝类 ,其壳色有橙、棕、黄、紫、白等色彩。利用壳色可遗传的特性 ,采用自体受精的交配策略 ,于 2 0 0 2年成功地建立了 4个橙色、3个紫色、4个白色等 3类共 1 1个海湾扇贝自交系 ,并对不同家系的受精卵大小、胚胎孵化率及幼虫、稚贝和养成阶段的生长速率与存活率等生物学参数进行了比较。结果表明 ,在幼虫和稚贝等早期发育阶段 ,3类壳色的不同家系在生长速率和存活率等方面没有表现出差异 ,但是在养成阶段 ,在高温的7、8月 ,白壳色家系的生长速率和存活率均明显高于其它 2种壳色的家系。

海湾扇贝(Argopecten irradians)金属硫蛋白基因的克隆与分析

金属硫蛋白是一种普遍存在于生物体内的低分子量、半胱氨酸含量丰富、易于被外界刺激诱导的金属结合蛋白。采用表达序列标签法,结合cDNA末端快速扩增技术,首次获得了海湾扇贝金属硫蛋白(AiMT)的全长cDNA序列。该序列全长787bp,5′UTR(UntranslatedRegion)为79bp,3′UTR为270bp,开放阅读框(OpenReadingFrame,ORF)长度为438bp,可编码145个氨基酸。在其编码的氨基酸序列中半胱氨酸含量丰富,甘氨酸含量也较高,芳香族氨基酸含量低,不含组氨酸,存在有无脊椎动物和软体动物金属硫蛋白的特征序列CKCXXX-CXCX,C-末端的氨基酸序列也符合软体动物金属硫蛋白标签序列C-x-C-x(3)-C-T-G-x(3)-C-x-C-x(3)-C-x-C-K。序列特征分析表明,该序列具备金属硫蛋白的典型特征,是金属硫蛋白家族的成员。

有益细菌A18在海湾扇贝(Argopecten irradians)育苗中的应用

在海湾扇贝D形幼虫期施用 10 3 ,10 4 ,10 5CFU/ml三个浓度的有益细菌A18。经该菌处理后 ,扇贝幼苗的变态率与各个发育期的成活率均比加氯霉素组和未加任何处理的对照组高。其中以 10 4 CFU/ml处理的扇贝幼苗的变态率和成活率最高。对实验扇贝幼苗水体细菌总数和弧菌数分析发现 ,经 10 5,10 4 CFU/mlA18菌处理水体的细菌总数和弧菌数均比相应的对照组低。在扇贝育苗水体加入 10 6,10 7,10 8CFU/ml的有益细菌A18,检测高浓度A18对扇贝幼苗的毒害作用 ,当该菌浓度在 10 6CFU/ml时 ,经 4 8小时扇贝幼苗成活率 79% ,高于对照组的 6 8 5 % ;当浓度达 10 7,10 8CFU/ml时 ,处理 4 8小时后的扇贝幼苗死亡率分别为 95 6 %和 10 0 %。

海湾扇贝(Argopecten irradians)和太平洋牡蛎(Crasostreagigas)呼吸和排泄的研究

对海湾扇贝和太平洋牡蛎的呼吸和排泄进行了实验研究。结果表明，温度和贝的体重对两种贝类的耗氧率和氨排泄率都有明显的影响，且两因子间存在着交互作用。海湾扇贝的耗氧率（ＱＯ，ｍｇ／ｇ·ｈ）和氨排泄率（ＱＮ，μｇ／ｇ·ｈ）与温度（Ｔ，℃）和湿重（Ｗ，ｇ）存在下列关系：ＱＯ＝０．０４６Ｗ－０．２７２１．０８Ｔ，ＱＮ＝６．７９Ｗ－０．３２７１．０３Ｔ；太平洋牡蛎的耗氧和氨排泄率与温度、湿重存在下列关系：ＱＯ＝０．０８５Ｗ－０．１３０１．０６Ｔ，ＱＮ＝２．６６Ｗ－０．２３６１．０１Ｔ。

海湾扇贝抗氧化肽对酒精性肝损伤的保护作用

目的:探究海湾扇贝肽的抗氧化作用以及对乙醇诱导的酒精性肝损伤小鼠的保护作用及机制。方法:采用两步酶解和膜分离制备低分子质量海湾扇贝肽,通过体外抗氧化实验以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)激活率实验评价其体外抗氧化性以及促进乙醇代谢潜力;通过急性酒精中毒模型小鼠,测定其血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活力,肝脏中ADH、乙醛脱氢酶(acetaldehyde dehydrogenase,ALDH)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、SOD活力及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,评价其对小鼠酒精性肝损伤的保护作用及机制。采用液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)法分析多肽序列,通过PeptideRanker工具和AnOxPePred 1.0工具进行多肽的潜在生物活性预测,并将抗氧化活性最强的肽段与ALDH进行分子对接分析。结果:所制得海湾扇贝活性肽分子质量在200~1000 Da的肽段占比为70.38%,抗氧化氨基酸占总氨基酸含量的68.75%。体外实验显示,海湾扇贝肽1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和羟自由基清除率的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值分别为19.43 mg/mL和4.53 mg/mL,亚铁离子螯合能力的IC50值为2.19 mg/mL;在海湾扇贝酶解液质量浓度为5 mg/mL时,SOD和ADH激活率分别为19.83%和18.18%,显示出良好的抗氧化活性和解酒潜力。体内实验结果显示,海湾扇贝肽能显著降低小鼠血清中ALT、AST水平,显著提升ADH、ALDH、GSH-Px、SOD和CAT活力,并显著降低MDA含量。利用PeptideRanker工具和AnOxPePred 1.0工具对鉴定出的44条多肽进行筛选,有6条达到分子对接筛选的标准,分子对接发现其与ALDH均具有强烈的结合能力,其中DQPHFPF和YSTHPHF、ALDH之间分别形成了7、3个氢键,可以通过与ALDH发生分子相互作用激活其活性。结论:本研究为海湾扇贝肽在解酒护肝产品中的应用提供了理论参考。

海湾扇贝(Argopecten irradians)附着基异养细菌区系初探

从海湾扇贝附着基上分离出 61株异养细菌 ,对其进行 80项生理生化特征测定 ,以数值分类法进行分析。鉴定结果表明 ,海湾扇贝附着基上异养菌属于假单胞菌 ( Pseudomonas)、气单胞菌 ( Aeromonas)、弧菌 ( Vibrio)、芽孢杆菌 ( Bacillus)和产碱杆菌 ( Alcaligenes)。扇贝幼虫附着前附着的细菌主要为芽孢杆菌与假单胞菌 ,扇贝幼虫附着后气单胞菌成为优势 ,弧菌数量明显增加 。

海湾扇贝(Argopecten irradians)海上保苗技术的研究

用网袋、塑料筒、网箱等不同器具对海湾扇贝进行海上保苗试验,保苗率分别可达到23.8％、28.3％和32.9％。网袋中贝苗的生长快于塑料筒快于网箱,在10～13.5℃条件下,平均日增长为20μm;13.5～17.5℃,平均日增长为30μm;17.5～19℃,平均日增长为140μm;19～22℃,平均日增长为80μm。作者认为,贝苗生长不仅与水温有关,而且与贝苗的不同生长阶段有关,在贝苗壳高为1.5～4.5mm这个阶段生长迅速。

海湾扇贝南部亚种(Argopecten irradians concentricus)选育系F_5的生长及SSR分析

采用现场测量和11对微卫星标记引物对海湾扇贝南部亚种选育系F5与普通养殖群体的生产性能、遗传差异及遗传多样性现状进行分析。结果表明:在生产性能上,选育系的壳高、壳长、壳宽、体重、壳重、软体重、肉柱重、肉柱率、成活率和笼产量等性状较对照组分别提高了17.02%、16.67%、15.02%、43.71%、35.86%、58.74%、81.18%、29.46%、17.94%和69.47%。在遗传差异的SSR分析上,选育系和普通群体的平均等位基因数(Na)、平均有效等位基因数(Ne)、平均观测杂合度(Ho)、平均期望杂合度(He)、多态信息含量(PIC)分别为3.2727、3.3636;2.3366、2.3203;0.3152、0.3545;0.5326、0.5441;0.4622、0.4693;群体间遗传距离(Dxy)为0.1161,遗传分化指数(Fst)为0.0465。结果表明,选育系生产性能明显优于普通群体,遗传多样性指数较普通群体有所降低,两群体间出现了显著的遗传分化,选育系F5获得了显著的遗传进展。同时,选育系群体仍具有较高的遗传多样性,为进一步的选育利用提供了空间。

海湾扇贝(Argopecten irradians Lamarck)“性腺萎缩症”的组织病理学研究

利用组织学与组织化学染色方法 ,在光镜下研究了患“性腺萎缩症”海湾扇贝的组织病理学变化。结果表明 ,患病贝生殖细胞肿胀或萎缩 ,发育滞后 ;消化盲囊、鳃等器官组织也呈现明显的病理学变化特征 ,主要表现为结构紊乱 ,细胞变形、脱落甚至溃散 ,血细胞增生 ,出现强嗜碱性包涵体等异常结构。组织化学研究显示 :消化盲囊及消化道中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶含量下降 ;鳃。

海湾扇贝-刺参筏式综合养殖模式的探索

为探究海湾扇贝-刺参筏式综合养殖模式的可行性,2022年5月19日—11月19日,在河北省乐亭县浪窝口和昌黎县新开口进行海湾扇贝(Argopecten irradians)-刺参(Apostichopus japonicus)筏式笼养试验。试验分为两个阶段,第一阶段用扇贝养成笼(孔径2.5 cm)外套7目(孔径3 mm左右)网袋,单养海湾扇贝和刺参苗种。海湾扇贝壳高0.5 cm左右,大规格刺参(30 ind./kg)每层5头和3头,小规格刺参(100 ind./kg)每层15头、10头和5头。2022年8月19日第二阶段海湾扇贝和刺参单、混养试验,海湾扇贝壳高2 cm左右,每层40粒左右。单养时刺参密度同第一阶段;混养时大规格刺参(20 ind./kg)每层2头和1头,小规格刺参(60 ind./kg)每层2头和3头。结果显示,刺参末体质量和特定生长率均随养殖密度的增大而减小,混养模式下大规格刺参末体质量每层2头组显著低于每层1头组(P<0.05),小规格刺参特定生长率每层5头组显著低于每层3头组(P<0.05),两海域海湾扇贝混养模式下与对照组(单养模式)间生长无显著差异(P>0.05)。本研究表明,在海湾扇贝-刺参筏式综合养殖模式下,海湾扇贝的生长不受影响,但降低刺参密度可提高刺参的个体质量和特定生长率。综上所述,海湾扇贝-刺参筏式综合养殖模式可以作为海湾扇贝规模化养殖区的有益补充。

栉孔扇贝和海湾扇贝营养及重金属蓄积分析和质量评价

[目的]了解上市时段栉孔扇贝和海湾扇贝常食部位的营养成分及重金属含量情况。[方法]采用常规营养分析和重金属检测方法,对2种扇贝去壳软体部和闭壳肌的一般营养成分、部分矿物元素及重金属Pb、Cd、Hg、Cr的含量进行测定,并对扇贝软体部和闭壳肌营养成分和重金属蓄积程度进行比较分析。[结果]栉孔扇贝和海湾扇贝软体部中的粗蛋白含量分别为17.13%和12.57%,粗脂肪含量分别为2.48%和0.75%;闭壳肌中的粗蛋白含量分别为26.08%和21.49%,粗脂肪含量分别为0.57%和0.44%。栉孔扇贝软体部和闭壳肌的粗蛋白含量以及软体部的粗脂肪含量均显著高于海湾扇贝(P<0.05)。2种扇贝软体部和闭壳肌中的矿物元素含量均依次为P>Ca>Zn>Cu,且Ca、Cu和Zn含量均表现为海湾扇贝显著高于栉孔扇贝(P<0.05)。2种扇贝重金属含量均表现为Hg含量最低,其中海湾扇贝软体部和闭壳肌中的Cd和Cr含量均显著高于栉孔扇贝(P<0.05),Pb和Hg含量显著低于栉孔扇贝(P<0.05)。比较软体部和闭壳肌中重金属含量,2种扇贝均表现为软体部重金属含量高于闭壳肌,且差异显著(P<0.05)。不同扇贝或相同扇贝的不同组织对不同重金属蓄积程度(P_(i))有明显的差异性,其中采样海域海湾扇贝软体部中Cr的P_(i)值超过1.0,处于重度污染状态。[结论]栉孔扇贝粗蛋白含量高于海湾扇贝,多种矿物质含量低于海湾扇贝,不同重金属含量各有高低;2种扇贝闭壳肌更是具有高蛋白、低脂肪特点,且有害重金属蓄积少,食用价值相较软体部更高。

海湾扇贝、刺参、魁蚶间作立体混养模式试验

为充分利用水体空间,降低养殖成本,在海洋牧场海域进行了海湾扇贝(Argopecten irradians)、刺参(Stichopus japonicus)、魁蚶(Scapharca broughtonii)间作立体混养试验,形成由不同营养级生物组成的综合养殖系统。苗种增殖后对试验海域和非试验海域进行了水质监测,结果显示,苗种增殖对试验海域没有造成污染,而三个水产品种的滤食特性对水质有一定的改善。统计三个水产品种收获情况,海湾扇贝、刺参和魁蚶产量分别为11000 kg/hm^(2)、767.59 kg/hm^(2)和1302 kg/hm^(2)。试验证明,海湾扇贝、刺参、魁蚶间作立体混养模式不仅具有较好的生态效益,同时具有显著的经济效益。

外源添加物对海湾扇贝肉糜凝胶特性及营养品质的影响

为开发高品质扇贝肉糜制品,本文以冷冻海湾扇贝(Argopecten irradians)贝柱为原料,选取大豆分离蛋白、羟丙基木薯淀粉、卡拉胶、蛋清添加至扇贝肉糜,探讨外源添加物对扇贝肉糜凝胶特性及营养品质的影响。结果表明,5%大豆分离蛋白(B组)和羟丙基木薯淀粉(C组)能有效改善扇贝肉糜质构特性,且后者显著提高扇贝肉糜制品的持水性,但8%蛋清(D组)或0.6%卡拉胶(E组)会降低扇贝肉糜的硬度、内聚性、弹性和持水力;复配外源添加物[F组(7%羟丙基木薯淀粉+1.0%卡拉胶)和G组(8%羟丙基木薯淀粉+1.5%卡拉胶+5%蛋清+4%大豆分离蛋白)]对扇贝肉糜质构影响较小且能够提高持水性;F组感官评价较高;C、F、G组的扇贝肉糜制品均具有较优的氨基酸、脂肪酸配比,但氨基酸组成差异明显,不饱和脂肪酸含量显著高于饱和脂肪酸,EPA+DHA含量分别占总脂肪酸的45.04%、44.74%和30.87%。由此可知,外源添加物的种类和添加比例会显著影响海湾扇贝肉糜的凝胶特性和营养品质,为后续开发不同质构和成本等级的扇贝肉糜制品提供了理论数据。

北方地区海湾扇贝人工繁育技术要点

我国扇贝种类有30余种,其中经济种类主要有6种,分别是栉孔扇贝、虾夷扇贝、华贵栉孔扇贝、台湾日月贝、长肋日月贝、海湾扇贝,其中栉孔扇贝和虾夷扇贝分布于我国北方沿海地区;华贵栉孔扇贝、台湾日月贝、长肋日月贝分布于我国南方沿海等地区;海湾扇贝在南、北方沿海均有分布,以山东、河北、辽宁大连沿海为多。海湾扇贝营养价值高,富含蛋白质、维生素B12以及多种微量元素(镁、锌、硒),味道鲜美,深受消费者喜爱。现将北方地区海湾扇贝人工繁育技术要点总结如下。

“中科2号”海湾扇贝(Argopecten irradians)幼虫期壳长遗传力的估计

基于全同胞组内相关法估计"中科2号"海湾扇贝(Argopecten irradians)幼虫期壳长的遗传力。通过平衡巢式交配实验设计构建了7个半同胞和21个全同胞"中科2号"海湾扇贝家系。在家系幼虫期的第1天和第6天分别测定每个全同胞家系的30个幼虫个体的壳长。利用SAS 9.0软件的一般线性模型(GLM)计算表型变量的原因方差组分,估算壳长遗传力。分析结果显示,"中科2号"海湾扇贝幼虫1日龄和6日龄壳长的遗传力分别为0.51和0.58。t检验显示两个日龄壳长遗传力的估计值均不显著(P>0.05),且6日龄雌性遗传方差组分大于雄性遗传方差组分,说明雌性遗传方差组分随日龄增长可能存在较大母性效应。较大的加性遗传方差表明选择育种对于"中科2号"海湾扇贝的早期生长尚具有较大的改良潜力。

温度、盐度对海湾扇贝(Argopecten irradians)南北亚种回交幼虫生长和存活的影响

开展了海湾扇贝南北亚种杂交子代同海湾扇贝北方亚种间回交、杂交子二代及北方亚种对照组等群体的基因型和温度、盐度等环境因素之间的互作研究。研究结果表明,杂种F2和回交组别相对纯种组别存在生长优势。温度和盐度均对不同基因型群体的生产和存活产生显著的影响,其中在逆境温度下杂种F2和回交组能够更加适应并表现出更高的生长优势,而在盐度中结果却并非如此,这表明基因型和环境之间的互作机制比较复杂。研究结果为继续在不同海区环境下开展海湾扇贝回交育种提供了积极的理论依据和实践参考。

杂交与三倍体诱导对海湾扇贝(Argopecten irradians)幼虫的复合作用

基于2×2交叉实验设计,通过杂交和6-DMAP等诱导处理,构建了二倍体自交组、二倍体杂交组、三倍体诱导自交组和三倍体诱导杂交组等四个实验组家系,探讨了海湾扇贝(Argopecten irradians)幼虫期生长及存活的杂种优势和6-DMAP诱导处理效应的复合作用。分别计算各家系的孵化率,测定了各家系幼虫期第1、5、10天幼虫个体的壳长以及第5天和第10天各家系幼虫的存活率。利用一般线性模型(general linear model(GLM))计算表型变量的原因方差组分,评估了杂交和6-DMAP处理对扇贝幼虫生长和存活的影响。结果显示:6-DMAP处理组孵化率要显著低于非处理实验组(P<0.05)。三倍体诱导自交组第5天幼虫存活率显著低于其他组(P<0.05),到第10天三倍体自交组全部死亡。三倍体诱导杂交组第10天存活率低于二倍体组但不显著(P>0.05)。在第1天幼虫生长中,三倍体诱导杂交组幼虫壳长显著小于其他组(P<0.05),第5天幼虫生长中,三倍体诱导杂交组壳长则显著大于其他组,而三倍体诱导自交组则显著小于其他组(P<0.05)。在第10天幼虫生长中,二倍体自交组显著小于二倍体杂交组和三倍体诱导杂交组组(P<0.05)。上述结果显示扇贝幼虫生长期的杂种优势和三倍体诱导效应间存在一定相互作用。

海湾扇贝(Argopecten irradians)新品种“海益丰12”养殖效果评价

2017-2018年在秦皇岛市北戴河新区人造河海湾扇贝养殖区进行了海湾扇贝新品种“海益丰12”与主养品种的养殖效果对比试验,试验结果表明:“海益丰12”具有生长速度快、个体大、养殖效益高的特点。与主养品种相比,“海益丰12”平均体重和壳长分别比主养品种高21.1%~48.7%和5.4%~13.8%;贝柱重量高33.1%~52.3%;养殖效益提高45.5%~92.2%。“海益丰12”是优良的养殖品种,适合于河北省大面积推广养殖。

海湾扇贝热处理开壳装置设计与试验

随着我国水产养殖业发展,海湾扇贝养殖量逐年上升,因其营养价值、药用价值高,受到广大消费者青睐。开壳工作是海湾扇贝加工重点,其内部有使两壳拉紧闭合的闭壳肌,开壳难度大。通过对海湾扇贝开壳方案研究,结合海湾扇贝生理结构特点,总结扇贝热处理开壳方案,并对火烤开壳、水浴冲击开壳、蒸汽喷射开壳3种热处理方案进行试验,选出最佳热处理方案是蒸汽开壳法。设计海湾扇贝蒸汽喷射开壳装置,对关键部件中仿形孔和成形刀进行尺寸及安装位置设计分析。以蒸汽喷射时间、蒸汽喷射距离、蒸汽阀门开度为试验因素,开壳效果感官评分为指标进行单因素试验,并通过Box-Behnken design进行因素交互试验分析,最终确定当蒸汽喷射3 s、喷射距离30 mm、蒸汽阀门开度90°时,开壳效果最佳,感官评分值为93.67分。通过对开壳方案的研究,解决扇贝开壳困难问题,改善扇贝加工脏乱差现状,填补我国扇贝加工工艺方案空缺,为提高我国扇贝加工机械化程度奠定基础。