海绵细胞学检查用于食管癌筛查的探讨

近年来,食管癌的发病率持续上升,但其预后仍然较差。降低死亡率最有效的措施是对食管癌进行早期诊断和早期治疗。目前,食管癌的筛查仍以传统的内镜检查为主,而大多数有症状的患者被发现时已属于食管癌中晚期。除此之外内镜检查价格较为昂贵,且明显缺乏有效性——在内窥镜检查(和监测)中,部分人群没有检测到异常改变,而是通过机会性的首次内窥镜检查发现的。因此,迫切需要新的食管癌筛选方法用于早期发现前驱病变和早期食管癌。微创食道取样设备提供了一种可选择的、具有成本效益的策略,它可用于初级保健环境下的高危人群,以识别可能患有食管癌的患者,然后可以转介进行内镜确认。而目前在临床试验中进展最快的设备是海绵细胞学检查。

食管海绵细胞学在食管癌高发县食管癌筛查中的应用研究

目的探讨食管海绵细胞学应用于食管癌高发县食管癌筛查中的安全性、可行性和准确性。方法对2021年5月至2022年6月在涟水县人民医院就诊的有食管癌高危因素、年龄40~75岁的人群进行食管癌机会性筛查,使用国内自主研发的新型食管细胞收集器进行食管海绵细胞学采样并送细胞病理学分析(非典型鳞状细胞及更严重的病变被定义为食管海绵细胞学阳性),完成细胞学采样后紧接着行胃镜检查,对内镜下所有可疑区域取活检行组织病理学检查。胃镜检查、活检组织病理学、食管海绵细胞学两两互盲。观察指标包括:采样过程中的不良反应发生情况、受试者耐受性,采样质量,以及以胃镜检查结果+活检组织病理学结果作为金标准的食管海绵细胞学检查的诊断准确性。结果研究期间共有1590名受试者完成研究。在食管海绵细胞学检查采样过程中,未见严重不良反应,不良反应主要表现为采集期间呕吐[0.31%(5/1590)]和采集后喉咙不适[2.45%(39/1590)],均能自行缓解。对于采样过程,大部分受试者耐受性良好,表示可以接受[98.62%(1568/1590)]。取样后观察,1526名(95.97%)受试者的海绵材料完全膨胀,达到采样质量良好标准。数字病理系统扫描分析显示,1590名受试者的采样细胞数在(2.01~4.00)×10^(6)个,中位采样细胞数3.48×10^(6)个,能够满足细胞学结果的判读要求。以食管海绵细胞学阳性诊断食管癌(食管高级别上皮内瘤变、食管鳞癌、食管胃交界部腺癌)的敏感度为98.57%(69/70)、特异度为91.51%(1391/1520)、阳性预测值为34.85%(69/198)、阴性预测值为99.93%(1391/1392)、准确率为91.82%(1460/1590)。结论食管海绵细胞学可应用于食管癌高发县的食管癌筛查,是一种简单方便、安全有效且人群接受度较高的食管癌筛查方法。

GPR120激动剂通过β-Arrestin2途径改善高糖诱导的海绵体内皮细胞功能障碍

目的探讨激活G蛋白偶联受体(GPR)120对高糖诱导的人类阴茎海绵体内皮损伤修复的影响,以期为寻找糖尿病性勃起功能障碍(DMED)新的药物开发靶点提供理论依据。方法收集海绵体植入手术患者术中废弃海绵体组织提取海绵体内皮细胞进行原代培养,用高浓度葡萄糖诱导内皮细胞损伤,再以GPR120激动剂治疗,观察对比不同处理的细胞一氧化氮(NO)释放量、细胞迁移、血管生成等功能。结果成功提取人类海绵体内皮细胞进行原代培养并鉴定;发现GPR120在人类海绵体内皮细胞中稳定表达,且与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)存在共定位;与高糖损伤组相比,GPR120激动剂治疗组NO释放量、划痕愈合率和血管生成率均显著增加(P<0.05);沉默β-Arrestin2后GPR120激动剂失去原有的治疗效果。结论高糖培养可诱导海绵体内皮细胞功能障碍,GPR120激动剂能够治疗海绵体内皮功能障碍,沉默β-Arrestin2后GPR120激动剂无法改善内皮功能。

地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化及其勃起功能的影响

目的探讨地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化及其勃起功能的影响。方法将60只勃起功能正常的雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、西地拉非组(5 mg·kg^(-1))及地龙蛋白低、中、高剂量组(45、90、180 mg·kg^(-1)),每组10只。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50 mg·kg^(-1))结合高脂饲料喂养建立糖尿病大鼠模型;8周后,颈部注射阿朴吗啡(APO,100μg·kg^(-1)),制备DMED大鼠模型。造模成功后,按剂量灌胃给药,每日1次,连续4周。测定各组大鼠造模前、造模第3天、给药4周后的血糖水平及体质量。采用多导生理记录仪测定大鼠阴茎海绵体内压(ICP)、颈动脉内压(MAP),计算ICP/MAP比值;免疫组织化学法检测阴茎海绵体中收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)和合成型标志物Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、骨桥蛋白(OPN)表达情况;RT-PCR法检测阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC、CollagenⅠm RNA表达水平;Western Blot法检测阴茎海绵体中α-SMA、肌间线蛋白(Desmin)、CollagenⅠ、OPN蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠在造模第3天和给药4周后的血糖值均显著升高(P<0.01),给药4周后的体质量显著降低(P<0.01);ICP及ICP/MAP比值显著降低(P<0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC、Desmin蛋白表达水平显著降低(P<0.01),CollagenⅠ、OPN蛋白表达水平显著升高(P<0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC m RNA表达水平显著降低(P<0.01),CollagenⅠm RNA表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,给药组大鼠的血糖值及体质量均无明显变化(P>0.05);ICP及ICP/MAP比值均显著升高(P<0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC、Desmin蛋白表达水平显著升高(P<0.01),CollagenⅠ、OPN蛋白表达水平显著降低(P<0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC m RNA表达水平显著升高(P<0.01),CollagenⅠmRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论地龙蛋白能够改善DMED大鼠勃起功能,其机制可能与通过抑制CCSMC由“收缩型”向“合成型(增殖型)”转化有关。

缺氧诱导SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞内炎症反应及番茄红素的干预作用

目的:探索缺氧对SD大鼠海绵体平滑肌细胞(CCSMCs)内炎症反应的诱导作用及番茄红素调节效应。方法:分离SD大鼠原代CCSMCs并连续观察第4代海绵体平滑肌细胞内的形态稳定性;为了验证所培养的CCSMCs的纯度,进行了α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和结蛋白(Desmin)的免疫荧光染色;不同浓度的CoCl_(2)和番茄红素单独或联合干预海绵体平滑肌细胞24 h后,使用细胞计数试剂盒-8(CCK8)检测细胞活力;设立3个细胞处理组别:对照组、缺氧组(CoCl_(2)200μmol/L)和番茄红素治疗组(40μmol/L);培养24 h后,应用蛋白质印迹法(Western blotting)和反转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-18、IL-1β水平。结果:提取的SD大鼠海绵体平滑肌细胞在培养至第4代时依旧保持了形态上的均一性,经α-SMA和Desmin染色均显示出纯度较高的阳性反应。200μmol/LCoCl_(2)处理后CCSMCs的活力下降到50%,且Western blotting和RT-qPCR检测细胞内HIF-1α、TNF-α、IL-6、IL-18的水平均呈上升趋势(P<0.05),IL-1β的mRNA表达亦显著升高(P<0.05),但蛋白表达量仅有升高趋势(P>0.05);40μmol/L番茄红素能将CCSMCs的活力得以提升至正常状态的80%,同时显著降低HIF-1α、TNF-α、IL-18的蛋白表达量和TNF-α、IL-18、IL-1β的mRNA表达量(P<0.05),IL-6的蛋白、mRNA及IL-1β的蛋白表达量仅有下降趋势(P>0.05)。结论:缺氧条件下,CCSMCs中炎症因子表达上调,番茄红素能有效抑制炎症因子表达。

地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

目的探讨地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化的影响,以明确地龙蛋白改善DMED大鼠勃起功能的机制。方法于2021年7月选取60只SPF级雄性SD大鼠作为研究对象,随机选取50只腹腔注射链脲佐菌素(STZ),构建糖尿病(DM)大鼠模型,余下10只作为正常组。8周后大鼠颈部皮下注射阿朴吗啡(APO),并筛选出DMED大鼠。将DMED大鼠随机分为模型组、西地那非组及地龙蛋白低、中、高剂量组(45、90、180 mg/kg),各6只,并随机选取正常组6只作为空白组。给药4周后,检测大鼠血糖、体重、阴茎海绵体内压(ICP)和颈动脉内压(MAP)水平,计算ICP/MAP评估大鼠勃起功能。采用免疫组织化学法检测大鼠阴茎海绵体中收缩型标志物碱性调宁蛋白(Caiponin)、肌间线蛋白(Desmin)表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测阴茎海绵体中Desmin、骨桥蛋白(OPN)mRNA表达水平;采用Western blotting法检测阴茎海绵体中Caiponin、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠体重、ICP/MAP显著下降,血糖显著升高(P<0.01);各给药组大鼠阴茎海绵体中Caiponin、Desmin表达显著下降(P<0.01);Desmin mRNA表达下降,OPN mRNA表达显著上升(P<0.01);Caiponin、SMMHC蛋白表达显著下降(P<0.01)。与模型组比较,西地那非组及地龙蛋白低、中、高剂量组大鼠ICP/MAP水平显著升高(P<0.01),但西地那非组及地龙蛋白低、中、高剂量组大鼠的体重及血糖水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);各给药组大鼠阴茎海绵体中Caiponin、Desmin表达显著上升(P<0.01);Desmin mRNA表达显著上升,OPN mRNA表达显著下降(P<0.01);Caiponin、SMMHC蛋白表达显著上升(P<0.01)。结论地龙蛋白可通过上调阴茎海绵体组织中合成型(增殖型)标志蛋白或下调收缩型标志蛋白影响CCSMC转化,进而改善DMED大鼠的勃起功能。

聚氨酯海绵细胞毒性和溶血毒性研究

为评价聚氨酯海绵应用于人体的安全性，给临床安全使用提供可靠依据，本实验采用细胞毒性和溶血毒性试验方法，检测聚氨酯海绵是否存在细胞毒性和溶血反应。结果显示：聚氨酯海绵对Ｌ－９２９细胞株无毒性作用，对兔血无溶血反应。结果表明。

红景天苷对低氧诱导大鼠海绵体平滑肌细胞凋亡的抑制作用

目的:探讨红景天苷对低氧诱导的大鼠海绵体平滑肌细胞(CCSMCs)凋亡的影响。方法:采用酶消化法体外培养大鼠CCSMCs,抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和结蛋白(Desmin)免疫荧光鉴定CCSMCs纯度;通过MTT法筛选红景天苷无毒剂量;以低氧混合气体(1%O2,5%CO2,94%N2)通入缺氧小室建立细胞低氧模型;细胞分为3组:正常组,低氧组,红景天苷(32μg/ml)干预组,采用流式细胞术观察各组CCSMCs凋亡的情况,Western印迹检测caspase-3蛋白表达水平。结果:成功培养大鼠CCSMCs,免疫荧光显示绝大部分细胞α-SMA、Desmin阳性;≤32μg/ml的红景天苷对细胞无明显的毒性;低氧组CCSMCs早期凋亡[(18.69±1.29)%]较正常组[(12.77±1.41)%]明显增多(P<0.01),低氧组晚期凋亡[(21.03±1.53)%]较正常组[(14.63±2.00)%]亦增加(P<0.05),同时,活化型caspase-3蛋白表达上升(P<0.01);32μg/ml红景天苷剂量下可有效降低低氧诱导的CCSMCs早期凋亡率[(13.46 1.87)%](P<0.01),活化型caspase-3蛋白表达下降(P<0.01)。结论:红景天苷能够降低低氧诱导的CCSMCs活化型caspase-3蛋白的表达,抑制了低氧诱导的CCSMCs凋亡。

低氧对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨低氧和SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)凋亡的关系。方法:体外培养CCSMC,免疫组化鉴定细胞;低氧(1%O2浓度)干预12、24、48、72 h,常规氧浓度作为对照,流式细胞术测定细胞周期变化和凋亡情况。结果:体外培养的CCSMC生长良好,抗平滑肌α-肌动蛋白单克隆抗体免疫组化DAB法染色阳性。流式细胞术检测CCSMC G0/G1期在48 h内细胞比例逐渐增加,后下降;S期细胞比例与G0/G1期呈相反趋势;G2/M期细胞比例无明显规律。结论:CCSMC在低氧环境下,随时间的延长凋亡程度加重,48 h达到最大值,进一步延长时间细胞裂解,不能加重凋亡。

兔阴茎海绵体内皮细胞的培养和鉴定

本研究旨在探讨兔阴茎海绵体内皮细胞体外培养技术,为构建组织工程化阴茎海绵体提供种子细胞。无菌获取兔阴茎海绵体组织后,分别采用IV型胶原酶消化法和弹性蛋白酶消化结合机械挤压法分离内皮细胞,比较两种分离方法所获内皮细胞的纯度;进一步在添加生长因子的内皮细胞生长液中培养扩增,观察细胞形态及增殖情况,并对传代细胞进行免疫组化染色鉴定。结果显示采用弹性蛋白酶消化结合机械挤压组织法能有效分离内皮细胞且保留基质的完整性,避免基质细胞混杂,明显优于IV型胶原酶消化法;培养的内皮细胞呈典型的鹅卵石形态,内皮细胞特异性标志CD31、第Ⅷ因子相关抗原(von Willebrand factor,vWF)表达阳性。结果提示采用弹性蛋白酶消化结合机械挤压组织法能快速有效地分离纯度较高的内皮细胞,进一步在内皮细胞生长液中培养能稳定传代扩增,可为阴茎海绵体组织工程提供种子细胞。

PDE5基因反义寡脱氧核苷酸对人阴茎海绵体平滑肌细胞cNMP的影响

目的 :观察PDE5基因反义寡脱氧核苷酸对人阴茎海绵体平滑肌细胞内cAMP和cGMP的影响 ,为阴茎勃起功能障碍的基因治疗提供理论和实验依据。 方法 :将PDE5基因反义寡脱氧核苷酸 (含第 1外显子部分序列 )与脂质转染试剂DOTAP共同转染人阴茎海绵体平滑肌原代细胞 ,以酶联免疫法分别检测转染后不同时间 (1～ 4 8h)海绵体平滑肌细胞内cAMP和cGMP的浓度变化 ,观察反义寡脱氧核苷酸对平滑肌细胞内cNMP的影响。 结果 :转染后 ,反义实验组平滑肌原代细胞内cGMP水平 (1～ 6h)显著高于对照组 (P <0 .0 1)。 结论 :PDE5基因反义寡脱氧核苷酸可以增加人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP水平 ,本研究有助于了解PDE5基因与cNMP在阴茎勃起中的作用 ,并为阴茎勃起功能障碍的基因治疗提供理论和实验基础。

高血压大鼠海绵体平滑肌细胞间连接的变化

目的:比较自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞间连接改变及与阴茎勃起功能的关系。方法:注射阿朴吗啡(APO)观察14周龄SHR(SHR组,n=5)、W istar-Kyoto大鼠(WKY组,n=5)阴茎勃起情况,用透射电镜观察其阴茎海绵体平滑肌细胞间连接超微结构,RT-PCR测定海绵体平滑肌细胞Connexin 43的mRNA表达,免疫组化观察Connexin 43蛋白表达。结果:SHR组大鼠阴茎勃起次数明显低于WKY组(P<0.05),电镜发现SHR组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞间大量胶原纤维增生,Connexin 43蛋白及其mRNA表达较WKY组显著降低(P<0.05)。结论:高血压影响阴茎勃起功能,阴茎海绵体平滑肌细胞间连接的病理改变可能是高血压性勃起功能障碍的发病机制之一。

缺氧对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

[目的]研究缺氧对阴茎海绵体平滑肌细胞(cavernosum smooth muscle cells,CCSM)表型转化的影响。[方法]用酶消化法获取SD大鼠的原代CCSM,并用细胞免疫荧光法进行鉴定。将原代CCSM置于缺氧小室中(37℃,5%CO2,1%O2,94%N2)培养,按缺氧时间分为0h组、24h组、48h组、72h组,用western-blot法检测四组的α-SMA、OPN蛋白表达量。[结果]低氧可以诱导CCSMα-SMA蛋白表达下降,且在72h内随着缺氧时间延长差异显著性增加。低氧24h组细胞OPN蛋白表达增加(P<0.05);低氧48h组细胞OPN蛋白表达显著增加(P<0.01);48h后随着时间延长差异可能会减小(P>0.05)。[结论]缺氧可以诱导CCSM由收缩型向合成型转化。

牛蒡根化学成分对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察牛蒡根化学成分牛蒡低聚果糖和山奈素对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖的影响,探讨牛蒡根对勃起功能障碍治疗作用的可能机制。方法:利用MTT体外药物筛选法测试受试样品对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞体外增殖活性的影响。结果:牛蒡低聚果糖100、50μg/ml能够明显促进细胞的增殖,且有时间依赖性;山奈素100、50μg/ml对细胞的增殖有抑制作用;25、12.5μg/ml能够明显促进细胞的增殖,且有时间依赖性。结论:牛蒡根化学成分对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞有增殖作用。

红景天苷对低氧环境下大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞α-肌动蛋白和骨桥蛋白表达的影响

目的:探讨红景天苷对低氧SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)α-肌动蛋白、骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法:体外培养SD大鼠CCSMC,免疫组化法鉴定细胞;设正常对照组(21%O2浓度)、低氧组(1%O2浓度)、低氧+红景天苷1 mg/L组、低氧+红景天苷3 mg/L组、低氧+红景天苷5 mg/L组、低氧+前列腺素E1(PGE1)0.4μg/L组,分别培养48 h;RT-PCR法分别测定各组α-肌动蛋白、OPN的相对表达量。结果:体外培养的CCSMC生长良好,抗平滑肌α-肌动蛋白单克隆抗体免疫组化染色阳性;与正常对照组比较,低氧组细胞的α-肌动蛋白表达量下降、OPN表达量升高(P<0.01);与低氧组比较,红景天苷5 mg/L组α-肌动蛋白表达量升高、OPN表达量降低(P<0.01),与PGE1作用相当(P﹥0.05)。结论:低氧可引起SD大鼠CCSMC收缩型标志物α-肌动蛋白表达降低,合成型标志物OPN表达升高,推测低氧可能引起CCSMC由收缩型向合成型转化。红景天苷能抑制低氧引起的CCSMCα-肌动蛋白表达降低、OPN表达升高,浓度为5 mg/L时与PGE1作用几乎相当。

血小板源性生长因子-BB对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化影响的初步研究

目的:研究血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化的影响。方法:改良组织块法原代培养大鼠CCSMC,并进行细胞免疫荧光鉴定。实验分为空白对照组和不同浓度(5、10、20、40 ng/ml)PDGF-BB组,处理24 h;以及空白对照组和20 ng/ml PDGF-BB作用细胞不同时间(24、48、72 h)组,利用qRT-PCR检测各组细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)、碱性调宁蛋白和骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达。结果:原代培养CCSMCα-SMA阳性细胞率达95%以上。与空白对照组比较,不同浓度PDGF-BB作用大鼠CCSMC后α-SMA、SMMHC、碱性调宁蛋白的mRNA表达显著减少(P均<0.05);OPN mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。与空白对照组比较,随20 ng/ml PDGF-BB作用细胞时间的延长,α-SMA、SMMHC、碱性调宁蛋白的mRNA表达显著减少,OPN mRNA表达水平上调,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:PDGF-BB可促使SD大鼠CCSMC表型从收缩型向合成型转化。

红景天苷对低氧环境下大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞缝隙连接蛋白43表达的影响

目的:探讨红景天苷对低氧环境下SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:体外培养SD大鼠CCSMC,免疫组化法鉴定细胞;设常氧对照组(21%O_2)、低氧组(1%O_2)、低氧+红景天苷8μg/ml组、低氧+红景天苷16μg/ml组、低氧+红景天苷32μg/ml组和低氧+红景天苷64μg/ml组,分别培养48 h;Western印迹测定Cx43相对表达量。结果:体外培养CCSMC生长良好,抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和抗desmin抗体免疫组化染色阳性,CCSMC占比90%以上。MTT法结果显示,红景天苷浓度≤64μg/ml时,对CCSMC无明显毒性;而128μg/ml和256μg/ml红景天苷对CCSMC有一定的抑制作用。未加红景天苷干预时,与常氧对照组相比,低氧组Cx43总蛋白和磷酸化蛋白表达均显著升高(P<0.01和P<0.05),磷酸化比例未见明显变化(P>0.05);与低氧不加药组相比,不同浓度红景天苷干预后Cx43表达量仍显著升高,但Cx43蛋白磷酸化比例显著降低,差异均有显著性(P均<0.05)。结论:低氧促进大鼠CCSMC Cx43表达升高,红景天苷浓度≤64μg/ml无法逆转上述缺氧改变,但降低了Cx43磷酸化比例。推测红景天苷能通过降低Cx43磷酸化比例抑制缺氧引起的缝隙连接通道形成,保护平滑肌细胞功能。

降钙素基因相关肽对高血压性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖及表型转化的影响

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高血压性勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)增殖及表型转化的影响。方法选取20只自发性高血压Wistar大鼠(SHR)及10只同系正常血压健康大鼠(WKY),测量大鼠尾部动脉收缩压,通过颈部皮下注射阿朴吗啡后观察大鼠阴茎勃起情况,SHR大鼠中无阴茎勃起的归为高血压勃起功能障碍(HBP-ED)组,出现阴茎勃起的归为高血压(HBP)组,WKY大鼠归为对照组。取各组大鼠阴茎海绵体平滑肌组织行细胞原代培养。不同浓度(1、10和100nmol/L)CGRP作用于培养的细胞后,采用MTT法检测细胞增殖情况,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞碱性调宁蛋白(Cnn1)和骨桥蛋白(OPN)mRNA表达水平。结果不同浓度CGRP均可抑制高血压性ED大鼠CCSM的增殖,且抑制程度随CGRP浓度增加而加剧。当CGRP作用的终浓度为100nmol/L时,HBP组和HBP-ED组Cnnl m RNA表达水平较组内0nmol/L浓度均上调(均P<0.05),OPN mRNA表达水平较组内0nmol/L浓度均下调(均P<0.05)。结论 CGRP可抑制高血压性ED大鼠CCSM的增殖,可使高血压性ED大鼠CCSM表型发生逆转化,即由合成型向收缩型转化。

一种新的脱细胞阴茎海绵体基质的制备方法

目的探索一种新的脱细胞阴茎海绵体基质的制备方法。方法取健康壮年兔完整阴茎海绵体组织,以Triton-X100与NH3.H2O(氨水)联合提取法进行脱细胞处理。标本作HE染色,组织学观察分析脱细胞效果。结果脱细胞处理25天后,成功获得脱细胞海绵体基质。所得基质外观良好。HE染色观察无细胞存在,弹力纤维排列规整,间隙较大,结构无破坏。结论利用Triton-X100与NH3.H2O联合提取法可成功制备完整无细胞阴茎海绵体基质。