绿绒海芋Alocasia micholitziana的组织培养及其植株再生的研究

以绿绒海芋Alocasia micholitziana的叶片、叶柄为外殖体,研究不同灭菌剂对外殖体消毒效果的影响、不同激素及浓度配比的培养基对愈伤组织诱导、不定芽分化及增殖的影响。结果表明:(1)消毒处理时叶柄适于用0.1%Hg Cl2浸泡处理8 min,叶片则为7 min;(2)叶柄、叶片在所试培养基中均能诱导出愈伤组织,最佳诱导培养基为MS+2 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA,叶柄愈伤组织诱导率可达100%;(3)从愈伤组织诱导不定芽的最佳培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA,诱导率可达100%;(4)在培养基MS+2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA上,芽增殖效果最佳,苗生长健壮;(5)最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA,移栽后苗容易成活;(6)苗移栽时以泥炭土∶珍珠岩∶蛭石(3∶1∶1)成活率较高,可达98%以上,而且小苗生长健壮。

基于化学成分药理作用及网络药理学的海芋质量标志物预测分析

天南星科海芋属植物海芋Alocasia macrorrhiza(L.)Schott具有清热解毒、消肿散结的功效。近年来发现海芋具有良好的药理活性,但关于海芋的药效物质基础及质量控制研究较少。该文通过查阅文献及多个数据库,总结海芋化学成分及药理作用并利用网络药理学确立海芋的成分-靶点-通路网络,从海芋传统药性、药效、化学成分有效性等方面对海芋质量标志物(Q-marker)进行初步预测,总结出海芋素B(alocasin B)、海芋素D(alocasin D)、海芋素E(alocasin E)、海芋素A(alocasin A)、hyrtiosulawesine等11个活性成分作为海芋潜在的质量标志物,可为海芋的深入研究与开发利用提供理论依据。

海芋〔Alocasia macrorrhiza(Linn.)Schott〕无土栽培技术探讨

本文以河沙、珍珠岩、椰糠+河沙(1:1)为基质,栽培海芋〔Alocasia macrorrhiza(Linn.)Schott〕。试验表明:采用改良霍格兰(Hogagland & Arnon,1938)营养液配方,插穗基部用250mg/L萘乙酸(NAA)液浸泡,以椰糠与河沙混合的基质作为栽培基质,生根快而好,结合喷施2%的多效唑(PP333)溶液,可有效控制植株的生长,且有利其叶绿素的合成,叶色鲜绿,叶片肥厚,极具观赏性。

海芋凝集素的理化性质鉴定

采用葡聚糖凝胶１００（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００）从天南星科植物海芋（Ａｌｏｃａｓｉａｏｄｏｒａ（Ｒｏｘｂ）Ｃ．Ｋｏｃｈ）中分离出了一种凝集素（简称ＡＯＬ）．ＡＯＬ对兔血有较强的凝集效果，而对各类型人血的凝集活力较弱，在３种糖蛋白中，猪甲状腺球蛋白对ＡＯＬ的凝血活力抑制最强；ＡＯＬ对培养人外周血白细胞的转化率高达７９％，超过对照ＰＨＡ的转化率；用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱测得ＡＯＬ的相对分子质量为３１５００；用癌细胞体外培养的方法证明了ＡＯＬ对肺腺癌细胞株Ｐ１８具有较强的直接杀伤能力．此外还发现ＡＯＬ对温度（８０℃以下）、变性剂（盐酸胍和脲）有较高的稳定性，在ｐＨ６～１０的范围内相当稳定．

海芋凝集素对豆蚜的抗生作用研究

从海芋Alocasia odora (Roxb)C.Koch不同部位提取出海芋凝集素粗品,并将其分离纯化得到层析纯样品.研究表明,海芋凝集素对豆蚜有较强的抗生作用,其中以胃毒作用为主,有一定的生殖抑制作用,对豆蚜的蜜露分泌有一定影响.

海芋叶粉饲用价值的探讨

海芋鲜叶具辛辣味，经６０～７０℃烘干制成叶粉仍未能将其脱除。海芋叶粉干物质含代谢能４．９２ＭＪ／ｋｇ，粗蛋白质２４４．１ｇ／ｋｇ，粗纤维１４０．４ｇ／ｋｇ，赖氨酸１１．９ｇ／ｋｇ，蛋氨酸４．４ｇ／ｋｇ。丙酮等有机溶剂能有效脱除海芋叶粉的辛辣味物质。丙酮处理的海芋叶粉的概略营养成分、代谢能和氨基酸组成与原海芋叶粉无明显差异。饲养肉用仔鸡的试验结果表明，以具辛辣味的海芋叶粉于４０和６０ｇ／ｋｇ的水平添加于饲粮中，均降低鸡对饲料的采食量，极显著地降低鸡的增重（Ｐ＜０．０１），但各组鸡的耗料增重比无明显差异；添加经丙酮处理而无辛辣味的海芋叶粉于４０ｇ／ｋｇ水平，肉鸡的采食量、增重和耗料增重比与对照组的差异均不显著（Ｐ＞０．０５）。这些试验结果表明，海芋叶粉的辛辣味影响了肉鸡对它的直接利用，但经适当方法处理脱除了辛辣味物质的海芋叶粉可作为畜禽饲料。

海芋多糖的研究

海芋用去离子水煮提,乙醇沉淀,Sevage法去蛋白,并经凝胶柱层析精制,获得均一的海芋多糖;用紫外可见光谱仪测定海芋中多糖的含量;凝胶层析法测定海芋多糖的平均相对分子质量;酸水解、高效液相色谱分析海芋多糖的单糖组成;红外光谱测定糖残基的连接方式.结果表明海芋中多糖质量分数为0.74%,海芋多糖的平均相对分子质量为26 400,主要由葡萄糖(97.3%)通过β-糖苷键连接而成.

海芋抗肿瘤作用研究

用小鼠移植瘤和棵小鼠异体移植入肿瘤模型研究海芋抗肿瘤作用,结果表明:对小鼠S_(180)的抑制率为29.38％,对裸小鼠人胃腺癌移植瘤的抑制率为46.30％～51.72％,与生理盐水组比较呈显著性差异;但对腹水瘤小鼠生存期无明显延长作用。

海芋化学成分研究

目的 研究天南星科植物海芋的化学成分.方法 利用90％乙醇提取,聚酰胺柱层析、硅胶柱层析等方法分离纯化化合物,并通过理化性质和波谱数据鉴定其结构.结果 从海芋中分离并鉴定了6个化合物,分别是1,2-dihydro-6,8-dimethoxy-7-hydroxy-1-（3,5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl）-N1,N2-bis-[2-（4-hydroxyphenyl）ethyl]-2,3-naphthalene dicarboxamide（1）、cannabisin F（2）、棕榈酸（3）、棕榈酸甘油酯、（4）β-谷甾醇-3-O-6-棕榈酰葡萄糖苷、（5）和尿嘧啶（6）.结论 化合物l ～6均为首次从该植物中分离得到.

海芋根状茎的离体培养与植株再生

以海芋的根状茎为外植体,探索了不同的生长调节剂配比对愈伤组织诱导、增殖与分化的影响。结果表明:含TDZ0.5mg/L的MS培养基上愈伤诱导率最高,达到53.3%;4mg/LBA+0.1mg/LNAA生长调节剂浓度有利于愈伤组织的增殖;附加1mg/LBA+0.05mg/LNAA的培养基上芽分化率最高;下表面切除0.1～0.2cm有利于愈伤组织增殖与分化。不定芽在无生长调节剂的1/2MS培养基中都能生根。

海芋凝集素cDNA的分子克隆及其性质预测(英文)

用cDNA末端快速扩增-聚合酶链式反应(RACE-PCR)方法克隆了海芋(Alocasiamacrorrhiza)凝集素的全长cDNA(GenBank检索号DQ340864),并用多种生物信息学工具对其性质进行了预测。根据来源于天南星科其他植物的凝集素和类似蛋白的保守区的DNA序列,设计了几个海芋凝集素基因aml特异引物(GSP)。用RNeasy试剂盒从海芋块茎中提取出总RNA,并以此为模板,用SMARTTMRACEcDNA扩增试剂盒提供的经特殊设计的通用引物以及不同的基因特异引物,分别获得海芋凝集素5'-和3'-RACE-PCR扩增片段。这些PCR产物经0.8%琼脂糖凝胶纯化后,分别与T克隆载体pMD18-T相连,筛选获得阳性克隆并提取质粒,经双酶切和特异引物的PCR验证无误后,进行序列分析。从5'-和3'-RACE-PCR测序结果拼接出全长海芋凝集素cDNA序列,并用新设计自5'-RACE-PCR5'末端的引物GSP7进行全长3'-RACE-PCR反应,获得全长海芋凝集素cDNA克隆并再次测序验证。这一新克隆的海芋凝集素cDNA的长度为1124核苷酸,分析表明它是一个编码270个氨基酸残基的蛋白质,其等电点为pH5.7,相对分子量为29.7kD。同源性分析结果表明,海芋凝集素与其他来源于天南星科的甘露糖凝集素以及相似蛋白具有高度同源性。在海芋凝集素序列中发现了2个B型凝集素功能区域和3个甘露糖的结合位点。综合上述信息,认为这一新克隆的海芋凝集素cDNA是一个编码甘露糖识别凝集素的基因序列。

海芋凝集素的纯化及其对4种昆虫细胞的毒杀作用

通过离体昆虫细胞培养研究海芋凝集素（Alocasia macrorrhiza lectin,AML）的毒杀作用。采用MTT法研究了提取自海芋叶0-30%、叶30%-80%、块茎0-30%、块茎30%-80%盐析段海芋凝集素粗品对4种昆虫细胞[草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda Smith细胞（简称Sf-9细胞）、甜菜夜蛾Spodoptera exigua Hübner细胞（简称Se 301细胞）、粉纹夜蛾Trichoplusia ni Hübner细胞（简称Hi5细胞）和美洲棉铃虫Heliothis zea Boddie细胞（简称Hz细胞）]的毒杀作用,结果表明,海芋叶、块茎上述盐析段的粗提物均对4种昆虫细胞有明显的毒杀作用,其中以块茎30%-80%的样品毒杀活力最高：在2%浓度处理24 h条件下,上述4种细胞的相对死亡率分别为91.40%、91.62%、97.13%和82.30%。用Q Sepharose Fast Flow柱（2.6 cm×30 cm）对海芋块茎30%-80%的盐析物进行分离纯化,用最大活性峰样品对Sf-9细胞的毒杀作用进行研究,得到处理24 h的毒力回归方程,LC50为0.79%。

紫色茎秆海芋组织培养不同培养基的诱导增殖生根效果研究

以紫色茎秆海芋的顶芽和侧芽作外植体开展了相关的组织培养试验,探索了不同培养基组合对紫色茎秆海芋的诱导培养、丛芽增殖、幼苗生根的影响。试验结果表明:MS+BA6.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基对紫色茎秆海芋顶芽、侧芽组培的诱导效果较好;MS+BA5.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基对其丛芽增殖效果最佳,增殖系数达4倍多;而1/2MS+NAA0.5 mg/L培养基有利于其壮苗、生根,且植株长势健壮。

海芋多糖提取工艺优化及其单糖组成分析

[目的]优选海芋Alocasia macrorrhiza(Lour.)Schott多糖的最佳提取工艺,并分析其单糖组成。[方法]通过L9(34)正交试验设计,以多糖提取率为评价指标,优选海芋多糖的最佳提取工艺;多糖经酸水解、PMP衍生化,高效液相色谱分析其单糖组成。[结果]海芋多糖的最佳提取工艺:95℃,料液比1:20,回流提取3次,每次2h;在此条件下,多糖提取率为11.20%;PMP衍生化高效液相色谱法分析得海芋多糖主要由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等单糖组成。[结论]本实验成功建立简便、稳定可行的海芋多糖提取工艺,并对其单糖组成进行了研究,为合理地开发海芋资源提供了一定理论依据。

海芋凝集素对豆蚜淀粉酶、蛋白酶活性的影响

为了研究海芋凝集素AML对豆蚜(Aphis craccivora Koch)的作用机理,分别用AML处理豆蚜离体蛋白酶、淀粉酶,以及将AML添加到人工营养液饲喂豆蚜的方法来研究AML对蚜虫体内蛋白酶活性、淀粉酶活性、蛋白含量的影响。结果表明,无论在离体和在体的条件下,AML均能明显抑制豆蚜蛋白酶、淀粉酶活性,并且经AML处理后豆蚜体内蛋白含量也明显降低。这些结果说明AML可能通过与昆虫消化道内的各种消化酶结合并抑制其活性,进而导致试虫营养不良成为弱质昆虫,容易继发各种病症而死亡,这或许是AML对豆蚜致毒的机理之一。

彩色海芋组织培养过程中内生菌的抑制

以 4个进口彩色海芋为材料 ,比较了不同种类抗生素、适宜抗生素的浓度对组织培养过程中内生菌抑制的影响。结果表明 ,2 0 0mg/L的青霉素GK对内生菌抑制的效果最为明显 ,且不影响组培苗的正常生长。

不同光照度生境对海芋块茎形态、淀粉含量及叶绿素含量的影响

【目的】了解海芋Alocasia macrorrhiza对不同光照度生境的响应,明确在海芋试验中叶绿素仪测定叶绿素的精确度,以期为大面积的成龄胶园林荫下土地资源利用及叶绿素仪在海芋生理试验中正确应用提供理论依据和技术支持。【方法】采用SPAD-502叶绿素仪和乙醇-丙酮浸提法对不同光照度下海芋不同叶片的SPAD值、叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量进行测定。【结果】与自然光照下的海芋相比,林荫下海芋的块茎长度增加了12.11%,茎围和淀粉含量则分别降低了15.08%和12.96%。自然光照下海芋的SPAD值、叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量均比在林荫下生长的海芋低,但叶绿素a与叶绿素b含量的比值要高。自然光照下海芋叶片SPAD值呈现从倒1叶至倒5叶逐渐增加的趋势(倒3叶除外)。林荫下生长的海芋叶片SPAD值从倒1叶至倒2叶是增加的,从倒3叶至倒5叶逐渐降低,最大值在倒2叶。光照强度对不同叶片的叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量的影响趋势与SPAD值的影响趋势一致,只是影响幅度不同。【结论】光照有利于海芋淀粉的合成。光照不足的情况下,海芋会通过增加叶片(特别是上层叶片)的SPAD值、叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量来捕获光能。在自然光照下,利用海芋倒4叶的SPAD值更能准确地预测其叶绿素的绝对含量,而在林荫下生长的海芋倒5叶的SPAD值更能准确地预测其叶绿素的绝对含量。

海芋抗炎镇痛的药效学研究

目的:研究海芋的镇痛、抗炎作用。方法:①镇痛作用采用热板刺激致痛法和化学刺激致痛法。②抗炎作用采用对二甲苯所致小鼠耳廓炎症的抑制作用和小鼠棉球肉芽肿形成的抑制作用。结果:海芋镇痛、抗炎作用均较显著。结论:海芋具有镇痛抗炎的作用。

海芋凝集素对几种鳞翅目昆虫的毒杀活性

采用饲喂、口腔灌注、腹足注射和喷雾等方法,比较了海芋凝集素粗品对3种鳞翅目昆虫菜粉蝶、亚洲玉米螟和斜纹夜蛾幼虫的毒杀活性。结果表明:海芋凝集素粗品对受试昆虫有一定的胃毒和触杀活性,其中海芋块茎凝集素粗品口腔灌注菜粉蝶幼虫的胃毒活性最高,5%海芋块茎凝集素粗品处理后5、6 d,菜粉蝶幼虫的死亡率分别为62.5%和75.0%,表明海芋凝集素对昆虫的胃毒是其主要作用方式。