壳聚糖-海藻酸钙微球荧光标记反应对微球膜强度影响的研究

以壳聚糖-海藻酸钙载药微球给药后的体内检测为研究背景,探讨不同反应条件下壳聚糖-海藻酸钙微球荧光标记反应对微球膜在模拟体液中的强度影响.以壳聚糖、海藻酸钠为微球制备载体材料,以异硫氰酸酯(FITC)为荧光标记物对微球进行荧光标记.采用标记了FITC的微球在模拟体液中的膨胀率来表征微球膜的相对强度.采用相对分子质量为50 000、脱乙酰度85%、荧光标记浓度0.01 g/mL的壳聚糖,成膜液浓度0.015 g/mL,成膜时间30 min制备出的荧光微球在模拟胃、肠液中表现出良好的膜强度及稳定性.为研究壳聚糖-海藻酸钙载药微球在体内的分布、吸收、降解特性提供了适宜的入体实验条件.

载环孢素A海藻酸钙-壳聚糖微球的制备及体外释放特性

目的:针对角膜移植术后免疫抑制治疗需求,制备眼部局部给药的小粒径载环孢素A缓释微球,并进行体外释放考察。方法:以海藻酸钠、壳聚糖为载体材料,采用静电液滴工艺,通过向制备体系添加表面活性剂,制备小粒径载环孢素A微球,设计正交试验优化处方工艺,扫描电镜观察微球表面形态,动态透析法考察微球的体外释放特性。结果:所制微球形态良好,粒径分布窄,平均粒径为(12.4±0.8)μm,包封率为(82.8±1.8)%,载药量为(50.1±1.2)%,体外释放行为用Higuchi方程拟合效果最好。结论:采用静电液滴工艺,通过减小制备体系的表面张力,制备了球形度优良、粒径小、包封率和载药量较高的载环孢素A的壳聚糖-海藻酸盐缓释微球,所得制剂的体外释药规律服从扩散机制。

海藻酸钙-壳聚糖微胶囊组成对BSA通透性能影响的研究

对海藻酸钙-壳聚糖微胶囊的牛血清白蛋白(BSA)双向通透性能进行了定量和定性的初步研究,并初步考察了微胶囊的组成成分及海藻酸钠、壳聚糖的溶液浓度对BSA通透性能的影响.结果表明海藻酸钙-壳聚糖微胶囊在pH1.5～2.0时通透性减弱,pH6.8时通透性增强,且海藻酸钙微胶囊通透性大于海藻酸钙-壳聚糖微胶囊;海藻酸钙-壳聚糖微胶囊中壳聚糖浓度越小,通透性越好;海藻酸钠浓度的影响不显著.

双重载药多层海藻酸盐-壳聚糖缓释微球的制备及体外释放

采用滴注法将海藻酸钠与钙离子交联,制成负载血管内皮生长因子（VEGF）的藻酸钙核心球,利用层层自组装技术在核心球的表面依次包覆壳聚糖、海藻酸和壳聚糖,壳聚糖中负载万古霉素（VAN）,形成多药载药缓控体系.采用正交实验考察海藻酸钠浓度、钙离子浓度及壳聚糖浓度对VEGF和VAN的药物包封率和载药量的影响,优化了制备工艺.采用扫描电子显微镜观察多层微球的表面、截面形貌及粒径,采用傅里叶变换红外光谱检测海藻酸盐与壳聚糖的自组装情况,分别采用酶联免疫吸附（ELISA）双抗体夹心法和紫外分光光度法检测VEGF和VAN的包封率、载药量及体外释放情况.结果表明,海藻酸钠最优浓度为0.04g/mL,氯化钙最优浓度为0.15g/mL,壳聚糖最优浓度为0.01g/mL.微球光滑圆整,均质实心,直径900~1100μm,VEGF的包封率达61.31%,VAN的包封率为3.48%.体外释放实验结果表明,VEGF缓释时间为15.5d,并出现2个释放高峰;VAN缓释时间为4.5d,释药情况平稳持续,无明显突释.双重载药多层包覆微球兼具控制感染和促进血管生成两种潜能,有望应用于组织工程骨的基础研究和临床实践.

β-榄香烯海藻酸钙-壳聚糖微囊的制备

采用乳化-内部凝胶化技术制得载b-榄香烯的海藻酸钙凝胶微球,然后与壳聚糖反应制得b-榄香烯海藻酸钙-壳聚糖微囊。利用激光共聚焦扫描显微镜和激光粒度仪观测所得微囊的形态、粒径及分布,通过气相色谱法考察体外释放性能。结果表明制品球形度好、膜层均匀,粒径呈正态分布,体外释放曲线符合Higuchi方程。

阳离子β-环糊精聚合物复合胰岛素的海藻酸钠/壳聚糖载药微球

背景:大多数蛋白质类药物采用注射剂型是因为口服时生物利用度低,为了提高口服给药的生物利用度,目前常用的方法是将蛋白质药物包裹在脂质体或微球中,并且在这些体系中引入多糖类化合物可促进生物吸收或降低蛋白酶破坏。目的:构建载有阳离子β-环糊精聚合物/胰岛素复合物的海藻酸钠/壳聚糖微球做为口服给药系统,考察阳离子β-环糊精聚合物的电荷密度对胰岛素在模拟胃肠液中释放行为的影响。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-10/2008-07在四川大学高分子科学与工程实验楼完成。材料:β-环糊精、环氧氯丙烷由天津市博迪化工有限公司提供,氯化胆碱、海藻酸钠由成都科龙试剂公司提供,壳聚糖由浙江金壳生物化学有限公司提供,胰岛素由江苏万邦生化医药股份有限公司提供。方法:将β-环糊精、环氧氯丙烷和氯化胆碱经过一步缩聚反应制得阳离子β-环糊精聚合物,并通过投料比控制其电荷密度。将该聚合物与胰岛素形成复合物,采用锐孔-凝固法制备含有该复合物的海藻酸钠/壳聚糖载药微球,并对所得微球进行模拟胃肠液中释药行为研究。主要观察指标:微球的胰岛素包封率及在模拟胃肠液中胰岛素的释放行为。结果:微球的胰岛素包封率与阳离子β-环糊精聚合物的电荷密度相关,最高能达到(76.3±1.5)%。体外释药实验显示,在模拟胃液中微球药物损失小于不加入阳离子β-环糊精聚合物的载有胰岛素的微球;在模拟肠液中累积释放的胰岛素量为5.8IU,大于不加入阳离子β-环糊精聚合物的载有胰岛素的微球。结论:载有阳离子β-环糊精聚合物/胰岛素复合物的海藻酸钠/壳聚糖微球作为口服给药系统能有效地提高包封率和改善胰岛素在模拟胃肠液中的释放。

海藻酸钠-壳聚糖固定化凝血酶微球的制备及稳定性研究

目的固定化凝血酶,以增加制剂的稳定性。方法以海藻酸钠和壳聚糖为载体,采用乳化-交联法制备了空白微球;采用物理吸附法以海藻酸钠-壳聚糖微球为载体对凝血酶固定化。考察固定化条件对固定化酶活性的影响,确定了固定化的条件。结果与凝血酶自由酶相比固定化凝血酶的稳定性显著提高,室温贮存时间显著延长。结论固化凝血酶微球稳定性好,方便贮存。

叶酸-多聚糖复合物海藻酸钙肺靶向微球处方工艺的优化

用单因素考察和均匀设计筛选叶酸-多聚糖复合物肺靶向海藻酸钙微球的最佳处方工艺;考察了微球的体外释药特性和稳定性。按最佳工艺制得的微球形态圆整,粒径在5～20mm范围内,分散性好,体外累积释放率-时间方程为1-Q=0.2941e-0.0331t+0.2820e-0.00085t (r=-0.9905),微球临界相对湿度为72%,存放在4℃和25℃条件下稳定。

海藻酸钠-壳聚糖微球制备及质量评价研究

目的:研究制备海藻酸钠-壳聚糖葫芦素微球,并对其质量评价及体外释药进行研究。方法:采用滴制法制备海藻酸钠-壳聚糖微球,采用显微观察评价微球的粒径、圆整度及形态学特征,并以葫芦素(CU)为评价指标测定微球的载药量、包封率及体外释药规律。结果:本研究制备的微球粒径均一,圆整度良好,包封率为78.72%,载药量为17.50%。体外释药实验表明,释药时间长达60 h,释药曲线均符合Higuchi方程,微球制剂为缓控释制剂。结论:本研究采用微球的制备方法简便可行,研制的微球能明显延缓药物释放,且无突释现象。因此海藻酸钠-壳聚糖微球可作为药物缓控释载体,本研究可为药物缓控释制剂的研究提供理论依据。

避蚊胺-海藻酸钙微球的制备及其体外透皮吸收研究

目的制备海藻酸钙空白微球,减少避蚊胺(DEET)的透皮吸收,延长其作用时间。方法采用溶剂挥发法制备海藻酸钙微球,采用光学显微镜和激光粒度仪考察微球特性;吸附DEET后制成霜剂,通过Franz扩散池,用气相色谱法考察含药微球的透皮吸收。结果所得微球外观圆整,平均粒径42.5μm,吸附量为1.2177g·g-1。透皮试验结果表明,海藻酸钙空白微球能延长DEET的释放,减少皮肤渗透。结论海藻酸钙微球具有显著的缓释效果,并减少DEET对人体及皮肤的不良反应。

α-细辛脑海藻酸钙微球的制备及体外释放药物考察

目的研究α-细辛脑海藻酸钙微球的制备工艺,测定微球中α-细辛脑的体外释放度。方法采用乳化-内部凝胶化法制备海藻酸钙微球,正交试验设计优化制备工艺,分光光度法测定α-细辛脑的含量。结果最优工艺微球球形圆整,载药量为1.17%,包封率为2.40%,微球的平均粒径为17.97μm,大部分微球粒径分布在7~30μm（93.67%）,体外释放符合双相动力学方程Q/100=0.8276-0.0506exp（-1909t）-0.777exp（-0.4405t）。结论以海藻酸钠为载体、乳化-内部凝胶化法制备了海藻酸钙微球,获得微球制备工艺。

依托泊苷壳聚糖-海藻酸钠微球的体内抗癌活性及在小鼠体内分布

目的研究制备的依托泊苷壳聚糖-海藻酸钠微球(Etoposide Chitosan-alginate Microsphere,ECAM)的体内抑瘤作用及体内分布。方法通过比较各组小鼠移植性Lewis肺癌的抑瘤率,考察含药微球的抑瘤效果;用高效液相色谱法测定各组织中依托泊苷浓度。结果依托泊苷微球抑瘤率为63.62%,明显高于其他各组;小鼠尾静脉注射微球后15min,肺内依托泊苷量占注入总量的(52.64±1.79)%。结论 ECAM具有明显的抑制移植性Lewis肺癌的作用和肺靶向效果。

避蚊胺-海藻酸钙微球的试制

采用溶剂挥发法制备避蚊胺-海藻酸钙微球。所得微球外观圆整,平均粒径47.2μm,载药量(26.33±1.17)%,包封率(87.41±3.21)%。考察了将其加至空白霜剂后对大鼠离体皮肤累积渗透量的影响,并与微粉硅胶载药霜剂和原药霜剂比较。结果表明,海藻酸钙微球可减少避蚊胺的累积渗透量。

康普瑞丁磷酸二钠壳聚糖-海藻酸钠靶向微球的药代动力学及体内分布研究

康普瑞丁磷酸二钠（CombretastatinA4p，CA-4P）为新型抗肿瘤前体药物，体内代谢成康普瑞丁活性形式与血管内皮细胞的微管系统结合、阻止新生血管的生成而发挥抗肿瘤的作用，是治疗非小细胞肺癌的药物之一，CA-4P在体内经非特定磷酸酯酶作用可迅速去磷酸化而生成具有生物活性的CA4。

紫外分光光度法测定α-细辛脑海藻酸钙微球的含量

目的:建立α-细辛脑海藻酸钙微球中α-细辛脑的含量测定方法。方法:采用超声波辅助使药物快速溶出,紫外分光光度计在313 nm波长处测定α-细辛脑含量,辅料不影响测定。结果:α-细辛脑浓度在0.003 2～0.025 6 mg/ml范围内与吸光度呈良好线性关系,标准曲线A=34.28C+0.011 3,相关系数r=0.999 8(n=6),平均回收率为99.71%,RSD=2.80%(n=9)。结论:该法快速、简便、准确、重现性好,适用于该制剂的质量评价。

康普瑞丁磷酸二钠壳聚糖-海藻酸钠靶向微球的体内外抗肿瘤作用

目的:观察化合物康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对人非小细胞肺癌细胞株的体外抑制作用及对裸小鼠腹腔移植非小细胞肺癌细胞株的体内抗肿瘤作用。方法:分别用MTT法、细胞生长曲线及细胞集落形成试验,研究康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对非小细胞肺癌细胞增殖的抑制作用,台盼蓝染色观察细胞形态变化;非小细胞肺癌细胞腹腔移植裸小鼠iv给予康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球,qd,10d,颈椎脱臼处死动物,分别称体重、瘤重,计算抑瘤率。结果:MTT法提示,0.5~64.0μg/mL康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对非小细胞肺癌细胞48h的抑制率为31%~75%,平均ICs。约为1.137μg/mL,生长曲线提示,康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对非小细胞肺癌细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系;台盼蓝染色后细胞出现凋亡形态的变化。康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对裸小鼠腹腔移植非小细胞肺癌细胞的治疗作用呈量效关系,随剂量增大,裸小鼠抑瘤率也增加。结论:康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖-海藻酸钠靶向微球对人非小细胞肺癌细胞的增殖具有抑制作用,对非小细胞肺癌细胞裸小鼠腹腔移植瘤具治疗作用。

载VEGF/VAN多层海藻酸盐-壳聚糖缓释微球的制备

目的:制备载有血管内皮生长因子(VEGF)和万古霉素(VAN)的多层海藻酸盐-壳聚糖缓释微球,探讨其体外释放特性。方法:采用乳化交联和层层自组装技术制备微球;正交实验设计考察海藻酸钠浓度、氯化钙(CaCl2)浓度、油水比及span80浓度对VEGF和VAN包封率(EE)和载药量(DL)的影响,以优化制备工艺;扫描电子显微镜(SEM)观察多层微球的表面形貌和粒径;傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)检测海藻酸与壳聚糖的自组装情况;分别采用ELISA双抗体夹心法和紫外分光光度法检测VEGF和VAN的EE、DL和体外释放量并绘制累积释放曲线。结果:所制备微球呈黄褐色粉末状;SEM观察,微球呈圆球形,表面光滑,分散性较好,平均粒径约为50μm。制备缓释微球时,海藻酸钠浓度为1.0g·mL^(-1)、CaCl2浓度为8g·mL^(-1)、油水比为3∶1及span80浓度为2%时为最佳配方,VEGF和VAN的EE分别达49.63%和16.67%,体外累计释放时间分别为16.5和12.5d,释放量可达95%。结论:本研究通过优化制备工艺,制备了粒径较小、EE较高、缓释效果较好的载VEGF/VAN多层海藻酸盐-壳聚糖缓释微球。

海藻酸-壳聚糖微球的制备及其在生物医药领域的应用

壳聚糖是唯一的天然碱性氨基多糖,海藻酸是一种天然阴离子多聚糖,这两种物质都具有良好的生物相容性,无细胞毒性,具有生物可降解性,是制备微球的良好材料。本文综合阐述了近年来国内外联合利用壳聚糖和海藻酸两种天然高分子物质制备微球的主要方法(包括离子交联法和乳化法),以及海藻酸-壳聚糖微球作为药物载体在生物医药领域的应用。

双乳化-凝胶法制备单分散海藻酸钙微球及其载BSA研究

采用双乳化-凝胶法制备了单分散的海藻酸钙凝胶微球,并通过正交试验系统考察了海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、表面活性剂浓度、搅拌速度和油水比对海藻酸钙凝胶微球粒径及形貌的影响。在优化的条件下,制备出了平均粒径为4μm、单分散和球形度好的海藻酸钙凝胶微球。包埋模型药物牛血清白蛋白(BSA)的过程中,以去离子水作为洗涤液洗涤海藻酸钙微球时,BSA的包封率仅为13%左右;当水洗液的pH值为3.2时,BSA的包封率提高到66%左右,载药率可达16%,这是海藻酸钙pH值响应溶胀和BSA与海藻酸盐之间静电作用的结果。微球中BSA的体外释放曲线表明,该系统具有在模拟胃液中释药速率慢、释药量低、模拟肠液中释药迅速的特性。因此,双乳化-凝胶法制备海藻酸钙微球有望成为制备蛋白类药物控释制剂的一种新方法,以达到靶向快速给药的目的。

海藻酸钠-壳聚糖微球封堵犬肺支气管的实验研究

目的应用不同粒径海藻酸钠-壳聚糖微球(AC微球)通过支气管镜对犬肺气道进行封堵,从而通过观察肺的CT改变及病理学变化,证明AC微球能够对犬肺支气管封堵有效性安全.方法家犬20条,雌雄各半,随机分为A、B、C、D 4组,通过支气管镜于气道分别置入d=600μm、1000μm、2000μm、3000μm的AC微球,观察犬的一般状况变化,术后2周行胸部CT及病理学检查.结果 B、C组动物封堵后形成有效封堵,肺CT示肺段性不张,炎性改变;病理学检查示肉芽肿且炎性细胞浸润。结论 d=1000-2000μm的AC微球封堵支气管安全、有效。