针刺对阿尔茨海默病大鼠海马区胰岛素PI3K/Akt信号通路及葡萄糖代谢的影响

目的 实验以阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)大鼠为研究对象,从胰岛素磷脂酰肌醇三激酶/蛋白激酶B(Phosphatidylinositide 3-kinases/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路切入,观察针刺督脉腧穴百会、水沟对海马区葡萄糖代谢的影响并探讨其相关机制,为针刺治疗AD提供实验依据。方法 选取SPF级SD大鼠80只。随机分为模型组、假手术组、空白组、针刺组,每组20只。采用D-半乳糖联合Aβ25-35方法进行AD造模。造模成功后1周,针刺组大鼠每日针刺百会、水沟1次,连续治疗6 d,间歇1 d为1个疗程,共4个疗程。其余3组只常规抓取。治疗结束后观察以下指标:(1)采用Morris水迷宫测试评估大鼠的学习记忆能力。(2)免疫组化法检测大鼠海马区Aβ、Tau、p-tau蛋白的表达情况。(3)Western blot法检测大鼠海马区胰岛素信号通路PI3K/Akt相关蛋白PI3K、Akt、糖原合成酶3(Glycogen synthase kinase 3,GSK-3β)、胰岛素受体(Insulin receptor, INSR)的表达水平。结果 (1)Morris水迷宫:定位航行实验中,模型组大鼠逃避潜伏期显著延长(P<0.01),而针刺组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.05)。空间探索实验中,模型组穿越平台次数显著减少(P<0.01);针刺组大鼠穿越平台次数显著增加(P<0.01)。(2)免疫组化染色:模型组大鼠海马区Aβ、Tau、p-tau均明显增高(P<0.01);针刺组Aβ、Tau、p-tau明显降低(P<0.01)。(3)WB:模型组海马区PI3K、Akt、INSR蛋白表达水平明显降低(P<0.01),GSK-3β蛋白表达水平明显增高(P<0.01);针刺组海马区PI3K、Akt、INSR蛋白表达水平明显增高(P<0.01),GSK-3β蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论 (1)针刺百会、水沟可改善AD大鼠的学习记忆能力;(2)针刺百会、水沟可提高PI3K、Akt、INSR、GSK-3β蛋白表达水平,通过激活胰岛素PI3K/Akt信号通路,提高AD大鼠海马区的葡萄糖代谢水平,促进Aβ的清除,降低Tau蛋白的磷酸化水平。