补肾调肝清心方对围绝经期抑郁症睡眠障碍大鼠模型海马5-羟色胺1A受体、5-羟色胺2A受体的影响

目的观察补肾调肝清心方对围绝经期抑郁症睡眠障碍模型大鼠海马5-羟色胺1A受体(5-hydroxytryptamine 1A receptor,5-HT1AR)、5-羟色胺2A受体(5-hydroxytryptamine 2A receptor,5-HT2AR)的影响。方法将60只围绝经期大鼠按体重随机分为5组,每组12只:围绝经期正常对照组(A);围绝经期抑郁症睡眠障碍模型组(B);围绝经期抑郁症睡眠障碍补佳乐治疗组(C);围绝经期抑郁症睡眠障碍米氮平治疗组(D);围绝经期抑郁症睡眠障碍中药治疗组(E);A组为围绝经期正常大鼠,其余4组进行18天不可预知慢性应激。于应激后对造模动物进行72小时连续快速眼相睡眠剥夺(REM)。每天在应激前1小时按组给药。在末次灌胃24小时后,颈椎脱臼法处死大鼠,取大鼠海马,分别用荧光定量检测海马5-HT1ARmRNA和5-HT2ARmRNA、蛋白印迹和免疫荧光检测海马5-HT1AR和5-HT2AR的表达。结果蛋白印迹检测(western blot)海马及免疫荧光检测海马CA1区均显示:海马区5-HT1AR表达水平各组无明显差异(P>0.05),而5-HT2AR表达水平上,模型组显著低于正常组(P<0.05),治疗组提高了5-HT2AR的表达水平,且与模型组相比存在显著性差异(P<0.05);RT-PCR显示:海马区5-HT1AR mRNA水平各组无明显差异(P>0.05),而5-HT2AR mRNA水平,模型组明显低于正常组(P<0.01),米氮平组较模型组有极显著性差异(P<0.001),中药组较模型组有显著性差异(P<0.05)。结论补肾调肝清心方能提高5-HT2AR的mRNA及蛋白水平的表达,免疫荧光的结果表明在海马CA1区发挥作用,表明补肾调肝清心方可以通过调节海马CA1区5-HT2AR表达来改善睡眠障碍。

电针百会、神庭穴对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及海马5-羟色胺1A受体表达的影响

目的探讨电针百会、神庭穴对脑缺血再灌注(MCAO/R)大鼠学习记忆的影响及其可能的作用机制。方法将90只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=18)和手术组(n=72)。手术组参照线栓法制备MCAO/R大鼠模型。将符合纳入标准的54只手术组大鼠随机分为模型组(n=18)、电针组(n=18)和非穴组(n=18)。电针组电针百会、神庭穴共14 d。小动物磁共振扫描检测脑梗死体积;Morris水迷宫测试检测学习记忆能力;免疫组化检测5-羟色胺1A(5-HT_(1A))受体的定位和表达。结果干预前各组大鼠脑梗死体积无显著性差异(F=1.678,P>0.05)。干预后,与模型组和非穴组相比,电针组脑梗死体积显著减小(P<0.001)。Morris水迷宫测试中,电针组较模型组和非穴组逃避潜伏期显著缩短(P<0.001),穿越平台次数增加(P<0.05)。5-HT_(1A)受体在缺血侧海马CA1、CA3和DG区均出现表达,电针组表达量较模型组和非穴组均降低(P<0.05)。非穴组各项指标与模型组比较均无显著性差异(P>0.05)。结论电针百会、神庭穴可有效改善MCAO/R大鼠的学习记忆能力,其机制可能与调节海马区5-HT_(1A)受体表达有关。

酸枣仁提取物调控miR-7b-3p/5-羟色胺1A受体表达促进骨生长

背景:前期研究发现,酸枣仁提取物通过提高脑组织5-羟色胺1A受体(serotonin 1A receptor,5-HT1AR)表达,使之与5-羟色胺结合,延长小鼠慢波睡眠,促进生长激素的分泌,从而使骨生长。5-HT1AR作为一种蛋白质,其表达丰度受到miRNA的调控。作者推测酸枣仁提取物可能通过miRNA调控5-HT1AR的表达从而发挥药物作用。目的:观察酸枣仁提取物通过干预小鼠脑组织中miR-7b-3p/5-HT1AR通路对骨骼生长的影响。方法:①将昆明种小鼠分为正常对照组、用药组(灌胃酸枣仁提取物0.320 mg/g),阳性对照组(灌胃酸枣仁皂甙0.013 mg/g)和酸枣仁提取物+5-HT1AR抑制剂组(灌胃酸枣仁提取物最后3 d同时每天侧脑室注射5-HT1AR选择性抑制剂P-MPPF 8μg),25 d后观察酸枣仁提取物对小鼠骨生长、血清生长激素水平及脑组织5-HT1AR表达的影响;②基因芯片法筛选由酸枣仁提取物引起的骨生长小鼠与普通小鼠脑组织差异表达的miRNAs,并通过PCR验证和双荧光素酶报告基因实验证实筛选的miR-7b-3p与5-HT1AR的调控关系;③体外培养小鼠脑皮质细胞并鉴定,利用Western blot法观察酸枣仁提取物对脑皮质细胞中5-HT1AR表达的影响;④将昆明种小鼠分为正常对照组、用药组、miR-7b-3p inhibitor组、用药+miR-7b-3p mimics组、阳性对照组,观察各组小鼠脑组织5-HT1AR表达及5-羟色胺与5-HT1AR结合活性;⑤将SD大鼠分为正常对照组、用药组、miR-7b-3p inhibitor组、用药+miR-7b-3p mimics组、阳性对照组,观察各组大鼠慢波睡眠的变化。结果与结论:①酸枣仁提取物可以促进小鼠体长、胫骨增长,促进生长激素分泌,提高脑组织5-HT1AR含量;②基因芯片筛选出差异表达的miRNAs个数为16个,其中上调有13个,下调有3个;生物信息学预测下调miR-7b-3p可以调控5-HT1AR表达,且双荧光素酶报告基因实验证实二者有直接调控关系;③酸枣仁提取物和沉默脑皮质细胞中miR-7b-3p表达可以引起5-HT1AR高表达;沉默miR-7b-3p后小鼠脑组织5-HT1AR表达、5-羟色胺与5-HT1AR结合活性及生长激素分泌均升高;过表达miR-7b-3p后小鼠脑组织5-HT1AR表达、5-羟色胺与5-HT1AR结合活性及生长激素分泌均降低;大鼠慢波睡眠期也相应延长或缩短。结果表明,酸枣仁提取物能够降低脑组织的miR-7b-3p水平,同时增加5-HT1AR的表达量。这种机制有助于延长慢波睡眠周期,并且促进生长激素的生成,对骨骼生长有积极影响,为使用酸枣仁提取物作为促进骨骼生长的潜在手段提供了科学依据。

橘皮竹茹汤对化疗性异食癖大鼠模型5-羟色胺3受体蛋白和mRNA表达的影响

目的观察橘皮竹茹汤对化疗性异食癖大鼠模型止呕作用及对5-羟色胺3受体(5-HT3R)蛋白和mRNA的影响。方法将36只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、中药对照组(橘皮竹茹汤10.6 g/kg,不造模)、模型组、昂丹司琼组(2.6 mg/kg)、橘皮竹茹汤低剂量组(5.3 g/kg)和橘皮竹茹汤高剂量组(10.6 g/kg),每组6只。各组大鼠给予相应干预措施6 d(每日2次)后,采用腹腔注射顺铂(6 mg/kg)的方式诱导建立化疗性异食癖大鼠模型,观察并记录造模后24 h内大鼠体质量、摄食量和高岭土摄入量的变化。继续干预1 d后,苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠胃窦、回肠组织形态学变化;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测延髓、回肠组织中5-HT3R、色氨酸羟化酶(TPH)、单胺氧化酶A(MAOA)mRNA表达;Western blot法检测延髓组织中5-HT3R蛋白的表达。结果①与正常对照组比较,模型组大鼠体质量、摄食量降低(P<0.05),高岭土摄入量显著增加(P<0.05);与模型组比较,昂丹司琼组和橘皮竹茹汤低、高剂量组大鼠高岭土摄入量显著降低(P<0.05)。②HE染色显示,与正常对照组比较,模型组胃窦组织上皮细胞受损,固有层腺体排列疏松、紊乱,回肠上皮部分缺失,腺体排列紊乱;与模型组比较,昂丹司琼组和橘皮竹茹汤低、高剂组胃窦和回肠组织病理改变减轻。③RT-qPCR结果显示,与正常对照组比较,模型组大鼠延髓、回肠5-HT3R mRNA表达水平显著升高(P<0.05),回肠MAOA mRNA表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,橘皮竹茹汤高剂量组大鼠延髓5-HT3R mRNA表达水平明显降低(P<0.05),橘皮竹茹汤低剂量组回肠TPH1 mRNA、橘皮竹茹汤高剂量组延髓TPH2 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),昂丹司琼组、橘皮竹茹汤低剂量组、橘皮竹茹汤高剂量组回肠MAOA mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。④Western blot结果显示,与正常对照组比较,模型组大鼠延髓5⁃HT3R蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,橘皮竹茹汤高剂量组大鼠延髓5-HT3R蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论橘皮竹茹汤可以通过抑制延髓5-HT3R蛋白和mRNA的表达,调控5-羟色胺合成与代谢相关酶,进而改善化疗导致的恶心呕吐。

5-羟色胺系统在应激损伤海马神经发生中的作用

应激在哺乳动物生长发育过程中普遍存在,对心理和生理有广泛的负面影响,可导致情绪和认知功能障碍^([1])。截止2020年,全球抑郁症的患病人数达到1.93亿,在新型冠状病毒肺炎疫情后,全球抑郁症的患病人数更是激增到2.46亿,增幅达到了276%^([2])。然而,基于应激类型多样、作用时间差异和个体耐受性不同等特征,应激反应的结果及生物学机制也各不相同。海马含有大量糖皮质激素受体,因此极易受到应激反应的影响。海马在解剖结构上可分为背侧、中间和腹侧。在功能上,背侧海马(相当于灵长类动物的后部海马)主要执行认知功能;腹侧海马(相当于灵长类动物的前部海马)主要执行情绪功能^([3])。

老年功能性消化不良患者血浆神经肽S受体1、5-羟色胺的表达及其临床意义

目的探讨老年功能性消化不良(FD)患者血浆神经肽S受体1(NPSR1)、5-羟色胺(5-HT4)的表达及其临床意义。方法选取2020年2月—2022年8月在武汉市第一医院就诊的96例老年FD患者作为FD组,另取同期该院健康体检老年人80例作为对照组。对比FD组与对照组临床资料、血浆NPSR1、5-HT4水平。多因素逐步Logistic回归分析影响老年FD发生的相关因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血浆NPSR1、5-HT4及两者联合检测对老年FD的诊断效能。结果FD组体质量指数、脂肪肝、睡眠障碍、焦虑、抑郁及IL-6、CCK及SS水平高于对照组(P<0.05),饮食规律、每周运动时间≥4 h占比及MTL水平低于对照组(P<0.05)。FD组血浆NPSR1水平低于对照组(P<0.05),5-HT4水平高于对照组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,睡眠障碍[O^R=2.735(95%CI:1.299,5.756)]、NPSR1[O^R=3.203(95%CI:1.461,7.023)]、5-HT4[O^R=3.093(95%CI:1.410,6.781)]为老年FD发生的危险因素(P<0.05);饮食规律[O^R=0.361(95%CI:0.165,0.792)]为老年FD发生的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血浆NPSR1、5-HT4及两者联合诊断老年FD的敏感性分别为78.13%(95%CI:0.683,0.857)、75.00%(95%CI:0.649,0.830)、73.96%(95%CI:0.638,0.821),特异性分别为72.50%(0.95%CI:0.612,0.816)、81.25%(95%CI:0.706,0.888)、95.00%(95%CI:0.870,0.984),曲线下面积分别为0.779(95%CI:0.711,0.838)、0.784(95%CI:0.716,0.843)、0.891(95%CI:0.836,0.933)。结论老年FD患者血浆NPSR1、5-HT4水平高于健康者,且血浆NPSR1、5-HT4联合诊断老年FD的效能较高。

血清与海马内5-羟色胺和5-羟基吲哚乙酸的LC-MS/MS测定及其在白芍抗抑郁功效评价中的应用

[目的]建立一种用于测定血清和海马组织中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和5-羟基吲哚乙酸(5-hydroxyindole acetic acid,5-HIAA)含量的液相色谱与串联质谱联用(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)分析方法,并应用于中药抗抑郁功效的评价。[方法]取小鼠血清和海马组织,通过蛋白沉淀法进行样品前处理后,利用所建立的LC-MS/MS分析方法测定5-HT和5-HIAA的含量。采用Hypersil ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温为40℃,流动相为0.1%甲酸水(含2 mmol·L^(-1)乙酸铵):乙腈,流速为1 mL·min^(-1),质谱检测选择多重反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式。将198只小鼠随机分为正常对照组、模型组、盐酸氟西汀组和30个白芍提取物组,每组6只。测定血清和海马中5-HT和5-HIAA含量,并进行悬尾实验与强迫游泳实验。[结果]5-HT和5-HIAA分别在0.1~1000 ng·mL^(-1)和1~500 ng·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好(r>0.999),加样回收率和精密度均符合生物样品的分析要求。白芍提取物组5-HIAA/5-HT值相对于模型组的变化程度,与行为学实验指标变化程度具有一定相关性,且变化程度显著高于行为学实验,组内相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)更小。[结论]建立的LC-MS/MS分析方法操作简便快捷、结果准确、灵敏度高、重现性好、专属性强,可同时测定血清、海马组织中5-HT和5-HIAA的含量,适用于白芍等具有神经保护功效药物的研究及药效评价。

番泻苷A对2型糖尿病小鼠动脉粥样硬化斑块形成及5-羟色胺信号分子表达的影响

目的·研究番泻苷A (sennoside A,SA)对2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)小鼠动脉粥样硬化斑块形成和5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)及其受体表达的影响。方法·将载脂蛋白E基因敲除小鼠12只随机分为模型组(model组)和治疗组(model+SA组),每组6只,同遗传背景C57BL/6J小鼠6只作为对照组(control组)。Control组普通饲养,model组和model+SA组在高脂饲养基础上每日给予腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立T2DM模型。Model+SA组每日给予SA (45 mg/kg)灌胃干预8周,control组和model组给予等体积双蒸水灌胃。比较造模及治疗前后小鼠体质量、空腹血糖和餐后2 h血糖情况,采用油红O染色和苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H-E染色)观察小鼠主动脉斑块面积,并用ELISA试剂盒测定小鼠血清和胸主动脉中5-HT水平,采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测小鼠胸主动脉中5-羟色胺2B受体(5-hydroxytryptamine receptor 2B,HTR2B)和5-羟色胺转运蛋白(serotonin transporter,SERT)的表达情况。结果·与control组相比,model组小鼠体质量、空腹血糖和餐后2 h血糖均升高,糖代谢紊乱;主动脉斑块形成,胸主动脉中HTR2B、SERT蛋白表达升高;胸主动脉5-HT浓度降低,血清5-HT浓度升高(均P<0.05)。给予SA治疗后,与model组相比,model+SA组小鼠体质量下降,空腹血糖和餐后2 h血糖水平明显改善;主动脉斑块面积减少,胸主动脉HTR2B、SERT蛋白表达显著降低;胸主动脉5-HT浓度升高,血清5-HT浓度降低(均P<0.05)。结论·SA可减少T2DM小鼠动脉粥样硬化斑块面积,其作用可能与降低血糖、抑制5-HT及其受体表达有关。

磁共振成像在体可视化检测肾脏5-羟色胺的动态变化及药物性急性肾损伤早期无创诊断

【目的】磁共振成像(MRI)在体检测肾脏5-羟色胺受体的动态变化,为药物性急性肾损伤早期诊断提供无创影像方法。【方法】以5-羟色胺基团为基础,构建具有5-羟色胺受体靶向性的磁共振对比剂(HT-Gd),通过检测小鼠肾脏部位T1加权磁共振成像(T1WI)信号,探索药物性肾损伤早期MRI检测方法。【结果】体外细胞内吞试验发现,经顺铂预处理12 h后,肾小管上皮细胞(HK-2)对HT-Gd的摄取是36.8 pg/cell,而未经顺铂处理细胞对HT-Gd摄取量仅为14.7 pg/cell。在体内磁共振成像研究中发现,HT-Gd可以增强顺铂给药24 h小鼠的肾脏T1WI信噪比至40.5%,约为未经顺铂处理组小鼠的2倍(SNR=20.2%)。【结论】HT-Gd可视化检测肾脏部位的5-羟色胺受体,实现了对顺铂诱导急性肾损伤的早期诊断,为药物性急性肾损伤早期诊疗研究提供了新的参考方法。

基于5-羟色胺及其受体研究安眠巴布贴对对氯苯丙氨酸致失眠大鼠的影响

目的基于5-羟色胺(5-HT)及其受体研究安眠巴布贴对对氯苯丙氨酸致失眠大鼠的影响。方法将48只体重(200±10)g的SPF级SD大鼠安装脑电监测电极后按随机数字表法分为对照组、模型组、干预组、安慰组,每组12只。模型组、干预组、安慰组按300 mg/(kg·d)腹腔注射对氯苯丙氨酸2 d制作失眠模型,对照组注射等量生理盐水。造模成功后,对照组及模型组常规饲养,干预组神阙穴敷贴安眠巴布贴,安慰组神阙穴敷贴安慰贴,连续干预7 d。观察四组睡眠-觉醒累积量,采用酶联免疫吸附试验、免疫组织化学染色检测四组中缝背核、下丘脑、海马中5-HT、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)及5-HT1A受体(5-HT1AR)、5-HT2AR表达。采用RT-PCR检测5-HT1AR mRNA、5-H2AR mRNA水平。结果模型组12 h白天、24 h全天觉醒量高于对照组,快速眼动(REM)、非快速眼动(NREM)睡眠量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预组12 h白天、24 h全天觉醒量低于模型组,REM、NREM睡眠量高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组中缝背核、下丘脑、海马组织5-HT、5-HIAA、5-HT1AR mRNA表达水平均低于对照组,5-HT2AR mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预组中缝背核、下丘脑、海马组织5-HT、5-HIAA、5-HT1AR mRNA表达水平均高于模型组,5-HT2AR mRNA表达水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组和干预组中缝背核、下丘脑、海马组织5-HT1AR阳性细胞膜染色深数目多;模型组细胞膜染色浅且阳性细胞数目少。对照组和干预组中缝背核、下丘脑、海马组织5-HT2AR阳性细胞膜染色浅且数目少;模型组阳性细胞膜染色深且数目多。安慰组各指标与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论安眠巴布贴可能通过调节中枢5-HT及5-HT1AR、5-HT2AR表达来发挥对PCPA致失眠大鼠的治疗作用。

脐针对单侧腹股沟疝修补患者术后胃肠功能紊乱的预防及对5-羟色胺的影响

目的 探讨脐针对单侧腹股沟疝修补患者术后胃肠功能紊乱(PGID)的预防效果并探讨其机制。方法 选取2022年1—12月在河南中医药大学第一附属医院接受单侧腹股沟疝修补手术的80例患者。根据随机数字表法分为脐针组(40例)和对照组(40例)。给予两组腹股沟疝修补手术治疗,脐针组于麻醉恢复拔管后,在术后的1~3 d,每天7:00—11:00完成30 min的脐针干预,而对照组不进行处理,将两组患者术后的首次排气时间、首次排便时间、肠鸣音恢复时间、恶心发生率、呕吐发生率、腹胀发生率、切口疼痛发生率进行对比。比较两组入室时、气管导管拔管时、术后24 h、术后72 h血清5-羟色胺3(5-HT3)、5-HT4、5-HT7受体水平。结果 脐针组术后首次排气、首次排便以及肠鸣音恢复所需时间均较对照组短,且恶心、呕吐、腹胀、切口疼痛的发生率也低于对照组(P<0.05)。拔管后两组5-HT4、5-HT7受体水平差异无统计学意义(P>0.05),5-HT3受体水平差异有统计学意义(P<0.05);术后24 h对照组5-HT3、5-HT4、5-HT7受体水平低于脐针组(P<0.05);拔管后两组5-HT3、5-HT4、5-HT7均较入室时低(P<0.05);术后24 h脐针组5-HT3、5-HT4、5-HT7较拔管时升高(P<0.05)。结论 脐针可能通过促进5-HT3、5-HT4、5-HT7受体水平的恢复降低单侧腹股沟疝修补患者PGID症状。

隔药饼灸对功能性消化不良肝郁脾虚模型大鼠海马盐皮质激素受体、糖皮质激素受体、5-羟色胺1A受体表达的影响

目的:观察隔药饼灸对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)肝郁脾虚模型大鼠海马盐皮质激素受体(mineralocorticoid receptor,MR)、糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)、5-羟色胺1A受体(5-hydroxytryptamine receptor 1A,5-HTR1A)表达的影响.方法:将50只SD大鼠按随机数字表法随机分为空白组、模型组、隔药饼灸组、逍遥散组、多潘立酮组5组,每组10只,空白组正常喂养,其余4组采用复合病因造模法(慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节+夹尾+摇晃)造模,连续3 wk;再按被试因素予以隔药饼灸和逍遥散、多潘立酮灌胃,共治疗2 wk.实验结束后采用营养性半固体糊灌胃法测定大鼠胃排空率,用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-PCR)法检测大鼠海马MR、GR、5-HTR1A的表达.结果:(1)模型组大鼠胃排空率较空白组明显下降(P<0.01),治疗后各治疗组大鼠胃排空率较模型组上升(均P<0.01),但3组间比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)与空白组比较,模型组大鼠MR表达差异无统计意义(P>0.05);而G R及5-H T R1A的表达下降且差异均有统计意义(均P<0.05);与模型组比较,隔药饼灸组、逍遥散组、多潘立酮组大鼠海马MR的表达亦无统计意义(P>0.05),而GR及5-HTR1A的表达上调且差异均有统计学意义(均P<0.05),但3组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论:隔药饼灸同逍遥散及多潘立酮一样能调节海马GR、5-HTR1A的表达,从而调节边缘系统-下丘脑-垂体-肾上腺轴(limbic system-hypothalamic-pituitary-adrenal axis,LHPA/HPA轴),提高大鼠胃排空率,改善胃肠动力,最终起到治疗本病的作用.

柴贝止痫汤对癫痫—抑郁共病模型大鼠大脑皮层及海马中5-HTT、5-HT_(1A)R、5-HT_(2A)R和DA_(2)R表达的影响

目的 观察柴贝止痫汤对氯化锂—匹罗卡品慢性颞叶癫痫—抑郁共病模型大鼠大脑皮层及海马中5-羟色胺转运体(5-hydroxytryptamine transporter, 5-HTT)、5-羟色胺受体(5-hydroxytryptamine repreceptor, 5-HTR)(5-HT_(1A)R、5-HT_(2A)R)和多巴胺(dopamine, DA)受体(DA_(2)R)表达的影响,探讨柴贝止痫汤对癫痫—抑郁共病的干预机制。方法 建立氯化锂—匹罗卡品慢性颞叶癫痫—抑郁共病大鼠模型。造模成功后,将大鼠随机分为6组:正常组、模型组、西药组(西酞普兰给药)和柴贝止痫汤低、中、高剂量组,连续灌胃给药14天,每天2次。干预后,通过糖水偏好及强迫游泳实验进行抑郁行为学监测;酶联免疫吸附法检测大鼠大脑皮层及海马中5-HT、DA含量;实时定量PCR法检测大鼠大脑皮层及海马中5-HTT、5-HT_(1A)R、5-HT_(2A)R和DA_(2)R基因的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测大鼠大脑皮层及海马中5-HTT、5-HT_(1A)R、5-HT_(2A)R和DA_(2)R的蛋白表达水平。结果 药物干预后,与模型组相比,柴贝止痫汤中、高剂量组大鼠糖水消耗量显著增加(P<0.01),不动时间显著减少(P<0.01);与模型组比较,柴贝止痫汤中(P<0.05)、高剂量组(P<0.01)大鼠大脑皮层及海马中5-HT含量、皮层中DA含量升高,高剂量组(P<0.05)大鼠大脑海马中DA含量升高;与模型组相比,柴贝止痫汤高剂量组大鼠大脑皮层5-HTT mRNA表达降低(P<0.01),而海马中5-HTT mRNA表达升高(P<0.05);同时,柴贝止痫汤高剂量组大鼠大脑皮层和海马中5-HT_(1A)R mRNA表达明显升高(P<0.05),蛋白表达水平与mRNA水平表达一致。5-HT_(2A)R和DA_(2)R的mRNA和蛋白表达水平在处理前后均无变化。结论 柴贝止痫汤能够通过下调慢性颞叶癫痫—抑郁共病模型大鼠大脑皮层5-HTT,上调海马5-HTT,以及上调大脑皮层和海马中5-HT_(1A)R的表达水平,改善抑郁行为。

腹部推拿按摩对CFS大鼠HPA轴功能及海马区5-HT1AR-CaMKⅡ通路的影响

目的 观察腹部推拿按摩对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能及海马区5-HT1AR-CaMKⅡ通路的影响,为完善其作用机制提供数据支撑。方法 将60只SD大鼠随机分为3组,每组20只。对照组正常饲养,模型组和干预组采用睡眠剥夺和力竭游泳法制备CFS模型。制备成功后,干预组予以腹部按摩,干预6周。结果 T_(0)时,模型组和干预组矿场格子计数、悬挂不动时间、力竭游泳时间比较,差异无统计学意义(P<0.05);各组大鼠的血浆ACTH、CORT、CRH水平比较,无显著差异(P>0.05)。T_(1)时,模型组与干预组矿场格子计数和力竭游泳时间少(短)于对照组,悬挂不动时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组与干预组ACTH、CORT、CRH水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。T_(2)时,干预组矿场格子计数和力竭游泳时间多(长)于模型组,干预组ACTH和CORT水平均高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 腹部推拿按摩能够改善CFS大鼠病理进程中HPA轴功能耗损,对海马区5-HT1AR-CaMKⅡ通路也有调节,可能是其发挥抗CFS作用的重要机制。

化疗患者5-羟色胺3受体拮抗剂路径化管理模式的建立与应用

目的建立化疗患者5-羟色胺3受体拮抗剂(5-HT3RA)路径化管理模式,提高化疗患者用药合理性。方法制定5-HT3RA规范化用药管控规则,并借助医疗智能及决策支持(MINDS)系统,以信息抓取结合医嘱前置审核的形式对使用5-HT3RA的化疗患者开展路径化管理,对用药指征、用法用量、疗程等实施全程化干预。通过比较实施路径化管理前后5-HT3RA无指征用药、用法用量不合理、重复用药、疗程不合理的变化情况以及5-HT3RA人均药费变化情况,对干预效果进行分析。结果共纳入9181例患者,实施路径化管理后,无指征用药率降低0.48%,单次剂量、给药频次、重复用药、疗程(化疗结束后3 d仍使用5-HT3RA)的不合理率分别降低10.48%、0.65%、1.33%、0.34%,5-HT3RA人均药费降低13.72元,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。结论我院建立的化疗患者5-HT3RA路径化管理模式有效提高了用药合理性,为临床合理用药提供了新思路。

5-羟色胺受体3拮抗剂通过IκBα/NF-κB信号通路抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应

在败血症等炎症相关疾病中,巨噬细胞过度产生的炎症因子在疾病的发病机制中发挥关键作用。5-羟色胺受体3(5-hydroxytryptamine receptor 3,5-HT_(3)R)拮抗剂,近来被发现在免疫系统中具有抑制炎症的作用,但其具体机制尚不清楚。本文使用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激小鼠巨噬细胞系RAW 264.7细胞,引发巨噬细胞炎症相关蛋白质的表达和炎症因子的释放。结果显示,在RAW 264.7细胞中,与无处理组相比,LPS以剂量和时间依赖的方式促进炎症相关蛋白质的表达和炎症因子的释放。进一步使用5-HT_(3)R拮抗剂格拉司琼(granisetron,GA)进行预处理,检测其抗炎作用。蛋白质免疫印迹和酶联免疫吸附测定的结果表明,与LPS处理组相比,随着GA浓度的升高,其抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症的效果越好(P<0.05)。同时,细胞活力和细胞毒性的结果也表明,所使用的GA对细胞不造成损伤。另外,通过免疫荧光实验和双荧光素酶检测表明,GA可以抑制LPS诱导的NF-κB的核移位和转录活性;进一步的蛋白质免疫印迹结果表明,GA可以通过抑制IκBα的磷酸化而抑制其降解,从而抑制NF-κB的功能。总之,本文的结果提示,GA可以通过抑制IκBα/NF-κB信号通路,抑制RAW 264.7巨噬细胞中炎症相关蛋白质的表达和炎症因子的释放。本研究结果为进一步探究5-HT_(3)R拮抗剂抗炎的分子机制,以及研发治疗败血症等炎症相关疾病的药物提供科学依据。

针刺对抑郁症睡眠障碍大鼠行为学和海马5-羟色胺受体表达水平的影响

目的观察针刺治疗抑郁症睡眠障碍(SDD)的分子机制。方法将Open-Field法评分相近的36只Wistar大鼠随机分为3组:正常组、模型组和针刺组,每组12只。除正常组外,其余各组均接受18 d不同的应激。应激18 d后,再进行72 h快眼动睡眠剥夺造模。针刺组每天在应激前1 h进行针刺,连续21 d。21 d后,计算行为得分,取大鼠海马检测5-HT1A受体、5-HT2A受体mRNA水平。结果模型组大鼠自主活动较正常组明显减少(P<0.01);针刺组大鼠的自主活动较模型组明显增加(P<0.01)。与正常组相比,模型组大鼠海马5-HT1A受体mRNA表达明显下降,5-HT2A受体mRNA表达明显上升(均P<0.01);与模型组相比,针刺组大鼠海马5-HT1A受体mRNA表达上升、5-HT2A受体mRNA表达下降(P<0.05)。结论针刺可能通过调整5-HT受体间不平衡而发挥治疗SDD效应。

5-羟色胺1A受体C(-1019)G基因多态性与老年抑郁症和伴有抑郁症状的阿尔茨海默病的关联研究

目的:探讨中国汉族人群中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)1A受体C(-1019)G基因多态性与老年抑郁症和伴有抑郁症状的阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的关系。方法:采用病例对照研究方法,以106例老年抑郁症(老年抑郁症组)、72例伴有抑郁症状的AD患者(AD组)和150例正常老年人(正常对照组)为研究对象,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测5-HT1AC(-1019)G多态性。结果:老年抑郁症组5-HT1A(-1019)C/G基因型(39.6%)、G/G基因型频率(24.5%)、G等位基因频率(44.3%)均高于正常对照组(分别为35.3%、13.3%、31.0%),差异有统计学意义(χ2分别为7.954 9、9.515 7,均P<0.05)。伴有抑郁症状的AD组5-HT1A(-1019)G等位基因频率(41.0%)高于正常对照组(31.0%),差异有统计学意义(χ2=4.287 9,P<0.05),基因型分布频率差异无统计学意义(χ2=3.650 6,P>0.05)。老年抑郁症组5-HT1A(-1019)G等位基因及各基因型分布频率与AD组的差异均无统计学意义(χ2值分别为0.365 6、0.395 7,均P>0.05)。结论:5-HT1A受体C(-1019)G基因多态性可能在老年抑郁症及伴有抑郁症状的AD患者的发病中起一定作用,G等位基因可能是其风险因子之一。

运动和应激对海马5-羟色胺及其受体影响

目的通过观察体力运动和慢性应激对海马5-羟色胺(5-HT)水平及5-HT1A受体mRNA表达的影响,探讨运动减缓应激性海马损伤作用在海马5-HT系统水平的可能机制。方法将24只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、运动组、应激组和运动+应激组。用高效液相-电化学检测法测定海马5-HT水平,实时-荧光定量PCR法检测海马5-HT1A受体mRNA的表达。结果与对照组比较,运动组海马5-HT水平显著升高(P<0.01),而应激组海马5-HT水平明显降低(P<0.01);与单纯应激组比较,运动+应激组5-HT水平略高于应激组,但差异无统计学意义(P>0.05)。运动组和应激组的5-HT1A受体mRNA相对表达量分别是对照组的(4.49±1.59),(0.22±0.06)倍,且与对照比较差异有统计学意义(P<0.01)。运动+应激组5-HT1A受体mRNA相对表达量是对照组的(0.87±1.22)倍,显著高于单纯应激组(P<0.05)。结论运动可能是通过提高海马5-HT水平和5-HT1A受体表达来改善海马5-HT系统功能,发挥减缓慢性应激性海马损伤的作用,而且5-HT1A受体表达的上调在此效应中作用更为明显。