六味地黄丸对老年大鼠行为学的影响及对海马CA1区、CA3区和S1Tr神经元的保护作用

目的观察六味地黄丸对老年大鼠行为学的影响及对海马CA1区、CA3区和S1Tr神经元的保护作用。方法将清洁级雄性SD大鼠分为青年对照组(3月龄)、老年对照组(24月龄)和老年用药组(24月龄),通过Morris水迷宫实验,观察其行为学变化,并通过尼氏染色光镜检测,观察大鼠海马CA1区、CA3区及大脑皮质初级躯体感觉皮质区(S1Tr)脑组织细胞数量变化。结果老年用药组平均逃避潜伏期自第三天起较老年对照组明显缩短,有极显著性差异(P<0.01)。老年用药组锥体细胞轮廓清晰,形态完整,细胞排列紧密,可见少许突起,其细胞数量明显增多,与老年对照组相比,有极显著性差异(P<0.01)。结论六味地黄丸可以改善自然衰老大鼠空间学习记忆能力,机制可能与其保护海马CA1区、CA3区及S1Tr神经元有关。

全脑缺血大鼠海马CA1、CA3区神经元凋亡和氟碳乳剂保护作用的研究

目的:通过观察全脑缺血再灌注时大鼠海马CA1、CA3区神经元凋亡细胞数量的变化,探讨大鼠CA1、CA3区对缺血耐受性及氟碳乳剂的脑保护作用。方法:90只SD健康雄性大鼠随机分为3组,假手术组,平衡盐对照组和氟碳乳剂治疗组,TUNEL法检测神经元凋亡。结果:CA3与CA1区相比,凋亡细胞数量明显减少;平衡盐对照组和氟碳乳剂治疗组相比,神经元凋亡明显减少。结论:CA3区与CA1区相比,CA1区对缺血缺氧更为敏感;同时氟碳乳剂能有效治疗脑缺血再灌注损伤,阻止神经元凋亡的发生。

NMDA受体NR1、NR2A/B在丘脑前核-海马CA1、CA3脑区和齿状回的分布与表达

目的探讨NMDA受体NR1、NR2A/B在丘脑前核-海马CA1、CA3脑区和齿状回的分布与表达,以及丘脑前核-海马神经元的学习记忆功能及作用机制。方法运用原位杂交检测技术观测丘脑前核及海马CA1、CA3和齿状回内NMDA受体NR1、NR2A及NR2B mRNA的分布特点。结果①原位杂交阳性产物呈棕黄色,主要分布在神经元的胞浆中,胞核基本不着色。②在丘脑前核,阳性神经元分布较密集,细胞形态较一致。③在海马锥体层阳性神经元分布较多,呈带状。在分子层、多形层分布少。④NR1、NR2A/B在丘脑前核和海马CA1、CA3脑区及齿状回均有表达,其中NR1在齿状回表达水平最强,NR2B在丘脑前核、海马CA1、CA3和齿状回表达水平基本相同。结论在丘脑前核-海马的局部神经元环路中NMDA受体NR1、NR2A及NR2B mRNA分布广泛。其中NR2B mRNA在丘脑前核和海马CA1、CA3脑区及齿状回表达水平基本相同,可能与此环路学习记忆有关。

多次化学性缺氧对大鼠海马CA_1区神经元凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的研究不同间隔时间多次化学性缺氧对大鼠海马CA1区神经元凋亡及Bcl2蛋白表达的影响。方法应用原位末端标记技术及免疫组化技术,观察分析对照组(A组)、3硝基丙酸(3NPA)连续给药组(B组)、3NPA间隔给药组(C组)大鼠海马CA1区神经元凋亡及Bcl2蛋白表达情况。结果(1)大鼠海马CA1区神经元凋亡B组较A、C组有显著增加(均P<0.05),而A组与C组比较差异无显著性(P>0.05);(2)Bcl2蛋白免疫反应强度C组较A、B组增强非常显著(均P<0.001),而A组与B组比较差异无显著性(P>0.05)。结论连续多次应用小剂量3NPA可使大鼠海马CA1区神经元凋亡明显增加,间隔多次应用小剂量3NPA对神经元有保护作用。

人脑出血后海马神经元损伤与Caspase-3的关系

目的 研究人脑出血后海马神经元损伤与凋亡促进因子Caspase- 3之间的关系。方法 选取10例因脑出血而死亡的尸检脑标本,应用HE染色,Caspase- 3免疫组织化学染色和Caspase- 3m RNA原位杂交,观察脑出血时海马CA1 区神经元损伤变化与Caspase- 3表达之间的关系。结果 海马CA1 区,出血5 h可检测Caspase- 3免疫组化染色的阳性细胞(10 .4个/高倍视野) ,2 2～4 8h时达高峰(2 1.7～2 4 .3个/高倍视野)。Caspase- 3m RNA原位杂交阳性表达始于5 h(6 .75个/高倍视野) ,2 4 h达高峰(14 .6 0～18.30个/高倍视野) ;二者均在72 h后呈明显下降趋势。出血2 4 h,可检测到TUNEL阳性细胞,持续至72 h。Caspase- 3m RNA与Caspase- 3呈正相关,相关系数为0 .717(P<0 .0 5 )。4～16 h受损神经元形态基本正常,2 4～4 8h细胞凋亡特征明显,72 h后,几乎所有神经元形态呈现严重病理变化。结论 人脑出血后海马神经元发生一系列形态学变化,其演变规律与凋亡促进因子Caspase- 3有密切相关性。

麦角甾醇预处理对丙泊酚麻醉大鼠海马CA1区神经元损伤的影响

目的探讨麦角甾醇对丙泊酚麻醉大鼠海马CA1区神经元的保护作用及机制。方法将45只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、丙泊酚组和丙泊酚+麦角甾醇组,每组15只。对照组大鼠腹腔注射100 mg/kg脂肪乳溶剂;丙泊酚组大鼠先腹腔注射50 mg/kg丙泊酚,待翻正反射恢复后再次注射50 mg/kg丙泊酚;丙泊酚+麦角甾醇组大鼠腹腔注射30 mg/kg麦角甾醇,随后给予丙泊酚注射(方法同上),均连续注射7 d。末次注射后大鼠均清醒2 h。采用透射电镜观察大鼠海马CA1区神经元的超微结构;采用HE染色、TUNEL和NeuN染色、免疫组化染色分别检测大鼠海马CA1区神经元的形态学变化、凋亡、突触后密度蛋白95(PSD95)的表达;采用Western blotting法检测大鼠海马CA1区凋亡相关蛋白和磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路蛋白的表达。结果透射电镜、HE染色结果显示丙泊酚+麦角甾醇组大鼠海马CA1区神经元损伤程度较丙泊酚组减轻。与对照组比较,丙泊酚组大鼠海马CA1区神经元凋亡率升高,活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、Bax蛋白的表达升高,Bcl-2蛋白、PSD95的表达降低,凋亡诱导因子(AIF)、细胞色素C(Cyt-C)蛋白的表达升高,而Sirt1蛋白表达、磷酸化(p)-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与丙泊酚组比较,丙泊酚+麦角甾醇组大鼠海马CA1区神经元凋亡率降低[(27.33±1.37)%vs.(17.47±0.87)%],差异有统计学意义(P<0.05)。与丙泊酚组比较,丙泊酚+麦角甾醇组大鼠海马CA1区活化Caspase 3、Bax蛋白的表达降低,Bcl-2蛋白、PSD95的表达升高,AIF、Cyt-C蛋白的表达降低,而Sirt1蛋白表达、p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt值升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论麦角甾醇预处理可抑制丙泊酚诱导的海马CA1区神经元凋亡并减轻神经元损伤,其机制可能由PI3K-Akt信号通路介导。

白松片对抑郁模型大鼠海马脑源性神经营养因子和酪氨酸激酶B表达的影响

目的采用慢性应激复制抑郁大鼠模型,观测白松片对抑郁模型大鼠海马BDNF、TrkB表达的影响,探讨白松片的抗抑郁作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、白松片组、氟西汀组,采用连续21d慢性轻度不可预见性应激配合孤养复制抑郁模型。运用免疫组化方法研究白松片对抑郁模型大鼠海马CA1、CA3区锥体细胞和齿状回颗粒细胞BDNF、TrkB蛋白表达的影响。结果与正常组相比,模型组大鼠海马CA1、CA3区和齿状回BDNF、TrkB免疫反应阳性神经元平均灰度值上升,分别为107. 73±3. 43、119. 40±6. 36、109. 20±4. 65;与模型组相比,白松片组大鼠海马CA1、CA3区和齿状回BDNF、TrkB免疫反应阳性神经元平均灰度值下降,分别为105. 80±3. 32、109. 87±4. 82、105. 00±2. 56。结论白松片增加抑郁模型大鼠海马BDNF、TrkB的表达,可能是其抗抑郁作用的分子机制之一。

吗啡条件性位置偏爱与海马一氧化氮合酶的关系

目的探讨吗啡条件性位置偏爱(CPP)小鼠海马不同亚区神经元一氧化氮合酶(NOS)的变化。方法采用NADPH d组织化学法显示海马NOS的变化。结果吗啡组海马齿状回NOS阳性神经元数目(27. 88±14. 20)明显多于盐水组(7. 00±3. 12) (P<0. 01),而CA1区和CA3区无明显变化(P>0. 05)。结论海马神经元NOS的表达增多与吗啡精神依赖的形成有关。

亚低温对惊厥性脑损伤神经的保护作用

目的 研究亚低温对惊厥性脑损伤是否具有保护作用。方法 制作毛果芸香碱惊厥持续状态动物模型 ,给予亚低温干预 ,检测海马区神经元坏死、凋亡、凋亡蛋白表达和胶质细胞增生变化情况。结果 毛果芸香碱惊厥持续状态模型鼠病理损伤特点为神经元坏死、细胞凋亡、凋亡蛋白表达增多 ,胶质细胞增生。亚低温可减少海马区细胞坏死 :CA3区坏死细胞由 (72 .1± 1 3.4 ) %降至 (1 7.0± 6 .8) %(P <0 .0 5 ) ;减少细胞凋亡 :CA1区单位面积凋亡细胞数由 9.4± 6 .2降至 1 .0± 0 .7(P <0 .0 5 ) ;减少凋亡蛋白表达 :单位面积caspase - 3阳性面积由 1 .4 9± 0 .2 5降至 0 .6 0± 0 .1 2 (P <0 .0 5 ) ;缓解胶质细胞增生 :单位面积胶质细胞数由 4 7.3± 2 .6降至 1 4 .3±4 .4 (P <0 .0 5 )。结论 亚低温对幼鼠惊厥性神经变性具有保护作用。