龙首参葛丸对血管性痴呆大鼠海马CA1区组织结构变化的影响

目的:观察龙首参葛丸对血管性痴呆大鼠海马CA1区组织结构变化的影响。方法:采用改良2-VO法复制血管性痴呆模型大鼠60只,分为正常组、阳性对照组(NS,10 mL/kg),脑复康组(0.8 g/kg),龙首参葛丸低剂量(1.5g/kg)组、中剂量(3g/kg)组、高剂量(6g/kg)组,每组10只。经口灌胃等体积给药,10mL/kg动物体质量,1次/日。在大鼠造模前及造模后第38天、39天、40天进行跳台试验,对大鼠进行学习记忆能力的评估。大鼠于第41天给予10%水合氯醛麻醉迅速断头取脑,取视交叉后4 mm与小脑前之间的部分,经4%多聚甲醛浸置后,制作成厚约5μm的冠状切片,HE染色后镜下观察海马CA1区组织结构变化。结果:跳台试验显示:龙首参葛丸低、中、高剂量组及脑复康组与阳性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),说明龙首参葛丸和脑复康都有改善大鼠学习记忆功能的作用,但龙首参葛丸高剂量组相较脑复康组作用更加明显(P<0.05);镜下染色观察:龙首葛根组与脑复康组、阳性对照组比较,大鼠海马区CA1区尼氏体(虎斑样结构)体积大、数量多,且分布较均匀,发生尼氏体溶解的细胞数量也较少。结论:龙首参葛丸可促进神经元内蛋白质合成,减少神经元损伤,促进神经元修复,对血管性痴呆具有治疗和保护作用。

银杏酮酯对抑郁症大鼠的治疗作用及其对海马CA1区组织5-HT1AR/cAMP/PKA通路的调控机制

【目的】观察银杏酮酯对抑郁症大鼠的作用,并探讨其对海马CA1区组织5-羟色胺受体(5-hydroxytryptamine receptor,5-HT1AR)/环腺苷酸(cyclic adenosine mono-phosphate,c AMP)/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)通路的调控作用。【方法】取50只SD大鼠随机分为A组、B组、C组、P组和M组,各10只;另取10只正常SD大鼠记为N组。A、B、C、P和M组建模,同时A、B和C组分别给予35、70、140 mg/kg银杏酮酯灌服,P组给予10 mg/kg氟西汀灌服,N组和M组均给予等体积蒸馏水灌服,各组均1次/d,持续3周。对比各组体质量变化;糖水偏爱实验和强迫游泳实验评价干预前后抑郁样行为学改变;ELISA检测干预前后血清5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)含量,竞争法检测干预后大脑皮质组织5-HT含量;q RT-PCR检测海马CA1区组织5-HT1AR、c AMP反应元件结合蛋白(c AMP responsive element binding,CREB)、PKA m RNA表达;免疫组化法检测海马CA1区组织5-HT1AR、CREB、PKA蛋白表达并对比其光密度值(D),125碘(125I)标记放免法检测海马CA1区组织c AMP的含量。【结果】体质量、糖水偏爱实验、血清5-HT干预前后差值对比,M组均高于N组(P<0.05),P组和银杏酮酯3剂量组均低于M组(P<0.05),P组、B组和C组均低于A组(P<0.05),C组均低于P组、B组(P<0.05);强迫游泳不动时间干预前后差值对比,M组远长于N组(P<0.05),P组和银杏酮酯3剂量组均短于M组(P<0.05),P组、B组和C组均短于A组(P<0.05),C组短于P组、B组(P<0.05);干预后大脑皮质5-HT含量对比,M组低于N组(P<0.05),P组和银杏酮酯3剂量组均高于M组(P<0.05),P组、B组和C组均高于A组(P<0.05),C组高于P组、B组(P<0.05);各组海马CA1区组织5-HT1AR、CREB、PKA m RNA及蛋白表达、c AMP含量对比,M组上述指标均显著低于N组(P<0.05),A、B、C组和P组均显著高于M组(P<0.05),且银杏酮酯的作用均呈剂量依赖性。【结论】银杏酮酯可控制抑郁症大鼠的体质量下降,减轻抑郁样行为,改善血清和大脑皮质5-HT含量,推测该药物与氟西汀均可能通过调整5-HT1AR/c AMP/PKA通路,上调海马CA1区组织5-HT1AR、CREB、PKA m RNA及蛋白表达、增加c AMP含量实现抗抑郁作用,且银杏酮酯的抗抑郁作用呈剂量依赖性。

抑郁诱导过程中腹腔注射CORM-2大鼠的抑郁症状、海马神经元活性、脑组织炎性因子基因表达观察

目的目的观察抑郁诱导过程中,腹腔注射一氧化碳释放分子2(CORM-2)对诱导大鼠的抑郁症状、海马神经元活性及脑组织炎性因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化的影响,并探讨其可能作用机制.方法SPF级健康雄性SD大鼠48只,随机分为CO干预组、生理盐水组、诱导组、正常组,每组12只.CO干预组、生理盐水组、诱导组大鼠每天选择禁食、45°笼倾斜、冰水游泳、束缚活动等慢性刺激中的1~2种,连续进行抑郁诱导21 d诱导.CO干预组、生理盐水组分别在诱导前1天腹腔注射CORM-2及生理盐水10 mg/kg,后每7天腹腔注射1次,至诱导第21天共注射3次.正常组大鼠饲养于正常标准条件下不作任何处理.分别于诱导前、诱导第21天观察各组大鼠一般情况(体质量、食量、饮水量),诱导第21天采用糖水偏好实验评估各组大鼠快感缺失程度,旷场实验观察大鼠行为能力.诱导第21天各组随机选取5只大鼠,处死后取脑组织海马组织,尼氏染色后观察海马组织CA1区神经元活性.诱导第21天时取各组剩余大鼠,处死后取脑组织(包含海马组织),实时荧光定量PCR法检测脑组织IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-αmRNA.结果与正常组比较,诱导组、生理盐水组和CO干预组大鼠体质量、食量和饮水量均降低(P均<0.05);与诱导组和生理盐水组比较,CO干预组大鼠体质量、食量和饮水量均增加P均<0.05).与正常组比较,诱导组、生理盐水组和CO干预组大鼠糖水偏好率、水平活动格数和垂直活动次数均降低(P均<0.05);与诱导组和生理盐水组比较,CO干预组大鼠糖水偏好率、水平活动格数和垂直活动次数均升高(P均<0.05);CO干预组、生理盐水组、诱导组及正常组大鼠海马组织CA1区神经元存活率分别为61.7%±9.0%、50.8%±9.3%、50.4%±8.2%、72.1%±12.1%,与正常组比较,诱导组、生理盐水组和CO干预组海马组织CA1区神经元存活率降低(P均<0.05),与诱导组、生理盐水组比较,CO干预组海马组织CA1区神经元存活率升高(P均<0.05).与正常组比较,诱导组、生理盐水组和CO干预组大鼠脑组织中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-αmRNA相对表达量均升高(P均<0.05);与诱导组和生理盐水组比较,CO干预组大鼠脑组织中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-αmRNA相对表达量均降低(P均<0.05).结果抑郁诱导过程中腹腔注射CORM-2诱导大鼠的抑郁症状改善,海马组织CA1区神经元活力更高,脑组织炎性因子表达降低.CORM-2可通过减少大鼠海马组织神经元损伤,降低脑组织IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达等途径改善抑郁诱导大鼠的抑郁症状.