2023年渤海海峡、渤海湾市售海鱼异尖线虫感染情况及形态学分析

目的了解渤海海峡、渤海湾市售海鱼异尖线虫感染情况,并对检出的异尖线虫进行形态学分析及属间鉴定,为防控措施制定提供参考。方法2023年春季和冬季采购渤海海峡、渤海湾沿海市售海鱼,检测海鱼异尖线虫感染情况,分析不同鱼群的感染差异及异尖线虫寄生部位等,并对异尖线虫进行形态学鉴定。结果调查共检测渤海湾海鱼7种91尾,未检出异尖线虫;渤海海峡海鱼21种210尾,其中11种48尾海鱼检测出异尖线虫,总检出率为22.86%,共检出异尖线虫1370条,平均感染强度为28.54条/尾。检出率前三的鱼种分别为鮟鱇(100.00%,14/14)、带鱼(100.00%,10/10)和辫子鱼(80.00%,8/10);感染强度前三的鱼种为鮟鱇(69.00条/尾)、带鱼(24.70条/尾)和海鲫鱼(19.00条/尾)。异尖线虫在鱼体的主要寄生部位为肠道、肠系膜、腹腔等,泄殖腔中未发现感染。相关性分析表明,鮟鱇和带鱼的体质量与异尖线虫感染强度均呈正相关(r=0.77、0.67,P均<0.01)。检获完整虫体1226条,经形态学鉴定,其中异尖属767条,宫脂属459条。结论渤海湾海鱼未检出异尖线虫,渤海海峡海鱼异尖线虫感染较重,且主要为具有致病性的异尖属和宫脂属线虫,建议加强当地异尖线虫病健康教育,以降低人群感染风险。

海鱼中海洋神经毒素污染特征及暴露风险评估

目的调查我国南海区域典型海洋神经毒素主要污染的海鱼品种及污染水平,为污染分布、暴露评估提供技术手段。方法采用固相萃取结合超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)对海鱼样品中的石房蛤毒素(saxitoxin,STX)、新石房蛤毒素(neosaxitoxin,NEO)、膝沟藻毒素(gonyautoxin,GTX-1、GTX-4、GTX-5)、N-磺酰氨甲酰基类毒素(N-sulfocarbamoyltoxins,C1、C2)、脱氨甲酰石房蛤毒素(decarbamoylsaxitox,dcSTX)、脱氧脱氨甲酰基新石房蛤毒素(decarbamoylneosaxitoxin,dcNEO)、脱氧脱氨甲酰基膝沟藻毒素(decarbamoylgonyautoxin-2&3,dcGTX2、dcGTX 3)、河豚毒素(tetrodotoxins,TTX)12种海洋神经毒素进行测定,外标法定量。结果在1.2~50.0μg/kg浓度范围内,12种海洋神经毒素呈良好的线性关系(R^(2)≥0.9990),48种海鱼样本中,有13种检出海洋神经毒素,各省份平均暴露水平均在安全范围内,提示了潜在的急性暴露风险。结论建立了海产品中多种海洋神经毒素的UPLC-MS/MS痕量检测技术并将其应用于南海海域的毒素污染特征及暴露风险评估,为海鱼中海洋神经毒素的检测和控制提供了技术支撑和理论依据。

深海鱼蛋白水溶肥在温室草莓上的应用效果评价

目前,我国草莓生产普遍进行栽后追施化肥供给养分,但化学肥料往往施用量过多,导致土壤盐分浓度过高、土壤板结,影响草莓产量和品质提升。鱼蛋白水溶肥是近几年异军突起的纯天然的肥料,在各种经济作物的种植中既可以用作基肥,追肥、也可以灌根、滴灌、冲施叶面喷雾。笔者于2020年冬至2021年春在日光温室草莓栽培中进行了施用新型深海鱼蛋白水溶肥对比试验,观测新型深海鱼蛋白水溶肥在草莓上施用后的长势、产量和品质。结果表明,使用鱼蛋白水溶肥不仅可以促进温室草莓生产苗根系发达,提高光合作用,促进草莓生长,有利于花芽分化,草莓叶片翠绿发亮,病害减少,果型好,提早成熟5天左右,而且草莓品质大大改善,甜度提高1度以上,适口性好,产量提高18%,亩增收8000多元。结论:合理施用深海鱼蛋白水溶肥可使草莓植株生长明显健壮,增加产量,提高果实品质,促进草莓提早开花结果,提早上市,并且增强果实硬度,有利于保鲜运储,具有良好的推广应用前景。

深海鱼皮胶原低聚肽粉对肝癌HepG-2细胞凋亡的影响

[目的]探讨深海鱼皮胶原低聚肽粉对肝癌HepG-2细胞凋亡的影响.[方法]采用MTT法检测不同质量浓度深海鱼皮胶原低聚肽粉对肝癌HepG-2细胞增殖的影响;应用HE染色法观察不同质量浓度深海鱼皮胶原低聚肽粉对肝癌HepG-2细胞形态的影响;采用Annexin/PI双染法检测深海鱼皮胶原低聚肽粉对肝癌HepG-2细胞凋亡的影响;采用PI单染法检测深海鱼皮胶原低聚肽粉对肝癌HepG-2细胞周期的影响.[结果]MTT法检测结果显示,深海鱼皮胶原低聚肽粉呈时间和剂量依赖性地抑制肝癌HepG-2细胞的增殖(P<0.01),当药物质量浓度为40 g/L、作用时间为48 h时HepG-2细胞抑制率为49.93%,接近半数抑制质量浓度.HE染色结果显示,与对照组比较,深海鱼皮胶原低聚肽粉各剂量组肝癌HepG-2细胞间距增大、细胞核固缩、细胞膜皱缩,呈现典型的凋亡形态,且随着剂量的增加凋亡现象更为显著.Annexin/PI双染法检测结果显示,与对照组比较,深海鱼皮胶原低聚肽粉各剂量组细胞凋亡率均显著升高(P<0.05,P<0.01).PI单染检测结果显示,深海鱼皮胶原低聚肽粉可使肝癌HepG-2细胞阻滞在S期.[结论]深海鱼皮胶原低聚肽粉可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,其作用机制认为可能与细胞周期阻滞有关系.

汞离子印迹固相萃取在海鱼中汞形态分析检测中的应用

目的建立汞离子印迹固相萃取-电感耦合质谱法(ICP-MS)对海鱼肉中汞形态分析方法。方法将海鱼样品去骨粉碎,鱼肉样品经5 mol·L^(-1)HCl水浴超声提取,提取液经离心后调节pH值至7.0±0.5,经汞离子印迹柱萃取,通过10mL 1 mol·L^(-1)HCl进行洗脱,将洗脱液微波消解后,用ICP-MS进行测定,得到海鱼鱼肉中无机汞的含量;再另取海鱼样品微波消解,采用电感耦合质谱法测得海鱼中总汞含量;通过总汞含量与无机汞含量相减,得到海鱼肉中有机汞含量(以汞计),并进行加标回收实验。结论该方法操作简单,灵敏度高,重现性好,适用于海鱼肉中汞(无机汞、有机汞)的定量检测。

快速溶剂萃取-GC-MS法测定海鱼中的9种多氯联苯

建立了GC-MS技术同时测定海鱼中9种多氯联苯:PCB28,PCB52,PCB101,PCB138,PCB153,PCB180,PCB194,PCB206的分析方法,新鲜的海鱼经冷冻干燥后,然后研磨成细小颗粒,装入快速溶剂萃取仪中,使用正己烷-丙酮(体积比1∶1)溶剂萃取,经过干燥、浓缩后,加入定量内标,经HP-5MS色谱柱分离,在质谱Sim模式进行检测,内标法定量。分析数据结果表明,9种多氯联苯在10.0~200μg/L范围内线性关系良好,相关系数(R)大于0.998;检出限为0.42~1.05μg/kg;精密度:1.48%~12.6%;正确度:63.4%~101%。该法稳定、准确、快速,能够满足海鱼中痕量多氯联苯的测定。

海鱼中的特别营养成分和海鱼菜肴的开发

鱼类特别是海鱼的肝油和体油中,含有丰富的甘二碳六烯酸和甘碳五烯酸,前者是人大脑脂肪中的主要成分,对于脑细胞、特别是脑的神经传导和突触的生长发育有重要作用.后者对降低血脂,防治心脑血管疾病具有优异的功能.因而改变食物中的水产品尤其是海鱼类的比重,对提高人的智力水平,增进人的健康和延缓衰老,都有十分重要的意义.与此同时,如何开发以海鱼为主要原料的菜肴,也就成为当前烹饪行业中的一个重要课题.

海鱼鱼鳔资源利用研究

就海鱼鱼鳔的功能结构、营养与药用价值、食用和药用加工利用等现状进行了研究,并对海鱼鱼鳔资源的加工利用发展方向进行了探讨。

5种海鱼挥发性风味成分分析

采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术,对黄鱼、鳗鱼、鳕鱼、鲳鱼、马鲛鱼等5种海鱼进行挥发性成分分析。研究结果表明:在黄鱼、鳗鱼、鳕鱼、鲳鱼、马鲛鱼中分别鉴定出45、41、62、53、39种挥发性成分,其中5种鱼类样品中均被检出的成分有1-戊烯-3-醇、1-辛烯-3-醇、戊醛、已醛和4-庚烯醛。

汕头市售海鱼简单异尖线虫幼虫感染现况调查

目的 了解汕头市售海鱼简单异尖线虫（Anisakis simplex）幼虫感染情况。 方法 于2013年2-12月随机采集市售海鱼，鉴定鱼种后，解剖镜下分离海鱼内脏和肌肉内的异尖线虫幼虫，光学显微镜下鉴定虫种。统计不同鱼种、不同脏器和不同体重海鱼的简单异尖线虫幼虫感染情况。 结果 共解剖海鱼52种382尾，鱼种的简单异尖线虫幼虫感染率为80.8%（42/52），海鱼总感染率为47.4%（181/382），平均感染度为5.5条/尾（995/181），简单异尖线虫幼虫活虫率为100%（995/995）。其中，花腹鲭（4/4）、日本竹荚鱼（9/9）、蓝圆鲹（8/8）、黄笛鲷（9/9）、白姑鱼（4/4）、黄姑鱼（4/4）、深水金线鱼（12/12）、大头狗母鱼（7/7）和眼镜鱼（9/9）等9种海鱼均全部感染简单异尖线虫幼虫，其他依次是鲐鱼（16/18）、奥氏笛鲷（6/7）和焦黄笛鲷（5/6）；大甲鲹、孟加拉笛鲷、金焰笛鲷、澳洲刺鲷、黄鳍刺鲷、黑胡椒鲷、黄牙鲷、刺鲳、金钱鱼和黄尾鰤等10种海鱼未检出该幼虫。简单异尖线虫幼虫感染度较高的有焦黄笛鲷（21.0条/尾）、大头狗母鱼（16.7条/尾）、长条蛇鲻（14.0条/尾）和眼镜鱼（10.1条/尾）；感染度较低的有金带花鲭、高体水若鲹、游鳍叶鲹、勒氏笛鲷、花尾胡椒鲷、长尾大眼鲷、银方头鱼、白方头鱼、油魣、乌鲳、狮鼻鲳鲹、褐篮子鱼和蓝猪齿鱼，均小于2条/尾。脏器中肠系膜的感染率最高，为34.3%（131/382）；胃幽门盲囊的感染度最高，为3.5条/尾；肌肉中未检出该幼虫。体重100-200 g海鱼的感染率最高，为60.2%（74/123）；体重301-400 g海鱼的感染度最高，为7.8条/尾。 结论 汕头市售海鱼感染简单异尖线虫幼虫情况较严重。

舟山渔场三种海鱼冰藏过程中品质和风味的变化

研究了鲐鱼、棘头梅童鱼和龙头鱼在冰藏过程中品质与风味的变化。随着冰藏时间的增加,3种海鱼菌落总数、挥发性盐基氮值、硫代巴比妥酸值均不断升高,其中鲐鱼的增长速度最快,而龙头鱼的增长速度最慢。气味评分与上述指标变化趋势完全相反,冰藏8 d,3种海鱼气味评分均低于60,表明贮藏3 d,鱼样整体气味已不可接受。3种海鱼的pH随冰藏时间增加呈“先降后升”的趋势,且在同等时间下,存在pH(鲐鱼)<pH(棘头梅童鱼)<pH(龙头鱼)的规律。采用GC-MS分析从3种海鱼中检出了32种挥发物,筛选确定了异戊醛等15种气味活性物质。综合主成分分析结果,筛选得到己醛和1-辛烯-3-醇为表征海鱼“新鲜”的特征性挥发物,异戊醛、戊醛、壬醛、苯乙烯、三甲胺和二甲基三硫为表征海鱼“劣变”的特征性挥发物。

干制海鱼的辐照杀菌剂量的确定

研究了γ射线辐照干制黄线鱼、马步鱼、蓝鳕鱼的杀菌效果及其对海鱼蛋白质、脂肪、微量元素、重金属、水分和灰分含量的影响。结果表明：干制海鱼的辐照灭菌效果明显，在2．55～13．65kGy范围内，3kGy可以使菌落总数降至10^4cfu／g以下；致病菌未检出；5kGy可以将大肠菌群降至30MPN／100g以下，符合动物性水产干制品国家卫生标准。辐照后干制海鱼中的蛋白质含量高于对照。但经统计分析，辐照前后蛋白质与脂肪的含量均没有显著差异。辐照剂量为10．4kGv以上时，尽管干制海鱼中的水分含量略微降低，部分微量元素的含量有所增加，但微量元素、污染物、水分及灰分含量总体没有显著影响。综合试验结果，确定干制海产品辐照杀菌的适宜剂量范围为5～10kGy。

5种海鱼脑AChE对2种有机磷农药的敏感性比较

以鲈鱼、黄鱼、美国红鱼、真鲷和黑鲷为实验材料,采用半抑制浓度(IC_(50))和双分子速率常数(K_i)为指标,通过体外抑制作用比较了5种海鱼脑乙酰胆碱酯酶[AChE(EC 3.1.1.7)]对马拉硫磷和甲基对硫磷的敏感性。结果表明:(1)5种海鱼脑AChE基础活性为10.18～22.64[μmol/(min·g)],黄鱼的酶活性最高,鲈鱼的酶活性最低。(2)对马拉硫磷,由IC_(50)所得到的AChE敏感性为:黄鱼、鲈鱼、真鲷>黑鲷>美国红鱼;由K_i所得到的AChE敏感性为:鲈鱼、黄鱼、真鲷>黑鲷>美国红鱼。对甲基对硫磷,由IC_(50)所得到的AChE敏感性为:鲈鱼>黄鱼、真鲷、黑鲷>美国红鱼;由K_i所得到的AChE敏感性为:鲈鱼、黄鱼、黑鲷>真鲷>美国红鱼。鲈鱼和黄鱼对2种有机磷农药都较为敏感。(3)鱼脑AChE活力抑制作用与水体中的有机磷农药具有良好的剂量—效应关系。在1～100mg/L浓度范围内,两者间呈现较好的线性相关性,其相关系数基本上都在0.98以上。根据AChE的敏感性及其对有机磷农药的线性响应程度,黄鱼和鲈鱼脑AChE分别适于作为监测马拉硫磷和甲基对硫磷的指示酶。

进境海鱼异尖线虫幼虫感染情况调查

对来自15个国家和地区的78批次、31种、共255尾海鱼进行了异尖线虫幼虫的检验,100尾海鱼检出异尖线虫幼虫感染,总感染率为39.2%(100/255)。16种海鱼检出异尖线虫幼虫,占所检鱼种的51.6%(16/31)。共检获异尖线虫幼虫1 554条,平均感染强度为15.5条/尾。在体重≤100 g的海鱼中感染率最高,在体重为300 g^400 g的海鱼中感染强度最大。检出部位主要是胃及胃盲囊表面、肠、肠盲囊及肠系膜。来自越南、新加坡、韩国的海鱼检出率较高,超过50%,来自秘鲁等7个国家的海鱼中未检出异尖线虫幼虫。

5种海鱼的生态生长效率研究

在常温下进行星鳗（Ａｓｔｒｏｃｏｎｇｅｒｍｙｒｉａｓｔｅｒ）、 （Ｐｌａｔｙｃｅｐｈａｌｕｓ ｉｎｄｉｃｕｓ）、黑鳗 （Ｓｐａｒｕｓ ｍａｃｒｏｃｅｐｈａｌｕｓ）、厚头平（Ｓｅｂａｓｔｅｓ ｐａｃｈｙｃｅｐｈａｌｕｓ）和皱唇鲨（Ｔｒｉａｋｉｓ ｓｃｙｌｌｉｕｍ） 等五种鱼类的生长实验，得出这５种鱼类摄食巢沙蚕、火枪乌贼、斑 （碎块）、带鱼 （碎块）和玉筋鱼的生态生长效率波动于３．８～３３．６％范围内，平均为１６．０％，相对 平均日摄食量处于１．６～１１．５％之间，另外，对饵料系数、平均日摄食量及平均体 重日增长量进行了探讨。

全自动固相萃取/高效液相色谱-串联质谱法(HP-LC-MS/MS)测定深海鱼中雪卡毒素残留量

建立了深海鱼鱼肉中雪卡毒素残留的高效液相色谱-串联质谱检测方法。虎鳗等样品经甲醇-正己烷(4∶1)提取,HLB柱净化后,采用高效液相色谱-串联质谱分析,外标法定量。质谱分析采用电喷雾电离,正离子扫描,多反应监测模式。定性离子对为m/z 1 128.9/1 057.6、1 128.9/1 039.9、1 128.9/1 075.8。实验结果表明,HLB柱净化后基质效应明显降低,样品中添加0.01～0.1μg/kg的雪卡毒素,其回收率为70%～84%,相对标准偏差(n=6)小于7%;雪卡毒素的检出限为0.01μg/kg,定量下限为0.02μg/kg。该方法样品前处理简单、分析时间短、灵敏、可靠,适用于深海鱼中雪卡毒素含量的检测。

基于微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定深海鱼肌肉中12种元素

为了建立同时测定深海鱼中硼(B)、铝(Al)、铬(Cr)、锰(Mn)、镍(Ni)、铜(Cu)、锌(Zn)、锡(Sn)、镉(Cd)、汞(Hg)、硒(Se)、铅(Pb)12种元素含量的方法,采用HNO3-H2O2-H2O消解体系,样品经微波消解,然后利用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定上述元素。在碰撞模式下(KED),以内标法改善基体效应及干扰。结果表明,各元素检出限低,线性关系良好,相关系数(r)在0.9991~1.0000(Hg为0.9921),检出限为0.00074~2.2μg/kg,定量限为0.0025~7.1μg/kg。用该方法对生物标准物质扇贝(GBW10024)进行测定,测定结果均在证书的不确定度范围以内,对带鱼样品进行加标回收率实验,加标回收率在81.8%~110.0%之间。通过对市场上销售的不同深海鱼进行检测分析发现,受检样品安全风险较低,4种必需微量元素含量高低顺序为Zn>Se>Cu>Cr,其中Zn含量范围为3.72~22.1 mg/kg,Se含量范围为0.162~0.391 mg/kg,Cu含量范围为0.095~0.334 mg/kg,Cr含量范围为0.003~0.054 mg/kg。该方法准确可靠,灵敏度高,适合鱼肉中多元素含量的测定,为鱼肉的质量控制提供技术支持;带鱼、大黄花鱼富含微量元素Zn,小黄花鱼富含Se,是孕妇和乳母等特殊群体比较好的食物来源。

中国某海域海鱼弧菌致病性研究

目的 :研究从中国某海域海水中分离出的海鱼弧菌的致病性。方法 :分为①毒力实验组 :35只二级昆白小鼠随机分为 4组 ,②伤口感染实验组 :35只SPF小鼠 ,腿部致伤后随机分为 4组 ;观察小鼠一般状况、血常规、血培养、脏器细菌培养、伤口分泌物培养、脏器和伤肢病理光镜检查 ,并将鼠体内分离的菌株和实验前菌株进行核酸指纹图比较分析 ,确认细菌来源。结果 :①毒力实验 :海鱼弧菌组 (海组 )腹腔注射细菌悬液后一般情况差 ,持续 2 4h ,病理学检查见多脏器水肿、变性。②伤口感染实验 :伤口感染阳性率为 10 0 % ,病理学检查伤肢皮下及横纹肌可见大量嗜中性粒细胞浸润 ,有蜂窝织炎形成。结论 :自中国某海域分离出的海鱼弧菌在 10 6CFU /ml时 ,具有感染能力 ,可致实验鼠的伤口感染 .

海鱼鱼鳔资源利用研究

采用三氯氧磷(POCl3)对大豆分离蛋白(SPI)进行磷酸化改性,并研究了磷酸化前后SPI功能特性的变化。结果表明:磷酸化SPI的溶解性、乳化性以及粘度等功能特性都有不同程度的改变。