Oligo-FISH涂染揭示柚粗线期1号染色体的结构及配对

【目的】深化柑橘减数分裂粗线期染色体结构组成和配对分析。【方法】首次利用柑橘染色体全长特异寡核苷酸荧光原位杂交(oligo-fluorescence in situ hybridization,oligo-FISH)涂染探针,精准示踪鉴定沙田柚粗线期1号染色体的结构特征,比较其与有丝分裂间期细胞核、有丝分裂前中期和中期染色体的结构差异,并揭示粗线期全长染色体的同源配对。【结果】观测到同源配对的全长粗线期与有丝分裂中期较大染色质结构差异。经测定,柚粗线期1号染色体平均全长、长臂长、短臂长和臂比分别为中期的13.93倍、16.54倍、10.44倍和1.54倍,表现出更高FISH信号分辨率。检测到柚粗线期1号染色体着丝粒附近约3.01 Mb的探针信号缺失区。【结论】首次实现柑橘特定全长粗线期染色体的跟踪研究,为深入开展其结构和配对遗传利用的精准研究提供了新方法。

应用DOP-PCR与染色体涂染技术鉴别赤麂的Y染色体

流式细胞仪分离小麂的Y染色体 ,并应用DOP PCR扩增后标记作为探针 ,分别与雄性及雌性赤麂中期核型进行染色体涂染 .结果表明 ,只有雄性赤麂Y2 染色体与探针有明显的杂交信号 ,说明只有Y2 染色体与赤麂的性别决定相关 ,排除了赤麂Y1染色体在性别决定中的作用 .

用C-带和涂染技术检测棕色田鼠Y染色体

采用染色体C 带技术和小鼠整条Y染色体特异探针检测棕色田鼠的Y染色体 ,结果如下 :棕色田鼠雄性个体C 带中期分裂相中 ,X性染色体是亚中部着丝粒染色体 ,在着丝粒处存在着强烈的C阳性带 ,而且在短臂的中间也有一条C阳性带 ,但是没有发现深染的Y染色体。用小鼠整条Y染色体特异探针涂染棕色田鼠的骨髓细胞中期分裂相和间期核 ,以小鼠骨髓细胞中期分裂相和间期核作为对照。涂染结果表明 :棕色田鼠骨髓细胞中期分裂相和间期核涂染信号检出率分别为 0 - 2 %和 3% - 5 % ,两者均呈阴性反应 ,而对照都呈阳性反应。根据实验结果 ,作者认为在棕色田鼠的Y染色体上及整个基因组DNA中不存在小鼠整条Y染色体特异DNA的同源序列 。

应用涂染技术研究人和猕猴染色体的同源性

用２４种人类染色体探针对人和猕猴Ｇ显带染色体进行涂染。结果显示：人类所有染色体在猕猴的染色体组里都有其同源染色体或染色体片段。同源形式有三种：１）人的１条染色体对应于猕猴的单条染色体。该类型有人的１５条常染色体和２条性染色体。２）人的１条染色体对应于猕猴的２条染色体，即人２号染色体对应于猕猴９号和１５号。３）人的２条染色体对应于猕猴的１条染色体。如：人７号和２１号、１４号和１５号、２０号和２２号分别对应于猕猴的２号、７号和１３号染色体。结合Ｇ带分析，人类除１０条染色体与同源的猕猴染色体在结构上相似外，其余１４条染色体与同源的猕猴染色体在结构上有很大差异，包括染色体倒位、染色体融合或断裂等重组。探讨了人类染色体的进化途径。

应用端粒区带涂染探针检测染色体微小结构重排

为了评估染色体端粒区带涂染探针在遗传诊断的应用价值,应用显微切割获得的11q、12q和22q等3个染色体端粒区涂染探针(11q23.3→qter,12q24.1→qter,22q13.1→qter),通过荧光原位杂交技术分析两个疑有染色体末端微小易位的习惯性流产病例。结果显示,病例1和病例2分别为t(11;12)和t(11;22)长臂末端间的微小易位,结合G显带技术确定断裂位点位于11q23.3、12q24.1、22q13.1。结果表明特异性染色体端粒区带探针可以确诊染色体末端区域的微小结构异常,可作为一种检出隐匿易位携带者并确定断裂位点的方法。

应用染色体涂染法建立人和黑叶猴(Semnopithecus francoisi)的染色体同源性

应用荧光原位杂交技术中的染色体涂染法（Chromosomepainting），以生物素标记的除Y染色体外的人全部整条染色体DNA特异性探针与黑叶猴的中期分裂相杂交，建立了人与黑叶猴之间的染色体同源性。除人的1、2、6、16和19号染色体特异探针分别与黑叶猴的2条非同源的染色体杂交外，其余人染色体特异探针均与黑叶猴的1条染色体杂交，其中有两对人染色体特异探针（14和15，21和22）分别杂交同一条黑叶猴染色体。在雌性黑叶猴的单倍染色体中，共检测到30个与人染色体具同源性的染色体和染色体片段。结果表明：黑叶猴的多数染色体与人染色体有高度同源性，仅有少数染色体发生了重排。将研究的结果与已报道的人染色体特异探针与其他灵长类的中期染色体杂交的结果进行比较，可以看出亚洲叶猴之间的相互关系较与非洲叶猴的更为密切。

利用染色体涂染方法建立人和白眉长臂猿(Hylobates hoolock)的比较染色体图谱

除人Y染色体外,本文采用生物素标记的人全部整条染色体特异探针与白眉长臂猿(Hylobates hoolock)有丝分裂中期分裂相进行染色体原位杂交即染色体涂染法以研究人和白眉长臂猿染色体之间的同源性。在白眉长臂猿18对常染色体上检测出了与人22对常染色体同源的59对染色体片段,确定了人和白眉长臂猿之间的精度较高的染色体连锁群。结果表明:自人与白眉长臂猿的祖先分歧以来,大量的染色体间重排(至少发生了39次易位)和染色体内的重排导致了二者核型的差异。根据杂交结果绘制了首份人和白眉长臂猿比较染色体图谱,并结合已有的人和白掌长臂猿(Hylobates lar)(2n=44)和合趾长臂猿(Hylobates syndactylus)(2n=50)的比较染色体图谱对长臂猿属的染色体进化作了初步的探讨。

应用染色体涂染技术分析两例染色体结构异常

为了确定两例细胞遗传学提示染色体结构异常的核型 ,应用通过显微切割技术构建的人类18号和7号染色体探针池 ,分别对这两例病例的中期分裂相进行染色体涂染 ,结合显带染色体 ,确定两者核型分别为46,XY,t(3;18)(q12;q21)和46,XX,dirins(1;7)(p3104;q34q36)。染色体涂染技术是染色体显带技术的重要补充和发展 ,为染色体结构异常提供了一种直观、准确的检测手段 ,在遗传咨询和产前诊断方面有重要作用。

染色体涂染技术与动物分子细胞遗传学的建立和发展

染色体涂染 （ Ｃｈｒｏｍ ｓｏｍ ｅ ｐａｉｎｔｉｎｇ） 是一项在分子细胞遗传学水平上检测染色体重组和畸变的新技术， 包括染色体涂染 Ｄ Ｎ Ａ 探针制备和荧光标记原位杂交两部分。制备染色体涂染 Ｄ Ｎ Ａ 探针可通过流式细胞分类法， 克隆基因库或体细胞杂交株， 以及染色体显微切割和 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增等途径， 现侧重综述近几年国际上用染色体显微切割和 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增的方法制备探针进行家畜染色体涂染的实验技术和主要成果。研究结果表明，用该技术进行家畜染色体涂染具有很高的特异性和分辨力， 可用来检测家畜染色体畸变、性别鉴定、显微克隆等， 提高了对家畜染色体 Ｄ Ｎ Ａ 研究和分析的能力， 从而促进了动物分子细胞遗传学这一新的边缘学科的建立和发展。

寡核苷酸探针套涂染结合基因组原位杂交和分子标记分析准确鉴定小麦-百萨偃麦草异源易位系的研究

培育小麦异源易位系是转移和利用外源基因的有效途径,快速准确的染色体鉴定方法有利于提高染色体工程效率。本研究以电离辐射诱致的2个普通小麦-百萨偃麦草染色体5J易位系(NAU16YJ127和NAU16YJ124)为例,分析了综合利用本课题组前期开发的寡核苷酸探针套[包括(GAA)10、pSc119.2-1、pAs1-1、pAs1-3、AfA-3和AfA-4六个寡核苷酸探针]涂染,结合基因组原位杂交和分子标记等方法鉴定小麦异源易位系的效果。结果表明,NAU16YJ127(2n=6x=42)包含一对小麦-百萨偃麦草易位染色体T5JS·5JL-5AL#1,同时在染色体6A和2D长臂顶端也发生了明显的相互易位;NAU16YJ124(2n=6x=44)附加了一对小麦-百萨偃麦草易位染色体,同时包含一对6A长臂缺失染色体del6AL,其缺失区段易位到5JL近端部,形成T5JS·5JL-6AL,其他染色体未见明显变化。利用21个5J特异分子标记(19个位于长臂和2个位于短臂)分析发现,两个易位系均含有全部5J短臂标记,同时T5JS·5JL-5AL#1含有12个长臂标记,而T5JS·5JL-6AL仅含有2个长臂标记,确证两个易位系断点不同,并将21个标记定位于4个不同区段,其中位于5J短臂的2个标记位于1个区段,位于5J长臂的19个标记位于3个区段(5JL-1~3),分别包含2、10和7个标记;发现3个为可以同时识别5J和5A的共显性标记,其中NAU16YJ124含有全部5A标记,而NAU16YJ127仅包含其中2个标记,进一步验证了细胞学鉴定结果。本研究结果表明,寡核苷酸探针套涂染、基因组原位杂交和分子标记分析相结合为准确鉴定小麦异源易位系提供了新方法。

用染色体涂染方法对早先辐射受照人员进行回顾性照射剂量估算

背景与目的:探索用染色体涂染(painting)技术回顾性估算早先辐射受照人员照射剂量的可行性。材料与方法:用不同剂量(0～5.00Gy)的60Coγ射线照射正常人外周血,用1、2和4号染色体涂染探针分析染色体易位,建立辐射诱发的染色体易位率剂量_效应曲线。用同样的方法分析3例早先受60Coγ射线照射人员的染色体易位,参照剂量_效应曲线估算剂量,与照射后当时估算的生物剂量比较;并对1例无照射当时的生物剂量病例进行回顾性剂量估算。结果:用painting方法分析0～5.00Gy60Coγ射线诱发的全基因组易位率均随着吸收剂量的增加而增高,吸收剂量和全基因组易位率之间的剂量_效应曲线均为二次方程模式,曲线方程为^Y=0.043D2+0.006D+0.0036。3例早先受照人员的估算剂量与照射后生物剂量的资料基本一致,另1例早先受照人员的估算剂量与照后当时物理模拟剂量一致。结论:本研究建立的painting方法可用于早先受辐射照射人员的回顾性剂量估算。

矽钢片涂染烘干机电气系统的改造

12米涂漆烘干机主要用于电机矽钢片烘干漆膜处理，为了提高电机产品质量，对设备的电气系统提出了更高要求，作为200年电气自动化专业设计课题之，将该设备进行电气改造。

涂层机开发涤纶塔夫绸涂染新工艺

本文所探索的是利用涂层机生产涤纶塔夫绸涂染产品的生产工艺.其工艺简单易行,可形成连续大批玺生产,降低色差,提高产品质量.降低成本、并在此工艺基础上对设备略加改造,就可生产彩条产品,其质量优于圆网印花的产品.

车身涂染工艺及其设备技术

回顾汽车涂装的历史时，尤其对汽车车身涂装而言，在近30多年中开发了革命性的新涂装方法。如电泳涂装和静电涂装等方法，今天从质量、成本和效率来说这些方法还是最好、最先进的方法。为进一步提高涂料的利用率（降低成本，减少公害），适应涂布低VOC汽车用涂料（水性涂料、粉末涂料等）的需要，汽车工业发达的国家正在不断地完善上述涂装方法，开发水性涂料静电涂装法，

染色体涂染在确定1例12；16易位携带者后代中染色体来源的价值

染色体涂染在确定１例１２；１６易位携带者后代中染色体来源的价值［英］ＢｒａｎｄｔＣＡ…／ＪＭｅｄＧｅｎｅｔ－１９９４；３１－２３４～２３７先证者为男性，第一胎，父母为身体健康的白人，无遗传病家族史。孕１６周时，常规超声扫描发现颈背囊肿；绒毛活检核型正...

应用染色体涂染技术对五例染色体结构异常病例的分析

目的染色体涂染技术（ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｐａｉｎｔｉｎｇ）在鉴别常规细胞遗传学难以确定的染色体异常中独具优势。应用该技术对Ｇ显带认为染色体结构异常的病例进行检测。方法对５例细胞学提示染色体结构异常病例，分别选用２、６、５、７、１３、１４号和Ｘ染色体特异ＤＮＡ进行涂染。结果染色体缺失及易位一目了然，即使在分散差的分裂相中亦可辨认。结论染色体涂染技术对于检查染色体结构畸变，特别是检测染色体易位效果良好，结果直观明了。

荧光原位杂交和染色体涂染技术在G带核型分析不明病例中的应用

目的 应用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）和染色体涂染（chromosome painting，CP）技术对6例G带核型分析不明病例进行分析。方法 根据G带提示针对性的使用检出可能性较大的CEPX，CEPY，CEP13／21探针和X，13涂染探针进行杂交和涂染。结果 4例G带分析不明的染色体异常由FISH技术鉴定出1例为X环、1例为Y环、1例为21三体、1例排除21三体；2例G带分析不明的染色体异常由CP技术鉴定出1例为der（x）、1例为idic（13）（p11．2）。结论 FISH和CP技术可以准确地对常规G带分析无法明确鉴定的某些染色体异常进行分析鉴定，是进行染色体病诊断的重要补充技术。

染色体涂染技术在恶性血液病研究中的应用

为探讨染色体荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）技术在恶性血液病研究中的价值，应用生物素或异硫氰酸荧光素标记的整条染色体涂染探针，对Ｒ带核型分析揭示有难以识别的染色体结构畸变或标记染色体的１０例恶性血液病进行了ＦＩＳＨ检测。通过染色体涂染和核型分析资料的比较，识别了６例标记染色体的来源，确定了４例染色体易位的类型。结果表明：ＦＩＳＨ是一种有效而可靠的检测手段，它大大提高了常规细胞遗传学方法识别标记染色体和其它染色体结构畸变的能力，因而在恶性血液病的染色体研究中值得更多地采用这一新技术。

染色体涂染技术及其在染色体病诊断中的应用

染色体涂染（ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｐａｉｎｔｉｎｇ）技术是用染色体特异性或染色体区带特异性ＤＮＡ文库作为探针池，与中期分裂相染色体（或间期核）进行荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）和染色体原位抑制（...

用染色体涂染技术分析五例染色体结构异常

目的 结合 G-显带核型分析诊断染色体易位 ,并对 G显带技术难以鉴定的微小易位进行分析。方法 采用生物素标记的显微切割制备的 X、Y、14q、10号染色体特异性探针 ,与患者外周血培养淋巴细胞中期染色体进行荧光原位杂交。结果 室温存放近 10年的标本、- 80℃冻存标本及新鲜标本均可看到清晰的杂交信号 ,染色体结构异常很清楚。结论 染色体涂染技术结合 G显带核型分析 ,可以准确识别G显带技术难以鉴定的染色体微小易位。