消斑肽加速氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞凋亡

目的 :我们已经发现消斑肽能逆转平滑肌源性的泡沫细胞 ,阻抑C5 7BL/6J小鼠动脉粥样硬化斑块的形成 ,对已形成的斑块有消退作用。本文主要探讨消斑肽的作用机制。方法 :体外培养的猪主动脉平滑肌细胞 ,先与 15mg/L的氧化低密度脂蛋白孵育 72h ,再与 0 1mg/L消斑肽孵育 2 4h ,应用荧光染色技术、激光共聚焦显微技术和流式细胞术 ,观察消斑肽对平滑肌细胞的作用。结果 :氧化低密度脂蛋白能诱导血管平滑肌细胞发生凋亡 ;消斑肽能加速氧化低密度脂蛋白诱导的细胞凋亡。结论 :综合以前的实验 ,消斑肽可能是通过加速斑块中细胞的凋亡发挥抗动脉粥样硬化效果。

消斑肽能逆转平滑肌细胞源性泡沫细胞

培养的猪主动脉平滑肌细胞，在与１０ｍｇ·Ｌ－１氧化型低密度脂蛋白作用７２ｈ后，细胞内蓄积胆固醇酯，使胆固醇酯占总胆固醇的６４．１％，形成泡沫细胞。然后向泡沫细胞的培养基中加入不同浓度的消斑肽，作用２４ｈ后，发现总胆固醇和胆固醇酯均下降，而且胆固醇酯小于总胆固醇的５０％，提示泡沫细胞发生了逆转。在平滑肌细胞源性泡沫细胞的形成过程中，一氧化氮合成增加，与对照组的差别有显著性，而在逆转过程中一氧化氨合成下降，与对照组差别无显著性，提示消斑肽有使一氧化氮合成功能恢复正常的作用。

消斑肽对C57BL/6J小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

已发现从中华眼镜蛇毒素中提取的一种多肽（ 暂命名为消斑肽） 能抑制血管平滑肌细胞增殖，并在一定范围内杀伤快速增殖的平滑肌细胞。为验证消斑肽是否具有消除动脉粥样硬化斑块和预防再狭窄的药物效应，选用动脉粥样硬化敏感株近交系 Ｃ５７ Ｂ Ｌ／６ Ｊ小鼠， 经致动脉粥样硬化饮食饲喂１７ 周。使用消斑肽腹腔注射３ ．２ μｇ／ｇ 治疗４ 周，在主动脉窦部连续切片，油红 Ｏ 染色并在显微镜下观察，使用 Ｒｏｂｅｒｔｓ ＆ Ｔｈｏｍｐｓｏｎ 评分判定斑块消退情况。结果发现致动脉粥样硬化饮食饲喂１７周后，主动脉窦形成典型的动脉粥样硬化斑块，且血清总胆固醇和甘油三酯大幅度升高，约高于对照组三倍。经消斑肽治疗后小鼠斑块明显少于和小于非治疗组， 两组的 Ｒｏｂｅｒｔｓ ＆ Ｔｈｏｍｐｓｏｎ 评分分别为４ ．１ ±２ ．２ 和８ ．０ ±１ ．２ （ ｎ ＝ １０ ， Ｐ＜ ０ ．０５） ；而且血清总胆固醇和甘油三酯均下降，接近对照组，非治疗组则下降不明显。此结果提示消斑肽对于小鼠动脉粥样硬化斑块的形成有一定的阻抑作用，且对已形成的斑块有消退作用；同时能使血清总胆固醇和甘油三酯下降。