消渴灵片对2型糖尿病大鼠JNK信号通路的影响

[目的]研究消渴灵片(XKL)对2型糖尿病大鼠JNK信号通路的影响。[方法]将2型糖尿病模型大鼠,按随机数字表法随机分为正常组、模型组、XKL低、中、高组[分别以2、4、8 g/kg XKL作为低、中、高剂量灌胃)、阳性对照组(以0.8 g/kg盐酸二甲双胍灌胃),测定各组大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)及胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)蛋白相对表达情况及JNK m RNA表达情况。[结果]XKL各剂量组均可有效降低模型大鼠FBG水平;XKL中高剂量组可降低MDA水平,提高FINS水平及SOD活性(P<0.05);XKL中、高剂量p-JNK蛋白及JNK m RNA表达量显著下降(P<0.05),PDX-1蛋白表达量显著升高(P<0.05)。[结论]XKL的降糖作用,可能与抑制JNK信号通路的激活有关。

高效液相色谱法测定消渴灵片中格列本脲含量

目的建立测定消渴灵片中格列本脲含量的高效液相色谱法(HPLC法)。方法DionexKromasilODS1色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.02mol/L磷酸溶液(65∶35,含十二烷基硫酸钠0.03%,用三乙胺调节pH值至3.5),流速为1.50mL/min,检测波长为230nm,进样量为20μL。结果格列本脲进样量在0.57～5.68μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999,n=5),平均回收率为101.0%,RSD为0.24%(n=6),重复进样RSD为0.18%(n=5),检测限为0.2ng(S/N=3)。结论HPLC法简便、快速、灵敏,适用于格列本脲的含量测定。

消渴灵片质量标准研究

目的:建立消渴灵片的质量标准。方法:使用显微特征法对茯苓、石膏进行鉴别,采用TLC法对牡丹皮、黄芪、红参和黄连进行鉴别。用HPLC法测定消渴灵片中盐酸小檗碱的含量,使用Discovery C_(18)为色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(50:50)(每100 ml加十二烷基磺酸钠0.1 g),检测波长:265 nm;流速:1.0 ml.min^(-1);柱温为室温(27℃),进样量:10μl。结果:显微特征明显;薄层色谱斑点清晰;HPLC法中盐酸小檗碱对照品在0.16~16.20μg·ml^(-1)浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=5),回收率为98.99%(RSD=0.86%,n=6)。结论:该质量控制方法简便、可靠、准确,可用于消渴灵片的质量控制。

高效液相色谱法测定消渴灵片中丹皮酚的含量

目的：建立高效液相色谱法测定消渴灵片中丹皮酚的含量。方法：采用TERNER C18柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇-水（45：55），流速1．0ml／min，检测波长为274nm。结果：得回归方程Y=1．883765×10^4X＋4．9924539×10^6，r=0．9999，丹皮酚进样量在0．15384—1．5384μg范围内线性关系良好。平均回收率为100．57％，RSD为1．49％。结论：本法简便、重复性好，可提高和完善该制剂质量标准。

HPLC法同时测定消渴灵片中7种成分的含量

目的建立能同时测定消渴灵片中毛蕊花糖苷、马替诺皂苷、五味子醇甲、麦冬甲基黄烷酮A、五味子甲素、甲基麦冬二氢高异黄酮B和五味子乙素含量的HPLC法。方法采用Kromasil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-1 mL·L^(-1)冰醋酸,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);柱温:30℃;检测波长分别为330(检测毛蕊花糖苷和马替诺皂苷),296(检测麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B)和217 nm(检测五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素)。结果 7种成分分别在4.67~116.75,2.39~59.75,1.46~36.50,0.93~23.25,1.54~38.50,0.58~14.50和1.26~31.50μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999 2);平均回收率分别为99.80%,98.11%,97.92%,98.23%,100.01%,96.99%和97.89%;RSD值分别为0.96%,1.33%,1.40%,0.71%,0.82%,1.11%和1.05%。结论该方法操作简便、重复性好,可作为消渴灵片的质量控制方法。

HPLC法测定消渴灵片中丹皮酚的含量

目的 测定消渴灵片中丹皮酚的含量。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil ODS（5μm;4.6×150mm）;流动相为甲醇-水（45∶55）;检测波长为274nm,流速为0.8mL·min^-1。结果 丹皮酚在0.0165-0.3302μg范围内线性关系良好,相关系数为r=0.9998,平均回收率为98.4%,RSD=0.76%。结论 本法重复性好,操作简便,准确,可作为消渴灵片中丹皮酚的含量测定方法。

HPLC法测定消渴灵片中五味子甲素的含量

目的:探讨消渴灵片中的五味子甲素的含量的测定方法。方法:采用Agilent C_(18)柱,以甲醇-水(8:2)为流动相,流速为1.5ml·min^(-1),检测波长为222nm,进样量5μl。结果:五味子甲素在10-200μg·ml^(-1)浓度范围内有良好的线性关系,r=1.0,平均回收率为99.79%,RSD=0.85%(n=6)。结论:本方法简便准确,重现性好,能有效测定消渴灵片中五味子甲素的含量。

高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱快速检查消渴灵片中山麦冬

目的:建立消渴灵片中山麦冬的专属性检测方法。方法:样品经甲醇-氨水超声提取,利用高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱(RRLC-QQQ/MS)检测山麦冬。采用Thermo Accla imTM RSLC120 C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈(A)-20 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~20 min,5%A→90%A),流速0.2 m L·min^(-1),柱温30℃,进样量2μL。离子化模式为ESI^(+),选择m/z723.4→251.2和m/z 723.4→269.2作为山麦冬皂苷B检测离子对,m/z 893.5→463.1和m/z 893.5→481.2作为短葶山麦冬皂苷C检测离子对,进行多反应监测。结果:山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C的检测下限分别为0.28μg·片^(-1)和0.20μg·片^(-1)。111批次消渴灵片中有8家企业的25批样品掺伪,其中6批次样品同时掺入湖北麦冬和短葶山麦冬,4批次样品为湖北麦冬掺伪,15批次样品为短葶山麦冬掺伪。结论:所建方法专属、准确、快速、简便,可为消渴灵片的专项治理提供有力的技术支持。

基于含量测定和化学计量分析的消渴灵片质量标准研究

目的:建立13个厂家111批消渴灵片中黄连的6个生物碱、丹皮酚等多指标性成分含量测定方法,并结合主成分分析及聚类分析等化学计量学方法对其进行质量评价研究。方法:采用HPLC-UV法建立6个黄连生物碱类成分(非洲防己碱、表小檗碱、盐酸药根碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱)、丹皮酚的含量测定方法及通过Chempatten化学计量学软件对不同生产企业的消渴灵片进行系统比较和评价。结果:建立消渴灵片的含量测定方法,测定了其中7个成分的含量,各个成分均能达到基线分离,进样量分别在6.05~249、9.29~226、5.94~195、11.0~283 ng、9.94~267、55.4~1847、23.576~589.410 ng范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为90.0%、84.8%、91.9%、90.3%、93.1%、93.0%、92.3%,符合方法验证要求。同时,化学计量统计体现了所建立的含量测定方法可以对不同生产企业生产的样品进行区分。结论:本实验所建立的多指标含量测定方法简单易行,准确性、稳定性和重复性良好,综合主成分分析和聚类分析,可为消渴灵片质量标准提供参考。

HPLC测定消渴灵中盐酸小檗碱的含量

目的建立高效液相色谱法测定消渴灵片中盐酸小檗碱的含量。方法采用反相高效液相色谱法,选用Dimensions C18(250mm×4.6mm;5μm)色谱柱,流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾-乙腈(64:36),流速为0.8mL·min-1,柱温25℃,检测波长为265nm。结果盐酸小檗碱在0.039～0.394μg·mL-1范围内呈良好线性,r=0.9999,方法平均回收率为96.14%,RSD=0.2%。结论方法简便,快速,结果准确,分离效果好。

不同溶媒在不同提取方法下对吴茱萸总碱提取率的影响

目的考察不同溶媒在不同提取条件下对吴茱萸总生物碱提取的影响,为有效提取吴茱萸总生物碱提供可行方法。方法水、0.5%HCl的水溶液、95%乙醇和0.5%HCl的醇溶液分别在回流、渗漉和超声条件下,以吴茱萸次碱为对照品,采用紫外分光光度法,测定吴茱萸总生物碱的提取率。结果以0.5%HCl的95%乙醇为溶媒,超声和回流都能使吴茱萸总碱有较高的提取率。结论不同溶媒在不同提取条件下对吴茱萸总生物碱的提取有较大影响。

近期部分药材品种点评

天花粉：暑去秋来，又到一年秋收时，许多根茎药材将陆续进入采挖期。天花粉为药用大宗中药材品种之一，有清热泻火，生津止渴，排脓消肿的功效，是生产消渴丸、消渴灵片、降糖宁等中成药的重要成份，年需求量在4000吨左右。