世界卫生组织全球脊髓灰质炎实验室网络第12届非正式磋商会议的摘要和建议

世界卫生组织（WHO）全球脊髓灰质炎（脊灰，）实验室网络的代表于2006年6月在日内瓦召开了第12届非正式磋商会议。讨论的主题是根除脊髓灰质炎和脊灰病毒实验室监测的进展趋势。代表们一致认为该工作有巨大进展，已经趋近于了全球脊髓灰质炎根除的目标。现已证明有3个WHO地区（即美洲、欧洲和西太平洋）无脊髓灰质炎，而且，剩下的3个地区也只有4个国家（阿富汗、印度、尼日利亚和巴基斯坦）尚有脊髓灰质炎地方性流行。

中国2007年脊髓灰质炎实验室网络的运转与评价

目的通过对2007年中国（未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区，下同）脊髓灰质炎（脊灰）实验室网络监测数据进行分析，评估实验室网络的运转情况，为中国维持无脊灰状态提供实验室依据。方法分析中国免疫规划监测信息管理系统数据库中31个省（自治区、直辖市，下同）上报的急性弛缓性麻痹（Acute Flaccid Paralysis，AFP）病例个案调查表，和中国疾病预防控制中心（CDC）病毒病预防控制所国家脊灰实验室（National PolioLabotatory，NPL）的监测数据库，评价实验室网络的各项运转指标。结果2007年全国脊灰实验室网络共收集了4984例AFP病例的9771份粪便标本，合格粪便标本采集率为90．5％。按世界卫生组织（WHO）第4版《脊灰实验室手册》的要求进行病毒分离和鉴定，28d内完成病毒血清型定型的及时率为94．8％。AFP病例中分离到脊灰病毒（Poliovirus，PV）的214例，分离率为4．29％；分离到非脊灰肠道病毒（Non-Polio Enterovirus，NPEV）的471例，分离率为9．45％。2007年NPL收到脊灰实验室网络送检的316份PV阳性分离物，由于酶联免疫吸附试验（ELISA）型内鉴定的试剂供应短缺，因此对PV型内鉴定改为直接进行VP，基因核苷酸序列测定与分析，所以调整之前仅对10株I型PV、14株Ⅱ型PV进行了EusA型内鉴定；对14株PV进行了聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析型内鉴定；对其余的397株单血清型PV进行了VPt基因核苷酸序列测定和分析，均未发现脊灰野病毒。在山东省的2例AFP病例中，分离到3株I型疫苗衍生脊灰病毒（Vaccine-derived Poliovirus，VDPVs），但不属于循环的VDPVs（cVDPVs）；在山西省1例AFP病例中分离到2株I型VDPVs；在广西壮族自治区的1例AFP病例中分离到1株Ⅰ型VDPV。2007年NPL以优异的成绩通过了WHO盲样标本的能力验证和现场认证考核；31个省CDC脊灰实验室通过了与NPL相同的盲样标本的能力验证；12个省CDC脊灰实验室通过了WHO的实验室现场认证考核。NPL对5个省送检的334份原始粪便标本进行了复核，PV的符合率为99％～100％，NPEV的符合率为88．0％～92．7％。结论2007年中国脊灰实验室网络运转良好，中国继续保持无脊灰状态，实验室网络监测系统敏感有效，为维持无脊灰状态提供了实验室依据。

中国2012年脊髓灰质炎实验室网络的运转与评价

目的通过对中国2012年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(Polio Laboratory Network,PLN)监测数据(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)进行统计分析,评估其运转情况,为中国重新恢复无脊灰状态提供实验室依据。方法分析中国免疫规划监测信息管理系统数据库中,31个省(自治区、直辖市,下同)报告的急性弛缓性麻痹(Acute Flaccid Paralysis,AFP)病例个案调查表和中国疾病预防控制中心(Center for Disease Control and Prevention,CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室(National Polio Laboratory,NPL)的监测数据库,总结PLN运转中的质量控制,评价PLN的各项运转指标。结果中国2012年PLN共收集了6163例AFP病例的12 204份粪便标本,14d内双份粪便标本采集率为92.6%,合格粪便标本采集率为92.1%。按世界卫生组织(World Health Organization,WHO)第4版《脊灰实验室手册》的要求进行病毒分离和鉴定,试验结果28d内及时反馈率为99%。2012年,在116例AFP病例粪便标本中分离到脊灰病毒(Poliovirus,PV),分离率为2.10%(116/5534);在680例AFP病例粪便标本中分离到非脊灰肠道病毒(Non-polio Enterovirus,NPEV),分离率为12.29%(680/5534)。2012年,NPL收到PLN送检的283株PV,对375株单血清型PV采用衣壳蛋白(Capsid Protein)VP1编码区核苷酸序列测定与分析进行型内鉴定(Intratypic Differentiation,ITD),发现7例(共计25株)疫苗衍生(Vaccine-derived)PV(VDPV),其中Ⅰ型2株,Ⅱ型16株,Ⅲ型7株,未发现野生型(Wild Type)PV(WPV)。2012年,NPL收到环境监测送检的314株PV,全部采用VP1编码区核苷酸序列测定与分析进行ITD,在山东省发现1株VDPV。2012年8月,NPL作为WHO西太平洋区脊灰参比实验室接受并以优异的成绩通过了WHO的年度现场认证;2012年10月,NPL以满分的成绩通过了荧光定量聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)和VDPV筛查的职能考核;2012年12月,又以满分通过了WHO核苷酸序列测定和分析的第一次职能考核。在中国PLN中,有11个省级CDC脊灰实验室参加并通过了WHO的实验室现场评估认证;22个省级CDC脊灰实验室参加并以满分的成绩通过了荧光定量PCR和VDPV筛查的职能考核。2012年10月9日,WHO通过对中国AFP病例监测质量和结果的评估,宣布中国重新恢复无脊灰状态。结论 2012年,PLN运转正常、敏感有效,在AFP病例和环境监测中未发现WPV,为中国恢复无脊灰状态提供了关键的技术支撑作用。

中国2008年脊髓灰质炎实验室网络的运转与评价

目的通过对中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)2008年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(Polio Laboratory Network,PLN)监测数据进行分析,评估PLN运转情况,为中国维持无脊灰状态提供实验室依据。方法分析中国免疫规划监测信息管理系统数据库中,31个省(自治区、直辖市,下同)上报的急性弛缓性麻痹(Acute Flaccid Paralysis,AFP)病例个案调查表和中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室(National Polio Laboratory,NPL)的监测数据库,评价PLN的各项运转指标。结果2008年全国PLN共收集了5166例AFP病例的10116份粪便标本,14d内双份粪便标本采集率为90.3%,合格粪便标本采集率为89.6%。按世界卫生组织(WHO)第4版《脊灰实验室手册》的要求进行病毒分离和鉴定,分离结果28d内反馈及时率为94.9%。2008年从189例AFP病例中分离到脊灰病毒(Poliovirus,PV),分离率为3.72%;597例分离到非脊灰肠道病毒,分离率为11.74%。2008年NPL收到PLN送检的251份PV阳性分离物,对318株单血清型PV采用VP1编码区核苷酸序列测定与分析的方法进行型内鉴定,均未发现脊灰野病毒和疫苗衍生脊灰病毒。2008年NPL以优异的成绩通过了WHO盲样标本的能力验证和现场认证考核;31个省级CDC脊灰实验室通过了与NPL相同的盲样标本的能力验证;13个省级CDC脊灰实验室参加并通过了WHO的实验室现场评估考核。结论2008年PLN运转正常、敏感有效,中国继续保持无脊灰状态,为维持无脊灰状态提供了实验室依据。

中国脊髓灰质炎实验室网络2007～2015年细胞敏感性监测与评价

目的通过对中国（未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区）脊髓灰质炎（脊灰）实验室网络（Chinese Poliomyelitis Laboratory Network,CPLN）2007年4月~2015年4月连续的细胞敏感性（Cell Sensitivity,CS）监测结果进行分析,评估其在脊灰实验室检测质量控制中的重要作用。方法全国脊灰实验室网络中所有实验室统一使用96孔微量板病毒滴定法在L20B细胞和RD细胞上对三个型别的脊灰病毒的敏感性进行检测。结果从2007~2015年,在CPLN中,有30个省级脊灰实验室已开展CS监测并按时向国家脊灰实验室上报结果,目前西藏由于实验室条件所限尚未开展CS监测。八年间的CS监测结果显示30个省级脊灰实验室的实验室质量控制（LQC）株滴度均在正常范围±0.5 logCCID_（50）/0.1ml波动。结论 2007~2015年CPLN中各个实验室所用的L20B和RD细胞对脊灰病毒敏感性处于正常范围内,细胞系状态稳定,对三个型别的脊灰病毒均敏感。CS监测作为CPLN质量控制的重要指标保证了实验室检测脊灰病毒的敏感性,为从细胞中扩增出低滴度的脊灰病毒提供了保障,对输入脊灰野病毒或疫苗衍生脊灰病毒（VDPV）的早期发现至关重要。

中国2011年脊髓灰质炎实验室网络的运转与监测

目的对中国2011年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(Polio Laboratories Network,PLN)监测数据(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)进行统计分析,为应对新疆维吾尔自治区(新疆)输入Ⅰ型脊灰野病毒(Tepe1 Wild Poliovirus,WPVⅠ)疫情和维持中国无脊灰提供科学支撑。方法分析中国2011年免疫规划监测信息管理系统数据库中,31个省(自治区、直辖市,下同)报告的急性弛缓性麻痹(Acute Flaccid Paralysis,AFP)病例个案调查表和中国疾病预防控制中心(Center for Disease Control and Prevention,CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室(National Polio Laboratory,NPL)的监测数据库,评价PLN的各项运转指标。结果中国2011年PLN共收集了6205例AFP病例的12 253份粪便标本,合格粪便标本采集率为90.9%。从6089例AFP病例中分离到脊灰病毒(Poliovirus,PV)的207例,分离率为3.4%;分离到非脊灰肠道病毒(Non-polio Enterovirus,NPEV)的782例,分离率为12.8%。NPL收到中国PLN送检的PV 594株,鉴定结果:9例为疫苗衍生(Vaccine-derived)PV(VDPV),其中Ⅰ型1例,Ⅱ型7例,Ⅲ型1例;53例为WPVⅠ,21例来源于WPV病例,30例来源于AFP病例接触者或健康人群。2份环境污水来源于新疆和田地区环境监测。2011年NPL和31个省级CDC脊灰实验室通过了世界卫生组织(World Health Organization,WHO)PV分离与鉴定的盲样标本考核;NPL还通过了PV荧光定量聚合酶链反应型内鉴定和PV核苷酸序列测定和分析的盲样考核;NPL和13个省级CDC脊灰实验室接受并通过了WHO的现场认证考核。结论中国2011年PLN维持着高水平的运转,及时发现和鉴定了VDPV病例、新疆输入WPVⅠ和局部爆发疫情,为卫生部制订应对WPV和VDPV的免疫策略,为阻断WPV和VDPV的传播提供了重要的科学依据。

中国2013年脊髓灰质炎实验室网络的运转状况与评价

目的通过对中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)2013年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(Polio Laboratory Network,PLN)监测数据和各项监测指标的分析和评估,为维持我国无脊灰状态提供病毒学依据。方法对中国免疫规划监测信息管理系统数据库中,31个省(自治区、直辖市,下同)报告的急性弛缓性麻痹(Acute Flaccid Paralysis,AFP)病例个案调查表和中国疾病预防控制中心(Center for Disease Control and Prevention,CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室(National Polio Laboratory,NPL)的监测数据库进行统计分析,对PLN的各项运转指标进行评价。结果中国2013年PLN收集到5623例AFP病例的11 126份粪便标本,14天内双份粪便标本采集率为92.78%,合格粪便标本采集率为92.35%,鉴定结果 28天内反馈率为99.10%。2013年从5623例粪便标本中有111例分离到脊灰病毒(Poliovirus,PV),分离率为1.97%;606例粪便标本分离到非脊灰肠道病毒(Non-polio Enterovirus,NPEV),分离率为10.78%。2013年,NPL收到PLN送检的237份PV分离物,按单个血清型定型统计共计304株,其中19株为疫苗衍生(Vaccine-derived)PV(VDPV),1株来源于1例非AFP病例,另18株来源于1例免疫缺陷相关的(Immunodeficiency-associated)VDPV(i VDPV)病例;未发现野生型(Wild)PV(WPV)。2013年,NPL和31个省CDC脊灰实验室都通过了世界卫生组织(World Health Organization)粪便标本PV等EV的新检测流程的盲样标本考核,NPL和其中8个省CDC脊灰实验室接受并通过了WHO现场评估认证,其他省级CDC脊灰实验室通过信函认证表格认证。结论中国PLN 2013年运转正常,未发现WPV或WPV病例,为维持我国无脊灰状态,早期发现VDPV或VDPV病例,早期采取应对措施阻断其传播提供了重要的病毒学依据。

中国2009年脊髓灰质炎实验室网络的运转情况与评价

目的通过对2009年中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(Polio Laboratory Network,PLN)监测数据进行分析,评估其运转情况,为中国维持无脊灰状态提供病毒学依据。方法分析中国免疫规划监测信息管理系统数据库中,31个省(自治区、直辖市,下同)上报的急性弛缓性麻痹(Acute Flaccid Paralysis,AFP)病例个案调查表和中国疾病预防控制中心(Center for Disease Control and Prevention,CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室(National Polio Laboratory,NPL)的监测数据库,评价PLN的各项运转指标。结果 2009年全国PLN共收集了4829例AFP病例的9621份粪便标本,14d内双份粪便标本采集率为90.8%,合格粪便标本采集率为90.0%。按世界卫生组织(World Health Organization,WHO)第4版《脊灰实验室手册》的要求进行病毒分离和鉴定,试验结果28d内及时反馈率为95.4%。2009年从158例AFP病例中分离到脊灰病毒(Poliovirus,PV),分离率为3.29%;607例分离到非脊灰肠道病毒(Non-polio Enterovirus,NPEV),分离率为12.63%。2009年,NPL收到PLN送检的214株PV阳性分离物,对284株单血清型PV采用VP1编码区核苷酸序列测定与分析的方法进行型内鉴定,发现1株Ⅱ型疫苗衍生脊灰病毒,未发现脊灰野病毒。2009年,NPL以优异的成绩通过了WHO盲样标本的能力验证和现场认证考核;31个省级CDC脊灰实验室通过了与NPL相同的盲样标本的能力验证;12个省级CDC脊灰实验室通过了WHO的实验室现场评估考核。结论 2009年,PLN运转正常、敏感有效,为维持无脊灰状态提供了病毒学依据,中国继续保持无脊灰状态。

中国2015年脊髓灰质炎实验室网络的运转与评价

目的评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)2015年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(Polio laboratory network,PLN)运转情况,为中国维持无脊灰状态提供病毒学依据。方法对中国急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例监测信息报告管理系统中31个省(自治区、直辖市)报告的AFP病例和中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室(National Polio Laboratory,NPL)的监测数据库进行统计分析,对PLN的各项运转指标进行评价。结果 2015年中国共报告5 218例AFP病例,PLN收到5 173例AFP病例的10 335份粪便标本;14天内双份粪便标本采集率为92.76%;合格粪便标本采集率为92.16%,病毒分离结果 14天内反馈率为96%。5 173例病例中,L20B阳性69例(1.33%);非脊灰肠道病毒(Non-polio enterovirus,NPEV)阳性472例(9.12%)。NPL收到省级脊灰实验室送检的分离自AFP病例、非AFP病例、AFP病例接触者及健康人的179株L20B细胞阳性分离物,其中173株为脊灰病毒(Poliovirus,PV),4株为NPEV,2株为非肠道病毒(Non-enterovirus,NEV)。173株PV中,8株为疫苗衍生脊灰病毒(Vaccine-derived poliovirus,VDPV),来自浙江、广东和辽宁;未发现脊灰野病毒(Wild poliovirus,WPV)。从脊灰病毒外环境监测采集的污水标本中分离到1株Ⅱ型VDPV。2015年NPL和31个省CDC脊灰实验室都通过了世界卫生组织(WHO)粪便标本脊灰等肠道病毒的新检测流程的能力验证标本考核。NPL和27个省CDC脊灰实验室通过了WHO型内鉴定能力验证考核。结论中国PLN 2015年运转正常,未发现WPV,为维持中国无脊灰状态,早期发现VDPV或VDPV病例,早期采取应对措施阻断其传播提供了重要的病毒学依据。

中国脊髓灰质炎实验室网络开展细胞系支原体检测及现状分析

目的通过对中国脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(China Polio Laboratory Network,CPLN)开展细胞系支原体检测(Cell mycoplasma detection,CMD),评价CMD在细胞质量控制中的作用,探讨其与脊灰病毒分离率的联系。方法采用巢式聚合酶链反应(Nested polymerase chain reaction,n PCR)法对CPLN常规使用的RD、L20B细胞系进行支原体检测。结果 2013年8月至2016年8月,在CPLN中除西藏外的30个省级脊灰实验室已正式开展CMD,并按时向国家脊灰实验室上报结果。CMD结果显示,30个省级脊灰实验室所用的每个批次的L20 B和RD细胞,支原体检测结果均为阴性。结论三年间CPLN 30个省级脊灰实验室用于脊灰病毒分离的细胞系均未出现支原体污染,细胞系质量正常且稳定;CMD作为CPLN细胞质量控制的重要组成部分,为CPLN运转质量提供可靠的数据支撑。

中国2003年脊髓灰质炎实验室网络的运转与监测

2 0 0 3年 ,中国 31个省 (自治区、直辖市 ,下同 )疾病预防控制中心 (CDC)脊髓灰质炎 (脊灰 )实验室 ,从 5 0 1 4例急性弛缓性麻痹 (AFP)病例中收集了 9987份粪便标本 ,所有粪便标本用L2 0B、RD细胞同时进行肠道病毒分离。从 373例AFP病例粪便标本中分离到脊灰病毒 (PV) ,分离率为 7 4%。然后对所有病毒做了血清定型 ,其中Ⅰ型5 5例 ,Ⅱ型 1 32例 ,Ⅲ型 70例 ,混合型 74例 ,PV与非脊灰肠道病毒 (NPEV)混合 1 6例。从 4 79例AFP病例粪便标本中分离到NPEV ,分离率为 9 6 %。中国CDC病毒病预防控制所国家脊灰实验室共收到送检的 4 75株PV标本 ,其中 373株来源于AFP病例 ,1 0 2株从AFP病例接触者、流动人口、非AFP病例、健康人群等分离到。对送检的 4 75株进行了血清型中和试验复核 ,并使用酶联免疫吸附试验 (ELISA)和聚合酶链反应 限制性内切酶片段长度多态性分析 (PCR RFLP)两种方法进行型内鉴定。血清型中和试验复核和PCR RFLP鉴定结果显示 :4 75株中 ,PVⅠ型疫苗株 80株 ,Ⅱ型疫苗株 1 4 6株 ,Ⅲ型疫苗株 1 0 5株 ,混合型疫苗株 98株 ,PV +NPEV1 7株 ,疫苗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型变异株分别为 1 0、1 0、9株。将PV混合株进行单型分离后 ,所有单型毒株共 5 96株 ,经ELISA试验鉴定 ,其中疫苗类似株 (SL) 5 73株 。

中国2004年脊髓灰质炎实验室网络的运转与监测

目的为了更好地维护和运转脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络,并提供2004年维持无脊灰状态的实验室资料,总结2004年脊灰实验室网络的运转与监测情况。方法分析31个省(自治区、直辖市,下同)急性弛缓性麻痹(AFP)病例监测系统经计算机联网上报的AFP病例个案调查表数据库,和中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室监测数据库。结果2004年31个省CDC,从5 229例AFP病例中收集10 399份粪便标本,所有粪便标本在L20B、RD细胞上同时进行病毒分离。从360例AFP病例粪便标本中分离到脊灰病毒(PV),分离率为6.9%;从495例AFP病例粪便标本中分离到非脊灰肠道病毒(NPEV),分离率为9.4%。国家脊灰实验室共收到省级CDC脊灰实验室送检的486株PV标本;其中360株分离于AFP病例,其余分离于AFP病例接触者、流动人口和健康人群。对486株使用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析进行型内鉴定,其中PVⅠ型疫苗株83株,Ⅱ型疫苗株160株,Ⅲ型疫苗株117株,混合型疫苗株92株,PV+NPEV10株,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型疫苗变异株分别为3、13、8株。将PV混合株进行单型分离后,用酶联免疫吸附试验进行型内鉴定,共鉴定单型毒株607株,其中疫苗类似株576株,占94.9%;非疫苗类似株11株,占1.8%;双反应毒株为17株,占2.8%;阴性2株,无效1株。所有型内鉴定异常的毒株和部分从零剂次服苗者分离的毒株共70株,做了VP1编码区全基因序列测定和分析,发现在贵州省贞丰县有Ⅰ型疫苗衍生脊灰病毒循环(cVDPVs),毕节市有单株Ⅱ型VDPV。2004年世界卫生组织使用5份盲样标本进行病毒分离职能考核,除3个省CDC脊灰实验室外,其余省CDC脊灰实验室均为满分。对18个省CDC脊灰实验室进行现场考核,全部通过认证。结论2004年中国继续保持无脊灰状态,脊灰实验室网络运转正常,实验室监测资料准确,监测系统敏感,为维持无脊灰提供了完整的实验室资料。

中国2006年脊髓灰质炎实验室网络的运转与监测

目的通过对中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)2006年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络监测结果进行分析,评估其运转情况,提供中国继续维持无脊灰状态的实验室依据。方法分析31个省(自治区、直辖市,下同)急性弛缓性麻痹(AFP)病例个案调查表数据库和中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室监测数据库,总结脊灰实验室网络运转中的培训和质量控制,评价实验室网络运转的各项指标。结果2006年全国脊灰实验室网络收集了5 299例AFP病例的10 537份粪便标本,按《世界卫生组织(WHO)脊灰实验室手册》的要求进行病毒分离和鉴定。28d内完成病毒血清型定型的及时率为88.7%,AFP病例中分离到脊灰病毒(PV)的280例,分离率为5.3%;分离到非脊灰肠道病毒的551例,分离率为10.4%。国家脊灰实验室对2006年全国脊灰实验室网络分离到的359株PV进行了聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP)型内鉴定,对462份单血清型PV进行了酶联免疫吸附试验(ELISA)型内鉴定。并对PCR-RFLP及ELISA型内鉴定有异常的毒株或分离于零剂次服苗的AFP病例的毒株及部分Ⅲ型毒株,共180株进行VP1基因核苷酸序列测定和分析,未发现脊灰野病毒。但在广西壮族自治区的1例AFP病例和7名接触者中,分离到8株Ⅰ型疫苗衍生脊灰病毒(VDPVs),在上海市1名健康儿童中分离到1株Ⅲ型VDPV。在培训和质量控制方面,2006年举办了两期全国脊灰实验室新人手把手培训班,12个省CDC脊灰实验室16人参加了培训。2006年,国家脊灰实验室以优异的成绩通过WHO的2006年度能力验证和现场认证;31个省CDC脊灰实验室通过了2006年度盲样标本能力验证;内蒙古、江苏、福建、云南、湖南、四川、新疆、安徽8个省CDC脊灰实验室通过了WHO的实验室现场认证。结论中国2006年脊灰实验室网络运转良好,已建立的科学化、系统化、规范化的质量控制体系取得良好的实效和发挥了应有的作用。中国2006年继续保持无脊灰状态,脊灰实验室网络运转正常,监测系统敏感,为维持无脊灰提供了实验室依据。

中国2005年脊髓灰质炎实验室网络的运转与监测

目的利用中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)2005年维持无脊髓灰质炎(脊灰)状态的实验室资料,评估脊灰实验室网络的运转与监测情况。方法分析31个省(自治区、直辖市,下同)急性弛缓性麻痹(AFP)病例监测系统经计算机联网上报的AFP病例个案调查表数据库和中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室监测数据库。结果2005年31个省CDC从5 195例AFP病例中收集了10 340份粪便标本,所有粪便标本在L20B、RD细胞上同时进行病毒分离。从293例AFP病例粪便标本中分离到脊灰病毒(PV),分离率为5.64%;从551例AFP病例粪便标本中分离到非脊灰肠道病毒(NPEV),分离率为10.61%。国家脊灰实验室共收到各省CDC脊灰实验室送检的404株PV标本;其中293株分离于AFP病例,其余分离于AFP病例接触者、流动人口和健康人群。对404株PV使用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP)进行型内鉴定,PVⅠ型疫苗株72株,PVⅡ型疫苗株138株,PVⅢ型疫苗株74株,混合型疫苗株91株,PV+NPEV 12株,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型疫苗变异株分别为6、6、5株。将PV混合株进行单型分离后,进行酶联免疫吸附试验(ELISA)型内鉴定,共鉴定单型毒株521株,其中疫苗类似株(SL)498株,占所有送检毒株的95.59%;非疫苗类似株(NSL)2株,占0.38%;双反应株(DRV)18株,占3.45%;阴性2株;无效1株。所有型内鉴定异常和部分从高危零剂次服苗者分离的118株,做了VP1编码区全基因的序列测定和分析。在江苏、安徽省CDC陆续送检的编号为9230病例的33份病毒分离物(其中江苏省2份,安徽省31份),连续8个月从安徽省舒城县1例免疫缺陷患儿分离到疫苗衍生脊灰病毒(iVDPV);VP1编码区全基因的序列测定图谱显示,19株Ⅱ型iVDPVs,13株Ⅲ型iVDPVs。2005年世界卫生组织(WHO)使用5份盲样标本进行病毒分离职能考核,31个省CDC脊灰实验室成绩均为满分。对14个省CDC脊灰实验室进行了现场考核,全部通过认证。结论中国2005年继续维持无脊灰状态,脊灰实验室网络运转正常,为维持无脊灰提供了完整的实验室依据。

中国2002年脊髓灰质炎实验室网络的运转与监测

20 0 2年全国脊髓灰质炎 (脊灰 )实验室网络采集粪便标本的急性弛缓性麻痹 (AFP)病例 5 30 8例 ,分离到的所有毒株均做了血清定型 ,其中脊灰病毒 (PV)I型 5 5例 ,Ⅱ型 181例 ,Ⅲ型 97例 ,混合型 83例 ,脊灰与非脊灰肠道病毒 (NPEV)混合 2 7例 ,PV分离率为 8 3%。分离到NPEV4 5 8例 ,分离率为 8 6 %。 2 0 0 2年 ,31个省 (自治区、直辖市 ,下同 )疾病预防控制中心 (CDC)脊灰实验室均通过职能考核 ,成绩合格。对 11个省级脊灰实验室还进行了现场考核 ,全部通过考核认证。中国CDC病毒病预防控制所国家脊灰实验室对送检的 5 0 3株均做了聚合酶链反应 限制性酶切片段多态性分析 (PCR RFLP)法型内鉴定 ,其中 4 5 1例为从AFP病例中分离到的。经检测未发现脊灰野毒株 ,PV疫苗株I型 6 4例 ,Ⅱ型 170例 ,Ⅲ型 99例 ,混合型 82例 ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型变异株分别为 3、19、5例。按照世界卫生组织要求对所有毒株 (份 )进行了酶联免疫吸附试验 (ELISA)法型内鉴定 ,总计 6 0 9株 ,其中疫苗类似株(SL) 5 75株 ,占所有送检毒株的 94 4 % ;非疫苗类似株 (NSL) 3株 ,占 0 5 % ;双反应毒株 (DRV) 2 8株 ,占 4 6 %。并对 6 8例送检毒株做了VP1段的基因测序 ,发现疫苗衍生脊灰病毒 (VDPV) 2株 ,分别在四川省和安徽省分离到 。

江苏省2005年-2013年脊髓灰质炎实验室网络监测与运转

目的通过对江苏省2005年-2013年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络监测数据进行分析,评估其运转情况,为江苏省继续维持无脊灰状态提供病毒学数据。方法分析全省13个地级市上报的急性弛缓性麻痹(AFP)病例个案送检表、江苏省脊灰实验室病原学监测数据和国家脊灰实验室对所有脊灰病毒株进行型内鉴定数据库。结果 2005年-2013年江苏省脊灰实验室共收到2 413例AFP病例粪便标本,252例AFP病例接触者粪便标本,检测未发现脊灰野病毒和疫苗衍生脊灰病毒(VDPV)。脊灰实验室每年均通过了世界卫生组织(WHO)和国家脊灰实验室盲样标本的能力验证和现场认证评估,细胞系敏感性也均达到WHO的要求。结论江苏省脊灰实验室网络运转良好,细胞系是敏感、有效的,为江苏省继续保持无脊灰状态提供了实验室依据。