消退素D1对结肠癌细胞K-Ras/Notch信号通路串话的影响

目的 探讨消退素D1(Rv D1)对SW620结肠癌细胞K-Ras/Notch信号通路串话的影响及作用机制。方法 采用CCK-8和克隆形成方法评估Rv D1(0.0、62.5、125.0、250.0、500 nmol/L)对SW620结肠癌细胞短期和长期增殖的影响;将SW620结肠癌细胞分成空白组、Rv D1组、K-Ras组、K-Ras+Rv D1组。空白组不进行处理,K-Ras组和K-Ras+Rv D1组转染K-Ras质粒,Rv D1组和K-Ras+Rv D1组用250 nmol/L的Rv D1处理。蛋白质印迹法检测IL-6、K-Ras、NICD、p-p65、p65、vimentin、N-cadherin和E-cadherin蛋白表达;免疫荧光法检测IL-6、K-Ras和NICD蛋白表达;Transwell实验检测细胞侵袭和迁移水平。结果 125.0、250.0、500.0 nmol/L Rv D1抑制SW620细胞增殖和克隆形成能力(P<0.05)。在Rv D1组中,IL-6、K-Ras、NICD、p-p65、vimentin、N-cadherin蛋白表达均低于空白组,E-cadherin表达高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);K-Ras组的NICD、p-p65、vimentin、N-cadherin的蛋白表达高于空白组,E-cadherin表达低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);K-Ras+Rv D1组的NICD、p-p65、vimentin、N-cadherin表达及细胞侵袭和迁移水平均低于K-Ras组,E-cadherin表达高于K-Ras组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Rv D1通过抑制IL-6表达,抑制K-Ras对Notch信号通路串话,降低下游核因子-κB水平和上皮-间质转化特性,削弱结肠癌细胞的侵袭转移能力。

消退素D1对急性肺损伤影响的研究进展

急性肺损伤(ALI)是一种临床常见的急危重病症,由于没有特定的治疗方法从而成为世界卫生组织面临的严峻挑战。研究表明ALI的重要发生机制是炎症反应机制,调节炎症在ALI的预防和治疗中起着重要的作用。消退素D1(RvD1)作为一种特殊的炎症介质,可抑制炎症因子的表达,促进抗氧化蛋白的产生。本文以RvD1对ALI的研究现状作一综述。系列研究显示RvD1可以通过抑制炎症细胞浸润,抑制炎症因子分泌,通过保护肺泡-毛细血管膜的完整性,增强肺泡液清除率减轻肺水肿,抑制NOD样受体蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体通路过度激活以及通过影响细胞自噬减轻ALI的炎症反应。RvD1可以通过多种途径促进炎症细胞凋亡和促进巨噬细胞吞噬凋亡的炎症细胞来促进炎症的消退,减缓ALI。

消退素D1对原位肝癌的抗癌作用及其对Th1/Th2平衡的影响

目的探讨消退素D1对原位肝癌小鼠的抗癌作用及其对Th1/Th2平衡的影响。方法60只6~8周龄SPF级ICR雄性小鼠,随机分为对照组、模型组、低剂量组和高剂量组,每组15只。通过将H22细胞接种于小鼠肝左叶构建原位肝癌小鼠模型,对照组仅注射等量生理盐水,低剂量和高剂量组小鼠在模型组的基础上,分别每天腹腔注射2.5 mg/kg和10 mg/kg的消退素D1,连续3周。收集并称量小鼠肝质量,全自动生化仪检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBil)含量。免疫组化法检测肝癌组织Ki67表达,流式细胞术检测小鼠肝癌组织Th1和Th2表达。RT-PCR法检测小鼠肝癌组织T-bet和Gata-3 mRNA表达。Western blot法检测小鼠肝癌组织T-bet和Gata-3蛋白表达。ELISA法检测小鼠血清IL-2、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4和IL-10含量。结果与对照组比较,模型组小鼠肝癌组织体积、Ki67表达、血清ALT、AST和TBil的含量均明显升高(P<0.05),肝癌组织中Th1比例、T-bet蛋白和mRNA表达、血清IL-2和IFN-γ含量显著降低(P<0.05),Th2比例、Gata-3蛋白和mRNA表达、血清IL-4和IL-10含量明显升高(P<0.05)。与模型组相比,低剂量组和高剂量组小鼠肝癌组织体积、Ki67表达、血清ALT、AST和TBil的含量均明显降低(P<0.05),肝癌组织中Th1比例、T-bet蛋白和mRNA表达、血清IL-2和IFN-γ含量显著升高(P<0.05),Th2比例、Gata-3蛋白和mRNA表达、血清IL-4和IL-10含量明显降低(P<0.05)。结论消退素D1通过促进Th1/Th2向Th1分化,抑制肝癌的生长和转移。

消退素D1对非压迫性腰椎间盘突出症模型大鼠背根神经节炎症的作用

目的：研究消退素D1（Resolvin D1,Rv D1）对非压迫性腰椎间盘突出症模型大鼠背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）炎症的影响及内在机制。方法：选取30只雄性大鼠建立非压迫性腰椎间盘突出症模型。随机分为假手术组、模型组、Rv D1组（100 ng）。术后连续3天模型组和Rv D1组分别鞘内注射10μl磷酸盐缓冲液、Rv D1。于术前1天及术后连续7天检测各组大鼠术侧50%缩足阈值（50%paw withdrawal threshold,PWT）。术后第7天,酶联免疫吸附测定术侧L5 DRG中TNF-α和IL-1β的蛋白表达量,免疫组化法检测DRG中p-ERK及NF-κB/p65的阳性表达。结果：术后各时间点,模型组大鼠50%PWT较假手术组明显降低（P〈0.01）;TNF-α和IL-1β表达明显升高（P〈0.01）;p-ERK、NF-κB/p65蛋白水平明显升高（P〈0.01）。术后第2~7天,Rv D1组与模型组相比,50%PWT显著升高（P〈0.05）;TNF-α和IL-1β的蛋白表达明显降低（P〈0.01）;p-ERK及NF-κB/p65蛋白水平明显降低（P〈0.01）。结论：Rv D1促进背根神经节炎症的消退,可能与调节炎症介质TNF-α和IL-1β的表达及ERK和NF-κB/p65通路活性有关。

消退素D1预处理对肝缺血再灌注损伤大鼠模型的保护作用及机制

目的探究消退素D1(RvD1)对肝缺血再灌注(IR)损伤大鼠模型的保护作用及与血红素氧合酶-1(HO-1)之间的关系。方法Sprague-Dawley大鼠36只随机分为6组,分别为假手术(sham)+PBS组、sham+RvD1高剂量(10μg/kg)组、IR+PBS组、IR+RvD1(2μg/kg)低剂量组、IR+RvD1(5μg/kg)中剂量组和IR+RvD1(10μg/kg)高剂量组,每组6只。RvD1于缺血前1 h腹腔注射。生化仪测定ALT、AST水平,酶联免疫法检测血浆TNFα、IL-6、IL-8水平,HE染色观察肝组织学变化,Western Blot方法检测肝组织HO-1变化。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与IR+PBS组相比,IR+RvD1中剂量组和IR+RvD1高剂量组大鼠ALT、AST水平以及炎症因子TNFα、IL-6、IL-8水平均明显降低(P值均<0.05),且中、高剂量两组间比较差异均无统计学意义(P值均>0.05)。Western Blot结果显示IR+RvD1中剂量组和IR+RvD1高剂量组肝脏HO-1蛋白表达较IR+PBS组升高(P值均<0.05)。HE染色观察肝组织学变化显示,与IR+PBS组相比,IR+RvD1中剂量组和IR+RvD1高剂量组细胞肿胀及肝索排列紊乱依然存在,但未见明显大片坏死区域。结论RvD1可能通过增加肝脏HO-1表达,降低炎症因子(TNFα、IL-6、IL-8)和转氨酶(ALT、AST)水平,发挥对大鼠肝脏IR损伤的保护作用。

消退素D1对百草枯致急性肺损伤大鼠肺泡表面活性物质与巨噬细胞的影响

目的探讨消退素D1对于百草枯诱导的急性肺损伤大鼠体内肺泡表面活性物质水平和肺泡巨噬细胞功能的影响。方法将90只健康雄性SD大鼠完全随机分为3组:对照组(C组:生理盐水2.5 ml/kg、生理盐水2.5 ml/kg)、百草枯组(P组:百草枯60 mg/kg、生理盐水2.5 ml/kg)、消退素D1组(Rv组:百草枯60 mg/kg、消退素5μg/kg)。按照分组情况,每组分别给予规定量的生理盐水或百草枯灌胃造模,3 h后再给予规定量的生理盐水或消退素D1尾静脉注射。百草枯给药24 h后取大鼠肺脏组织,采用实时荧光定量PCR法检测其中肺泡表面活性蛋白A、B及C-m RNA的表达水平,采用BCA法测定肺泡灌洗液中总蛋白含量。采用体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞研究消退素D1对其功能的影响。结果 3组大鼠肺泡表面3种活性蛋白m RNA的表达差异有统计学意义,其中对照组大鼠肺泡表面活性蛋白的表达量最高,消退素D1组其次,百草枯组最低(P<0.05)。3组大鼠肺泡灌洗液中总蛋白含量差异均有统计学意义,其中消退素D1组大鼠灌洗液中总蛋白的含量最高,百草枯组其次,对照组最低(P<0.05)。加入百草枯的体外培养肺泡巨噬细胞的培养上清液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和乳酸脱氢酶(LDH)含量增加(P<0.05),同时,消退素D1可以降低由于百草枯导致的IL-6、TNF-α和LDH含量的增加(P<0.05)。结论消退素D1可通过促进肺泡表面活性蛋白表达、抑制巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α和LDH等炎症因子来达到治疗由百草枯导致的急性肺损伤的目的。

箍围药红肿消酊对皮肤脓肿大鼠血浆杀菌/通透性增加蛋白、消退素D1的影响

目的:观察箍围药红肿消酊外用对皮肤脓肿大鼠血浆内杀菌/通透性增加蛋白(BPI)、消退素D1(RvD1)表达的影响。方法:将40只大鼠分为空白组、模型组、对照组、预治疗组、治疗组,除空白组外,其余4组皮下注射金黄色葡萄球菌造成皮下脓肿模型,模型组生理盐水纱条换药,对照组在注射细菌3 d后出现硬肿立即百多邦外涂换药,预治疗组在注射细菌后4 h立刻红肿消酊2 mL换药,治疗组在注射细菌3 d后出现硬肿立即红肿消酊2 mL换药,药物范围超过肿胀范围1 cm,1次/d。分别于治疗3 d、7 d、14 d、18 d心脏取血2 mL,ELISA法检测血浆内BPI、RvDl的表达。结果:除空白组外,其他用药4组血浆内BPI、RvDl含量均有不同程度的增高。在治疗3 d、7 d应用红肿消酊的预治疗组血浆内BPI含量升高明显,治疗7 d时,预治疗组与模型组相比升高明显,差别有统计学意义[(247±27.89)vs(225±13.75)ng/L,P<0.05];治疗14 d、18 d血浆内BPI表达量逐渐下降,预治疗组与对照组相比血浆内BPI表达量明显下降的势态,[(193±30.41),(183±26.95)vs(217±19.28),(205±23.89)ng/L,P<0.05],血浆内RvDl含量的表达在治疗过程中呈现不断增长势态,治疗14 d时,预治疗组[(2.11±0.24)ng/mL]、治疗组[(2.10±0.23)ng/mL]与模型组[(1.76±0.20)ng/mL]相比血浆内RvDl含量表达呈增高的势态(P<0.05);治疗18 d时,预治疗组[(2.17±0.27)ng/mL]、治疗组[(2.27±0.26)ng/mL]与模型组[(1.74±0.19)ng/mL]相比血浆内RvDl含量表达明显增高(P<0.01)。结论:应用红肿消酊换药治疗大鼠皮肤脓肿,可有效提高血浆内BPI、RvDl的含量水平,从而起到止痛、抗炎、抑制水肿等作用,促进护场形成,加速疮面愈合。

消退素D1对牙周炎大鼠牙龈组织中IL-1β、IL-6表达的影响

目的:研究消退素D1(RvD1)对牙周炎大鼠牙龈组织中IL-1β、IL-6炎症因子表达的影响。方法:选取30只雄性SD大鼠,采用双侧上颌第二磨牙绑线法构建大鼠牙周炎模型。建模成功后,将大鼠随机分为5组(1个对照组和4个实验组)(n=6),并采用单次尾静脉注射法给药,4个实验组分别注射1、10、50、100 ng/mL的RvD1,对照组注射等量生理盐水。用药后4周处死所有大鼠,取其双侧上颌第二磨牙周围2 mm的牙龈组织,并制作石蜡切片后,用SP免疫组化染色法检测各组大鼠牙龈组织中IL-1β、IL-6的表达水平。结果:与对照组相比,50、100 ng/mL RvD1组均能明显抑制大鼠牙龈组织中IL-1β、IL-6的表达水平(P <0. 05); 10 ng/mL RvD1组仅明显抑制IL-1β的表达水平(P <0. 05),对IL-6无明显抑制作用(P> 0. 05);最低浓度(1 ng/mL) RvD1对上述两种炎症因子的表达均无影响。不同浓度RvD1对IL-1β的抑制作用依次为100 ng/mL> 50 ng/mL> 10 ng/mL> 1 ng/mL,各浓度组间两两相比均有统计学差异(P <0. 05)。结论:消退素D1可有效抑制牙周炎大鼠牙龈组织中IL-1β、IL-6的表达,且具有浓度依赖性。

消退素D1通过抑制p38 MAPK活化上调H_2O_2诱导心肌细胞HO-1表达的实验研究

目的探讨消退素D1(RvD1)对H2O2诱导状态下H9C2心肌细胞血红素氧合酶-1(HO-1)的调节作用及相关的分子机制。方法将大鼠心肌H9C2细胞分为对照组、消退素D1+H2O2组(Resolvin D1+H2O2组)和H2O2组3组,在200μM的H2O2干预6小时后使用RT-PCR法和western blot法对各组H9C2心肌细胞HO-1mRNA和蛋白的表达水平进行检测;并使用western blot法对H9C2心肌细胞p38 MAPK磷酸化水平(Phospho-p38 MAPK/total p38MAPK比值)进行测量。结果与对照组比较,在H2O2干预6小时后H9C2心肌细胞HO-1mRNA和蛋白的表达水平明显降低,而p38 MAPK磷酸化水平均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);但H2O2组较Resolvin D1+H2O2组HO-1mRNA和蛋白表达的降低以及p38 MAPK磷酸化水平的增加更加显著,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论本研究结果表明,在过氧化氢诱导的H9C2心肌细胞氧化应激和损伤过程中消退素D1可能是通过抑制P38 MAPK的活化上调了HO-1的表达,对心肌细胞有保护作用。

消退素D1改善2型糖尿病小鼠肝脏脂肪沉积

目的探讨消退素D1对2型糖尿病(T2DM)小鼠肝脏脂肪沉积的影响及其机制。方法30只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组(Con组)10只和高脂饮食组(DM组)20只,喂养8周后DM组小鼠腹腔注射链脲霉素制备T2DM小鼠模型,模型成功后从DM组随机选取10只小鼠给予消退素D1(RvD1)干预(DM+RvD1组),3周后测定胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。检测小鼠总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平,以及各组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6含量。免疫印迹实验测定肝脏组织中NF-κB p65、p-AKT、Foxo1、p-Foxo1水平。结果与Con组比较,DM组HOMA-IR升高(P<0.05);与DM组比较,DM+RvD1组HOMA-IR下降(P<0.05)。与Con组比较,DM组TG和TC水平均升高(P<0.05);与DM组比较,DM+RvD1组TG和TC水平下降(P<0.05)。与Con组比较,DM组肝组织NF-κB p65、Foxo1表达均升高(P<0.05);与DM组比较,DM+RvD1组NF-κB p65和Foxo1水平均下降(P<0.05),TNF-α和IL-6相应降低(P<0.05)。与Con组比较,DM组肝组织p-AKT和p-Foxo1表达下降(P<0.05);与DM组比较,DM+RvD1组两者升高(P<0.05)。结论RvD1的应用可抑制T2DM小鼠肝脏NF-κB激活,降低炎症反应,提升p-AKT水平并使磷酸化Foxo1升高缓解肝脏脂肪沉积。

消退素D1对转化生长因子β诱导的大鼠肺成纤维细胞纤维化增殖及胶原蛋白合成的抑制作用

目的探讨消退素D1对转化生长因子β(TGF-β)诱导的大鼠原代肺成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成以及向肌纤维母细胞转化的影响。方法分离和培养大鼠原代肺成纤维细胞,用TGF-β(10μg/L)干预建立成纤维细胞体外纤维化增殖模型,分别应用不同浓度(0、10、25、100μmol/L)消退素D1作用于经TGF-β诱导的肺成纤维细胞。采用BrdU细胞增殖试剂盒测定细胞增殖;采用实时定量聚合酶链反应测定mRNA表达;同时应用蛋白质印迹法检测肺成纤维细胞胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达。结果消退素D1能够抑制TGF-β诱导的肺成纤维细胞增殖且呈剂量依赖性,与TGF-β组[(156. 0±13.6)%]相比,TGF-β+消退素D1 10μmol/L组[(130.0±4. 6)%]、TGF-β+消退素D1 25μmol/L组[(118.0±5.2)%]、TGF-β+消退素D1 100μmol/L组[(99.0±12.6)%]细胞增殖均明显受到抑制(均P <0.01)。该抑制作用依赖于磷脂酰肌醇-3-激酶和消退素受体。消退素D1能够明显抑制TGF-β诱导的肺成纤维细胞的胶原蛋白合成及α-SMA表达(均P<0.01)。结论消退素D1抑制TGF-β诱导的大鼠肺成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成以及向肌纤维母细胞转化标记的表达。

消退素D1对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨消退素D1(resolvin D1,RvD1)对大鼠肝缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)的作用。方法实验动物随机分为假手术组(Sham组)、IR组、RvD1组和ZnPP组。自动生化仪检测氨基转移酶水平;苏木精-伊红染色观察肝组织学变化;髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)试剂盒测定MPO水平;实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)水平。结果与IR组相比,RvD1组大鼠ALT(P<0.05)、AST(P<0.01)明显降低,肝组织IRI减轻,肝内MPO活性降低(P<0.05),ICAM-1 mRNA表达下降(P<0.05)。而ZnPP组则与RvD1组表现相反。结论RvD1通过降低MPO活性及ICAM-1 mRNA表达发挥对大鼠肝IRI的保护作用,且可以被ZnPP所逆转。

消退素D1抑制NLRP3信号通路对DSS结肠炎小鼠的影响

目的探讨消退素D1(resolvin D1,RvD1)对实验性结肠炎小鼠肠道炎症的影响及可能机制。方法将C57BL/6小鼠分为4组,包括正常组、RvD1对照组、葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS)模型组、RvD1治疗组。实验结束后,分离小鼠小肠及结肠组织。测量疾病活动指数(DAI),病理学评分(HI),检测髓过氧化物酶(MPO)活性水平,伊文思蓝检测肠黏膜通透性,电镜检测肠上皮细胞连接及细胞因子水平。分析NLRP3炎症小体相关基因表达水平。结果与正常组小鼠相比,模型组DAI评分、HI评分、MPO活性水平,以及结肠组织匀浆中促炎细胞因子的产生明显增加(P<0.05)。RvD1组小鼠上述实验指标明显减低(P<0.05)。模型组小鼠结肠组织NLRP3炎症小体表达水平增加(P<0.05);RvD1处理1周,小鼠结肠组织NLRP3通路相关蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论 RvD1具有改善DSS结肠炎小鼠肠道炎症的作用,其机制可能与抑制NLRP3炎性体信号通路有关。

消退素D1治疗实验性大鼠牙周炎的研究

目的:探讨消退素D1(RvD1)对治疗牙周炎的作用。方法:取18只大鼠建立牙周炎模型,按随机化原则均分为实验甲组(100μg/L的RvD1),实验乙组(50μg/L的RvD1)及阴性对照丙组(生理盐水)。所有大鼠均经尾静脉注射给药进行治疗。治疗后不同时间进行临床检查和形态学测量。采用SPSS21.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:治疗后,实验甲组(100μg/L RvD1)中牙周袋深度、牙龈指数、松动度、牙槽骨丧失量均低于阴性对照组(P<0.05)。实验乙组(50μg/L RvD1)的以上4个指标虽均低于阴性对照组,但仅牙龈指数和松动度与阴性对照组的差异有统计学意义(P<0.05)。两实验组治疗后的牙周袋深度相近(P>0.05)。结论:两种浓度的RvD1对实验性大鼠牙周炎有治疗作用;100μg/L的RvD1可阻止实验性大鼠牙周炎的牙槽骨继续破坏。

消退素D1调节巨噬细胞自噬对实验性结肠炎小鼠的影响

目的探讨消退素D1对实验性结肠炎的保护作用及其可能机制。方法将小鼠随机分为正常对照组、RvD1对照组、模型对照组、RvD1给药组。以5%DSS溶液自由饮用的方法制备结肠炎模型,RvD1(50μg/kg)于第2、4、6天行小鼠腹腔注射。实验过程中进行疾病活动指数(DAI)评分;实验结束制备小鼠腹腔巨噬细胞并留取小鼠结肠组织。测定组织损伤指数(HI)、髓过氧化物酶(MPO)和细胞因子水平;电镜观察腹腔巨噬细胞自噬体结构;实时荧光定量PCR法、Western blot法检测Beclin-1、p62、LC3-Ⅱ、pro-IL-1β等相关标志物的表达水平并进行评价分析。结果相比模型对照组,RvD1给药组DAI评分、HI指数、MPO含量、促炎细胞因子含量降低(P<0.05)。小鼠腹腔巨噬细胞Beclin-1、LAMP-2、LC3-Ⅱ/LC3-I表达增加,iNOS、IL-1β、p62表达减低(P<0.05)。结论 RvD1具有改善实验性结肠炎作用,机制可能与调节巨噬细胞中的自噬受损有关。

PI_3K介导消退素D1上调脂多糖刺激的A549细胞钠离子通道

目的研究促炎症消退介质消退素D1(resolvin D1,RvD1)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的肺泡上皮A549细胞钠离子通道α亚基(epithelial sodium channelα-subunit,α-ENaC)和γ亚基(epithelial sodium channelγ-subunit,γ-ENaC)蛋白表达的影响并探讨其机制。方法不同时间点和不同剂量的LPS刺激A549细胞建立LPS刺激A549细胞模型。将A549细胞分为:空白对照组;LPS(1μg/ml)组;LPS+RvD1(100nmol/L)组;LPS+LY294002(10μmol/L)组。用Western blot检测A549细胞中α-ENaC和γ-ENaC蛋白表达及磷酸化的磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)水平。结果 LPS下调A549细胞α-ENaC和γ-ENaC蛋白表达,消退素D1抑制LPS对ENaC的下调作用,抑制LPS刺激的磷酸化PI3K。结论消退素D1通过下调磷酸化PI3K,抑制LPS对A549细胞α-ENaC和γ-ENaC蛋白表达的下调作用。

血浆脂氧素A4、消退素D1及保护素D1水平与冠心病严重程度及其临床预后相关性研究

目的探讨血浆脂氧素A4(LXA4)、消退素D1(RvD1)及保护素D1(PD1)水平与冠心病(CHD)严重程度的相关性及其对CHD临床预后的预测价值。方法选取CHD患者150例,依据病史及临床检查分为稳定性心绞痛(SAP)组、不稳定心绞痛(UAP)组和急性心肌梗死(AMI)组;依据冠脉病变支数分为单支、双支和三支病变组,并进行Gensini评分。对CHD患者进行随访,根据是否发生主要不良心血管事件(MACE),分为预后不良组和预后良好组;同时选取健康体检者26例为对照组。检测血浆LXA4、RvD1及PD1水平,分析它们与CHD临床类型、冠脉病变支数、Gensini评分及MACE发生率的相关性,评价其对CHD严重程度及临床预后的预测价值。结果(1)与对照组相比,SAP组、UAP组和AMI组血浆LXA4、RvD1及PD1水平降低(P<0.05)。与SAP组相比,UAP组血浆LXA4水平降低(P<0.05),血浆RvD1、PD1水平差异无统计学意义(P>0.05);AMI组血浆LXA4、RvD1及PD1水平降低(P<0.05)。与UAP组相比,AMI组血浆LXA4水平降低(P<0.05),RvD1、PD1水平差异无统计学意义(P>0.05)。(2)与对照组相比,单支病变组血浆LXA4、RvD1水平降低(P<0.05),血浆PD1差异无统计学意义(P>0.05);双支病变组血浆LXA4水平降低(P<0.05),血浆RvD1、PD1水平差异无统计学意义(P>0.05);三支病变组血浆RvD1、PD1水平降低(P<0.05),血浆LXA4水平差异无统计学意义(P>0.05)。单支病变组、双支病变组及三支病变组血浆LXA4、RvD1、PD1水平组间差异无统计学意义(P>0.05)。(3)血浆LXA4、RvD1及PD1水平与C反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)呈负相关(ρ=-0.263、-0.367;-0.247、-0.229;-0.251、-0.302;P<0.01),与白介素-10(IL-10)呈正相关(ρ=0.258、0.245、0.211,P<0.01)。血浆RvD1、PD1水平与Gensini评分呈负相关(ρ=-0.227、-0.229,P<0.01),LXA4水平与Gensini评分无相关性(ρ=-0.100,P>0.05)。多元逐步直线回归分析显示血浆LXA4、RvD1及PD1水平对Gensini评分影响较小。多因素逐步Logistic回归分析显示血浆PD1、IL-10水平是CHD的保护因素。(4)与预后不良组相比,预后良好组在随访3个月时血浆PD1水平升高(P<0.01)。结论血浆PD1水平能较有效地判断CHD患者临床严重程度,可能是CHD的保护因素,对CHD患者短期预后具有预测价值;血浆LXA4、RvD1上述价值较弱。

消退素D1通过甲酰肽受体2调控小胶质细胞极化改善大鼠脑缺血/再灌注损伤

目的探讨消退素D1(resolvin D1,RvD1)是否通过甲酰肽受体2(formyl peptide receptor 2,FPR2)调节小胶质细胞极化,减轻脑缺血/再灌注后的炎症损伤。方法运用线栓法建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,将造模后的大鼠随机分为模型组(MCAO),RvD1组和RvD1联合FPR2抑制剂Boc-2(RvD1+Boc-2)组,另设假手术(Sham)对照组。脑缺血后24 h,运用TTC染色法检测脑梗死体积和免疫荧光法检测髓过氧化物酶(MPO),免疫荧光双染法进行标记FPR2/Iba-1、CD16/Iba-1和CD206/Iba-1的表达,RT-qPCR法检测M1型释放的TNF-α、iNOS、IL-1β和M2型释放的Arg-1、TGF-β1、IL-10 mRNA的表达。结果RvD1明显减少脑梗死体积和MPO的表达,并且其受体FPR2在小胶质细胞上表达。RvD1降低M1型CD16+/Iba-1+细胞数和TNF-α、IL-1β、iNOS mRNA的表达,增加M2型CD206+/Iba-1+细胞数和TGF-β1、IL-10、Arg-1 mRNA的表达,联合使用FPR2抑制剂Boc-2后RvD1的这些作用都受到抑制。结论RvD1通过FPR2可以改善脑缺血/再灌注后炎症损伤,其作用与调控激活的小胶质细胞从M1型向M2型方向极化有关。

消退素D1(resolvin D1)抑制小鼠激活型小胶质细胞对PC12细胞的损伤及机制

目的探讨消退素D1(Rv D1)在小鼠活化BV-2小胶质细胞介导PC12神经元损伤中所起的作用及相关机制。方法BV-2细胞分为对照组、脂多糖(LPS)处理组、Rv D1联合LPS处理组和Rv D1组。各组BV-2细胞处理12 h、24 h,ELISA检测上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;收集以上各组细胞培养24 h的上清液培养PC12细胞24 h后,MTT法检测PC12细胞存活率,Western blot法检测各组BV-2细胞核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白的水平。结果与对照组比较,LPS处理的PC12细胞存活率降低,BV-2细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α的水平均升高,NF-κB p65核转位增加;而与LPS处理组相比,Rv D1联合LPS处理组PC12细胞存活率升高,BV-2细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量均降低,NF-κB p65核转位减少。结论 Rv D1可通过抑制NF-κB p65核转位,抑制LPS激活的BV-2细胞对PC12神经元的损伤。

消退素D1通过影响小胶质细胞代谢抑制神经炎症改善阿尔茨海默病认知功能

目的:观察消退素D1(reslovin D1,RvD1)对Aβ诱导的小胶质细胞炎性激活和代谢紊乱的影响以及对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)转基因小鼠认知功能的影响。方法:培养小胶质细胞株BV2,予以脂多糖(LPS)、淀粉样蛋白(amyloidβ,Aβ)和RvD1处理,使用RT-PCR方法观察Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(Nod-like receptor pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)炎症小体的表达,使用共聚焦显微镜观察细胞线粒体形态学改变。通过给予AD转基因小鼠腹腔内连续10 d注射RvD1 5 mg/(kg·d),分别使用免疫组织化学染色(IHC)、免疫荧光(IF)、实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法观察AD小鼠海马区NLRP3炎症小体通路、小胶质细胞标记物(Iba1)以及线粒体代谢调控相关因子的表达变化,并通过条件恐惧测试(FCT)探究其对于AD小鼠行为学的影响。结果:RvD1抑制了小胶质细胞NLRP3炎症小体激活。RvD1处理后小胶质细胞线粒体形态结构由异常的点状碎片状变为正常的条索状。RvD1治疗后,AD小鼠海马区NLRP3以及Iba1表达水平显著降低,同时线粒体代谢紊乱得到改善,并且认知功能得到恢复。结论:RvD1可能通过改善小胶质细胞线粒体代谢紊乱,抑制神经炎症,最终提高AD小鼠的认知功能。