基质金属蛋白酶-1在人涎腺腺样囊性癌细胞中的表达

目的:测定基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在人涎腺腺样囊性癌不同转移力细胞系中的表达。方法:以人涎腺腺样囊性癌ACC-2细胞系及其高转移株ACC-M作为研究肿瘤转移分子机制的模型,采用免疫组化法和蛋白印迹(Western blot)法检测MMP-1的蛋白表达水平。结果:MMP-1在ACC-M细胞中的表达水平高于ACC-2细胞。结论:MMP-1在人涎腺腺样囊性癌的侵袭转移过程中可能发挥作用。

姜黄素与β-榄香稀联用对涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-LM生长抑制和凋亡的协同作用

[目的]研究姜黄素与β-榄香稀联合对体外培养涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-LM生长抑制和凋亡的情况。[方法]应用MTT测定法、流式细胞术和透射电镜观察等方法观察姜黄素协同β-榄香稀(浓度比1∶1)诱导SACC-LM细胞凋亡率及凋亡方式。[结果]1)用MTT测定法,姜黄素协同β-榄香稀(浓度比1∶1)作用SACC-LM细胞24 h后,其抑制率有明显协同效应。2)联合用药对SACC-LM肿瘤细胞Caspase-3的表达阳性率为(46.2±3.2)%明显高于单独用药组。3)用流式细胞术,10μg/mL姜黄素与10μg/mLβ-榄香稀联合作用SACC-LM细胞24 h后诱导SACC-LM细胞发生凋亡,并将细胞周期阻滞于S期。4)用透射电镜观察,协同用药(浓度比1∶1)作用SACC-LM细胞24 h后,出现明显细胞凋亡特征。[结论]姜黄素和β-榄香稀(浓度比1∶1)联合应用可增强对SACC-LM细胞株的敏感作用,并诱导其产生凋亡,使其细胞周期阻滞于S期。

金环蛇毒体外对人类小涎腺腺样囊性癌细胞的抑制作用

目的:研究金环蛇(BANDED KRAIT)蛇毒体外抗人类小涎腺腺样囊性癌(NACC)细胞活性。方法:以不同浓度的金环蛇毒作用于NACC细胞,应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定细胞的增殖状态;应用细胞形态学分析细胞凋亡。结果:实验显示金环蛇毒对体外培养的NACC细胞有明显的抑制作用,与浓度和作用时间呈正比。HE染色观察到金环蛇毒作用NACC细胞后其形态发生改变。结论:金环蛇毒能抑制NACC细胞增殖并诱导其凋亡。

miR-455对Omi/HtrA2介导的人涎腺腺样囊性癌细胞株线粒体凋亡的影响

目的探讨过表达微小RNA-455(miR-455)对线粒体促凋亡分子丝氨酸蛋白酶(Omi/HtrA2)介导的人涎腺腺样囊性癌细胞株线粒体凋亡的影响。方法收集70例因原发病手术切除并经病理诊断为人涎腺腺样囊性癌患者的癌组织为人涎腺腺样囊性癌组,选取正常涎腺组织65例为对照组,无菌操作下取得的新鲜组织放入无菌冻存管后迅速投入液氮中快速冷冻,再转至-80℃冰箱长期保存,采用qRT-PCR法检测两组组织miR-455表达情况。体外培养人涎腺腺样囊性癌患者ACC-M细胞,利用miR-455mimics转染ACC-M细胞为miR-455 mimics组,采用国际通用的与所有基因无同源性序列的miR-455-NC转染为阴性对照组,以未经处理的ACC-M细胞为空白对照组,48 h后收集各组细胞。利用qRT-PCR法检测miR-455表达情况;MTT法检测ACC-M细胞增殖能力;利用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;免疫荧光检测细胞色素C释放情况;利用Western印迹检测免抗人增殖细胞核抗原(ki67)、Omi/HtrA2、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、caspase6蛋白表达情况。结果与对照组相比,人涎腺腺样囊性癌组miR-455表达显著降低(P<0.05);与空白对照组、阴性对照组比较,miR-455 mimics组ACC-M细胞中miR-455表达水平、细胞凋亡显著升高(P<0.05);miR-455 mimics组转染后48 h、72 h后OD值显著降低(P<0.05);与空白对照组、阴性对照组比较,miR-455 mimics组细胞色素C呈弥散性分布于细胞质中,围绕在细胞核周围且细胞色素C、线粒体平均光密度显著升高(P<0.05);miR-455 mimics组ACC-M细胞中ki67蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),Omi/HtrA2、caspase3、caspase6蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。结论过表达miR-455可促进人涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞凋亡,可能是通过激活Omi/HtrA2介导的线粒体凋亡途径而实现的。

眼镜蛇毒体外抗人类小涎腺腺样囊性癌细胞活性研究

目的:研究眼镜蛇毒(Cobra venom)体外抗人类小涎腺腺样囊性癌(NACC)细胞活性以及对细胞凋亡的影响。方法:以不同浓度的眼镜蛇毒作用于NACC细胞,应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定细胞的增殖状态;应用细胞形态学和流式细胞仪分析细胞凋亡。结果:实验显示眼镜蛇毒对体外培养的NACC有明显的抑制作用,与浓度和作用时间呈正比。用浓度2.0 mg/L的眼镜蛇毒处理癌细胞48 h后,试验组细胞凋亡率(52.4%)显著高于对照组(5.7%)。HE染色观察到眼镜蛇毒作用NACC细胞后其形态发生改变。结论:眼镜蛇毒能抑制NACC细胞增殖并诱导其凋亡。

广西眼镜蛇毒对人类小涎腺腺样囊性癌细胞株的抑制作用

目的研究广西眼镜蛇毒(guangxicobravenom)对人类小涎腺腺样囊性癌(NACC)细胞在体外生长的抑制作用。方法以不同浓度的眼镜蛇毒作用于NACC细胞,应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定细胞的增殖状态;应用细胞形态学和流式细胞仪观察细胞凋亡。结果实验显示眼镜蛇毒对体外培养的NACC有明显的抑制作用,与浓度和作用时间呈正比。用浓度2.0μg/mL的眼镜蛇毒处理癌细胞48h后,试验组细胞凋亡率显著高于对照组。HE染色观察到眼镜蛇毒作用NACC细胞后其形态发生改变。结论眼镜蛇毒能抑制NACC细胞增殖并诱导其凋亡。

姜黄素协同β-榄香烯诱导涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83凋亡的研究

[目的]研究姜黄素协同β-榄香烯诱导体外培养涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83凋亡的情况。[方法]应用MTT测定法、流式细胞术和透射电镜观察等方法观察姜黄素协同β-榄香烯(浓度比1∶1)诱导SACC-83细胞凋亡及其与G2/m期阻滞关系。[结果](1)应用MTT测定法,姜黄素协同β-榄香烯(浓度比1∶1)作用SACC-83细胞24 h后,其抑制率有明显协同效应。(2)流式细胞术分析,10μg/mL姜黄素与10μg/mLβ-榄香烯联合作用SACC-83细胞24 h后诱导SACC-83细胞发生凋亡,并将细胞周期阻滞于G2/m期。(3)透射电镜观察,协同用药作用SACC-83细胞24 h后,出现明显细胞凋亡特征。[结论]姜黄素和β-榄香烯(浓度比1∶1)对SACC-83细胞的抑制有协同作用,并诱导其产生凋亡,使其细胞周期阻滞于G2/m期。

线粒体在埃克替尼诱导涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M细胞凋亡中的作用

目的利用涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M细胞为模型,研究不同浓度埃克替尼(icotinib)对涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M细胞凋亡的影响以及线粒体在icotinib诱导ACC-M细胞凋亡中的作用。方法 icotinib和P53抑制剂(PFT)分别处理ACC-M细胞,应用噻唑蓝比色法检测细胞活性,利用Western blot法检测P53和胞质内细胞色素C(Cyt C)蛋白的表达变化,用Caspase-3凋亡相关蛋白活力检测ACC-M细胞的凋亡情况。结果 icotinib可抑制ACC-M细胞的活性,增加胞质Cyt C蛋白的表达和P53在线粒体的转位并诱导ACC-M细胞凋亡。用PFT预处理后,icotinib诱导ACC-M细胞的凋亡明显下降,线粒体蛋白P53的表达降低,胞质内Cyt C表达减少,Caspase-3凋亡相关蛋白活力下降。结论 icotinib可能通过诱导P53转位到线粒体进而促进ACC-M细胞凋亡。

TNP-470对人涎腺腺样囊性癌细胞增殖和凋亡的实验研究

目的 研究TNP 470对人涎腺腺样囊性癌细胞 (ACC M)的增殖抑制效应及凋亡诱导作用。方法 采用四氮唑盐还原法 (MTT法 )和台盼蓝拒染法 ,检测药物对ACC M细胞的增殖抑制作用 ;荧光染色观察细胞凋亡变化 ;琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状条带 ;流式细胞术检测细胞凋亡峰和细胞周期变化。结果 MTT法和台盼蓝拒染法显示 ,TNP 470对ACC M细胞的半数抑制浓度 (IC5 0 )分别为 40 .6 8μg/ml和 46 .38μg/ml;实验用药组荧光染色观察到细胞呈现凋亡特征 ,DNA电泳显示典型的梯状条带 ;流式细胞术检查有明显的凋亡峰出现 ,细胞周期主要阻滞在G2 /M期 ;实验用药组细胞凋亡率明显增高 ,与对照组有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 TNP 470对ACC M细胞体外直接杀伤作用不明显 ,但可诱导ACC M细胞体外凋亡 ,诱导凋亡可能是其抗肿瘤作用机制之一。

榄香烯对人涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞eIF4E及VEGF表达影响的研究

目的探讨β-榄香烯对体外培养的人涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞中真核细胞翻译启始因子(eIF4E)及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。方法将SACC-83细胞复苏培养24 h后分为6组:空白对照组,榄香烯60 mg/L、80 mg/L、100 mg/L、120 mg/L组,顺铂组,采用免疫细胞化学方法检测各组不同时点(12 h、24 h、48 h)SACC-83细胞中eIF4E和VEGF蛋白表达水平。结果β-榄香烯各组和顺铂组各时点与对照组比较,均下调人涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞中eIF4E及VEGF蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01),且均有时间、剂量依赖性。100 mgg/L、120 mg/L榄香烯组对SACC-83细胞中eIF4E及VEGF蛋白下调水平低于顺铂组(P<0.05)。结论β-榄香烯通过抑制SACC-83细胞的生长,遏制了肿瘤血管、淋巴管转移,为肿瘤靶向治疗提供了理论基础和实验依据。

埃克替尼通过p38-MAPK信号通路对涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞的凋亡诱导作用

目的:探讨埃克替尼对人涎腺腺样囊性癌细胞ACC-M凋亡的影响,阐明埃克替尼对涎腺腺样囊性癌的治疗作用机制。方法:ACC-M细胞随机分为对照组,2、4、8μmo1·L-1埃克替尼组,促分裂原活化蛋白激酶(APK)抑制剂SB203580(20μmol·L-1)组,SB203580(20μmol·L-1)+埃克替尼(4μmol·L-1)组。4h后收集细胞,采用MTT法检测各组ACC-M细胞的生长抑制率,用caspase-3活力检测试剂盒检测ACC-M细胞的凋亡情况(即caspase-3活力),采用Western blotting法检测p-p38-MAPK蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,埃克替尼组ACC-M细胞生长抑制率明显升高(P<0.05),caspase-3活力显著增强(P<0.05),p-p38-MAPK蛋白表达水平增加(P<0.05)。与4μmol·L-1埃克替尼组比较,SB203580+埃克替尼组p-p38-MAPK蛋白表达水平明显降低(P<0.05),caspase-3活力显著降低(P<0.05)。结论:埃克替尼可通过上调p-p38-MAPK信号的表达诱导ACC-M细胞凋亡。

基因表达谱芯片技术筛选涎腺腺样囊性癌ACC-2/BLM细胞耐药相关基因

目的:应用高通量基因芯片技术对涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-2及其多药耐药细胞株ACC-2/BLM的基因表达谱进行对比分析,筛选差异表达基因。方法:以涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-2及其耐药细胞ACC-2/BLM作为研究对象,提取mRNA,逆转录为cDNA,用Cy3和Cy5荧光染料标记,制备成cDNA探针,与表达谱芯片进行杂交扫描和分析;并应用Real-Time-PCR技术对其中6个基因进行验证。结果:在45 015个基因表达谱的筛选中,2 294个基因表达差异(2倍以上),其中1 310个基因表达水平上调,984个基因表达水平下调。使用RT-PCR和RealTime PCR技术对其中6个基因表达差异进行验证,验证结果与基因芯片结果一致。结论:涎腺腺样囊性癌ACC-2/BLM细胞耐药性与多个基因相关。

基因表达谱芯片技术筛选涎腺腺样囊性癌转移相关基因

目的:应用基因芯片技术对口腔涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-2及其肺高转移细胞株ACC-M的基因表达谱进行对比分析。筛选差异表达基因,以期从基因水平上探讨肿瘤转移机制。方法:以涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-2及其肺高转移细胞株ACC-M作为研究肿瘤转移分子机制的模型。提取mRNA,逆转录为cDNA,用Cy3和Cy5荧光染料标记,制备成cDNA探针,与表达谱芯片进行杂交扫描和分析;并应用RT-PCR技术对其中7个基因进行验证。结果:在1152个基因表达谱的筛选中,26个基因表达差异(2倍以上),其中19个基因表达水平上调,7个基因表达水平下调。RT-PCR技术对其中7个基因表达差异的验证结果与基因芯片结果一致。结论:基因芯片筛选发现其中2.3%的基因可能与涎腺腺样囊性癌细胞转移侵袭相关。

Tip30基因修饰的ACC-M细胞裸鼠体内致瘤性观察

目的:观察肿瘤抑制基因Tip30修饰后的人涎腺腺样囊性癌高转移细胞(ACC鄄M)所致裸鼠移植瘤体内生长的变化。方法:BALB/Cnu/nu鼠30只(4周龄,体重18￣20g),随机分3组,各10只;Tip30基因修饰的ACC鄄M细胞(AdTIP30/ACC鄄M)、野生型ACC鄄M细胞(wt/ACC鄄M)及对照基因LacZ修饰的ACC鄄M细胞(AdLacZ/ACC鄄M)分别注射小鼠颌下区皮下,观察肿瘤生长情况及小鼠存活时间。结果:(1)经TIP30基因修饰组肿瘤出现的时间比野生型对照组及基因对照组晚3d,且肿瘤生长缓慢(P<0.01);(2)存活时间显示,基因修饰组(53.0±3.3)d,有2只长期存活;野生型对照组(26±2.2)d;对照基因组(29±2.4)d。结论:抑癌基因Tip30能够显著抑制人涎腺腺样囊性癌细胞在裸鼠体内的生长,延长荷瘤小鼠存活期。

涎腺疾病

涎腺肿瘤中hTERTmRNA表达的研究；PCNA在db／db自发性糖尿病小鼠颌下腺的表达；Genistein对涎腺腺样囊性癌细胞生长及Survivin表达的影响；力学刺激对人腺样囊性癌高低转移细胞株中E-cad／cat复合体的影响；DNA

涎腺疾病

保留腮腺咬肌筋膜的腮腺切除术；P70 S6激酶在腮腺腺泡细胞癌中表达的研究；舌下腺囊肿口外型27例诊断与治疗；Bax促凋蛋白在抗DDP的人涎腺腺样囊性癌细胞中的表达；