涤痰活血舒痹汤上调microRNA-148a表达减轻心肌缺血再灌注损伤的分子机制研究

目的探究涤痰活血舒痹汤(DHS)与microRNA-148a(miR-148a)的调控关系以及其在心肌缺血再灌注损伤中的分子作用机制。方法将H9c2细胞培养后分为对照组、缺氧/复氧(H/R)组、H/R+空白血清组、H/R+DHS含药血清组、H/R+DHS含药血清+miR-148a拮抗剂组、H/R+DHS含药血清+OE-NC组和H/R+DHS含药血清+硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)过表达质粒组。采用CCK-8检测H9c2细胞增殖,TUNEL染色检测H9c2细胞凋亡,Western blot检测H9c2细胞凋亡和自噬相关蛋白及靶蛋白TXNIP的表达,qRT-PCR检测miR-148a的表达。结果与对照组比较,H/R组H9c2细胞活力下降[(69.72±8.80)%比(97.75±5.58)%,P<0.01]、细胞凋亡和自噬水平上升。与H/R+空白血清组比较,H/R+DHS含药血清组miR-148a表达上调[(2.45±0.39)比(1.04±0.25),P<0.01],H9c2细胞活力增加[(135.98±10.45)%比(97.75±7.94)%,P<0.01]并且细胞凋亡和自噬显著下降。H/R+DHS含药血清+miR-148a拮抗剂组细胞内miR-148a表达下调[(0.66±0.12)比(2.18±0.25),P<0.01],同时靶基因TXNIP表达上调。与H/R+DHS含药血清+OE-NC组比较,H/R+DHS含药血清+TXNIP过表达质粒组的H9c2细胞活力下降[(113.68±7.85)%比(133.52±7.24)%,P<0.05],TXNIP表达、细胞凋亡和自噬水平显著上升。结论DHS能减轻H/R引起的心肌H9c2细胞的损伤,其作用机制可能与上调miR-148a表达水平,下调TXNIP表达水平,从而降低损伤的心肌细胞自噬和凋亡水平有关。