微量液体培养硅胶显色法快速检测结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性

目的建立用24孔微量液体培养硅胶显色板对结核分枝杆菌(MTB)吡嗪酰胺(PZA)药物敏感性判断的方法,并评价该方法临床应用价值。方法以MGIT960药敏结果作为标准对照,应用硅胶显色板对30株已知PZA药敏结果 MTB临床分离株进行PZA药敏检测,观察不同pH值,不同接种浓度对其结果的影响,并对最佳检测条件进行探讨。最后应用硅胶显色板和MGIT960同时对98株未知PZA药敏结果的MTB临床分离株进行检测,判断灵敏度、特异度、准确度。结果 24孔微量液体培养显色板,液体培养基最佳pH值为5.8~5.9,最佳接种菌量为2.5×10-1 mg/mL,7~14d即可报告结果。PZA临界浓度100μg/mg时灵敏度达95.50%,特异度为96.30%,准确度为98.21%;PZA临界浓度200μg/mg时灵敏度均可达90.90%,特异度为92.59%,准确度为91.84%。结论使用24孔微量液体培养硅胶显色板能对MTB的PZA药物敏感性进行快速鉴定,结果准确度高,操作简便,成本低廉。

微量液体培养基最低抑菌浓度法与罗氏比例法在结核分枝杆菌药敏试验中的价值比较

目的比较微量液体培养基最低抑菌浓度(MIC)法与罗氏比例法在结核分枝杆菌药敏试验中的临床价值。方法以100株结核分枝杆菌菌株(由辽宁省结核实验室提供)为研究样本,分别采用罗氏比例法与微量液体培养基MIC法检测结核分枝杆菌的药物敏感性。结果微量液体培养基MIC法与罗氏比例法检测结核分枝杆菌对乙胺丁醇、二卡那霉素、利福平、异烟肼、氧氟沙星、卷曲霉素药物的敏感性比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论微量液体培养基MIC法应用于结核分枝杆菌药敏试验中与罗氏比例法有着良好的一致性,且检测速度快,经济适用性好,能够为临床指导结核病用药提供帮助。

小儿ALL细胞极限稀释液体微培养及微小残留病的检测

首次用ＣＦＵ－ＡＬＬ极限稀释液体微培养法，对１６例初诊，１４例ＣＲ期ＡＬＬ骨髓进行培养，并用８例正常，１１例再生骨髓作为ＣＦＵ－ＡＬＬ阴性对照。结果显示：初诊Ｂ系ＡＬＬ骨髓以重叠型集落伴ＣＤ（１０＋）细胞＞２０％为特点；初诊Ｔ－ＡＬＬ集落也属重叠型（ＣＤ（２＋）、ＣＤ（３＋）、ＣＤ（７＋））．而正常和再生骨髓虽形成集落，但为平展型或伴重叠型集落（ＣＤ（１０＋）＜２０％、以ＣＤ（１５＋）、ＣＤ（３３＋）细胞为主）。本文１４例ＣＲ期ＡＬＬ中，７例有重叠型集落（ＣＤ（１０＋）细胞＞２０％）；临床随访１年半，５例骨髓相继复发，１例诊断为睾丸白血病。

基于微量液体培养基间接评估鼠疫噬菌体生长方法的建立

目的利用微量液体培养基建立评估鼠疫噬菌体生长的方法,为今后鼠疫噬菌体的分离、宿主谱鉴定、生物学特性研究等提供技术依据。方法利用OmniLog TM微生物鉴定系统,检测微生物细胞对不同碳源呼吸代谢导致的显色反应和微生物生长造成浊度差异的原理,采用微量液体培养法检测诊断用鼠疫噬菌体在2株鼠疫耶尔森菌(鼠疫弱毒菌EV76、614F)和4株非鼠疫耶尔森菌(假结核耶尔森菌PTB3、PTB5、大肠杆菌V517、小肠结肠炎耶尔森菌52302-2)的生长情况。结果实验菌株及诊断用鼠疫噬菌体混合物经OmniLog TM微生物鉴定系统33℃作用48h,以鼠疫疫苗株EV76、鼠疫弱毒菌614F为试验菌,试验行孔的生长曲线呈一条横线,且细菌浓度对数值不超过100;四唑类染料的颜色随着噬菌体数量的减少和宿主菌数量的增多逐渐加深,表明诊断用鼠疫噬菌体能感染鼠疫弱毒菌EV76和614F。以假结核耶尔森菌PTB3、PTB5、大肠杆菌V517、小肠结肠炎耶尔森菌52302-24株非鼠疫耶尔森菌为试验菌,每行6孔均呈现几乎相同的对应试验菌株的S型生长曲线,说明诊断用鼠疫噬菌体不能感染对应行的试验菌株。利用OmniLog TM微生物鉴定系统检测诊断用鼠疫噬菌体对6株试验菌株的灵敏度,结果与液体培养基和半固体培养基的常规检测结果一致。结论成功建立基于OmniLog TM微生物鉴定系统的微量液体培养基间接检测鼠疫噬菌体生长的方法,评估鼠疫噬菌体对宿主菌的敏感度,是一种经济、灵敏、准确的鉴定方法。