液氮低温保存对大鼠主动脉平滑肌细胞和成纤维细胞MHC抗原无影响

目的 探讨液氮低温保存对同种异体主动脉移植物抗原性的影响 .方法 采用细胞培养技术和流式细胞仪技术研究液氮低温保存对大鼠主动脉平滑肌细胞和成纤维细胞主要组织相容性抗原 类 (MHC 类抗原 )表达的影响 .建立大鼠同种异体主动脉移植模型 ,采用免疫组织化学实验研究新鲜主动脉和低温保存的主动脉同种异体移植后 MHC 类抗原和 MHC 类抗原表达的区别 .结果 正常培养的大鼠主动脉平滑肌细和成纤维细胞 MHC 类抗原表达的阳性率分别为 (88.7± 4.3) %和 (84.8± 2 .0 ) % ;液氮低温保存的大鼠主动脉平滑肌和成纤维细胞在复苏后 MHC 类抗原表达的阳性率分别为 (89.4± 3.5 ) %和 (81.9± 2 .7) % .统计学分析表明大鼠主动脉平滑肌细胞和成纤维细胞的 MHC I类抗原表达在液氮低温保存前后无显著性差别 .免疫组织化学实验研究表明新鲜主动脉和低温保存的主动脉同种异体移植后MHC 类抗原和 MHC 类抗原表达无显著的差异 .结论 液氮低温保存对大鼠主动脉平滑肌细胞和成纤维细胞

伯氏疟原虫液氮低温保存不同处理方法的效果比较

疟原虫低温保存是疟疾研究的常用实验手段之一。目前在红内期疟原虫低温保存的常规方法中，一般用抗凝的感染血经离心弃血浆后，加等量的２４％二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）作保护剂。此方法虽然效果不错，但仍然不够简便，而且在进行体外培养时，还必须将ＤＭＳＯ洗去。为了简...

自体颅骨瓣腹壁包埋与液氮低温保存颅骨成形术的比较

目的探讨腹壁包埋颅骨瓣与液氮低温保存颅骨瓣颅骨成形术效果的优缺点。方法第一次手术去骨瓣减压时,随机将颅骨瓣分为腹壁包埋和液氮低温保存两种方式,颅骨成形术时对两种保存颅骨瓣的方法进行比较。结论液氮低温保存颅骨瓣优于腹壁包埋者。

微生物液氮超低温保存研究进展

菌种保存是微生物研究中的一项基础工作。在-196℃下活细胞物质代谢和生长几乎完全停止,液氮超低温保存使微生物的长期稳定保存成为可能。作者就影响乳酸菌、酵母菌、微藻、原生动物液氮超低温保存存活率的因素进行了讨论。此外,作者还讨论了液氮超低温保存中还存在的一些问题。

液氮超低温保存放线菌条件研究

用6种保护剂对28株放线菌和小单孢菌进行液氮超低温保存。保存3年4个月其存活率均达100％。拮抗性检查结果表明，肉汤和龙眼蜜保护剂对小单孢菌，牛奶保护剂对放线菌保护效果显著，保存前后其拮抗性无明显变化。

成年大鼠心室肌细胞的超低温液氮保存分离法

介绍运用液氮冻存的大鼠心室肌来分离心室肌细胞的具体方法,并初步分析了该方法的机理、科学性、实用性。认为该方法具有无需特殊昂贵设备、简单易行、消耗低廉、耗时短、适于大样本研究的特点,可望成为一种基础的实验方法。

九里香种子超低温保存研究

研究旨在探索适于九里香(Murraya exotica L.)种子的液氮超低温保存条件,为采用液氮超低温保存方法长期保存九里香种子提供依据。以九里香成熟种子为材料,采用快速干燥法获得不同含水量的种子,分别用玻璃化法、分步冷冻法和直接冷冻法对其进行液氮超低温保存,结合石蜡切片法观察种子显微性状,并测定种子生理生化活性指标。结果发现,种子含水量由30%降至7%,其对照组生活力由98%缓慢降至82%;经不同冷冻方法处理后其生活力随含水量的降低呈先降后升的趋势,在含水量7%时各冷冻组生活力均升至最高,且此时冻存前后生活力最接近;分步冷冻处理后的种子生活力普遍高于玻璃化冷冻和直接冷冻处理;含水量18%~30%时种子分步冷冻处理后切面颜色较其他组偏深,含水量30%的种子分步冷冻处理后部分细胞出现空腔或较严重的质壁分离,含水量7%的种子经不同冷冻处理后其活力和结构与对照组相比基本无变化;分步冷冻处理后种子丙二醛含量、蛋白质含量、过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性下降,脱氢酶活性升高。九里香种子可用液氮超低温保存,采用含水量为7%的种子分步冷冻处理为佳。

酒酒球菌液氮超低温保存

【目地】为安全、长期的保藏酒酒球菌,本文研究了菌体生长时间、冷冻方法、解冻温度、菌密度以及保护剂等对酒酒球菌细胞冷冻存活率的影响,找到最优液氮超低温保存方法。【方法】采用平板计数法测定冷冻存活率。【结果】实验结果表明酒酒球菌的最佳保存方法为:首先在稳定期前期离心收集菌体;其次加入保护剂(20 g/L酵母浸提物,40V/V甘油,20 g/L蔗糖,30 g/L谷氨酸钠)稀释菌体,使菌密度为109CFU/mL;然后直接投入液氮冷冻;最后在37℃温水浴中迅速解冻。保存6个月后,其中21株酒酒球菌的冷冻存活率达到99%以上。【结论】初步研究表明酵母浸提物,甘油,蔗糖,谷氨酸钠复合保护剂对酒酒球菌的保护效果较好,液氮超低温保存可用于酒酒球菌的长期保存。

细胞快速、简易冻存法

将PK-15和ST细胞通过普通冰箱冷藏室(4℃)15分钟;普通冰箱冷冻室(-4℃)5分钟;低温冰箱(-20℃)20分钟;气态液氮30分钟后沉入液氮中,经一段时间后复苏,冻存细胞状态良好,全部冻存过程在70分钟内完成,比常规冻存方法节省时间,简便易行。

同种瓣的制作与临床应用

目的报告液氮深低温下保存同种带瓣血管的制作方法、组织活性及临床应用效果。方法制作同种瓣24个、抗生素灭菌、梯度降温后置于液氮中保存,并测定冷冻保存后同种瓣的组织活性。同种瓣临床应用5例,其中法洛四联症、肺动脉闭锁2例,先天性主动脉瓣狭窄1例,法洛四联症术后发生室间隔缺损残余漏伴肺动脉瓣重度关闭不全1例,Bentall术后发生感染性心内膜炎1例。结果抗生素灭菌、液氮深低温技术保存同种瓣具有良好的组织活性,糖代谢测定24h葡萄糖消耗大于16mg/dl,组织培养见成纤维细胞生长良好。临床移植5例均成功,术后随访3～8个月,同种瓣无狭窄或关闭不全。结论液氮深低温保存同种瓣安全可靠,临床应用早期效果良好。

同种带瓣管道在左右室流出道病变矫治中的应用

目的 总结和探讨应用同种带瓣管道(CVH)纠治左右室流出道病变的临床经验。方法采用液氮深低温保存技术制备CVH，应用于11例患者，年龄8～44岁(平均25岁)，病种包括感染性心内膜炎(IE)8例，复杂先天性心脏病3例。结果 手术死于低心排出量综合征1例。随访1．0—6．5年，晚期死亡2例，与感染有关，其余疗效满意。结论CVH具良好的血液动力学效果，瓣膜功能正常，是人工合成管道理想的替用品。