NaCl胁迫下大麦根系液泡膜H^+-ATP酶活性受ATP和焦磷酸含量的调节(英文)

选用两个耐盐性强弱不同的大麦(Hordeumvulgare L. )品种, 研究了NaCl胁迫下其幼苗根中ATP和焦磷酸(PPi)含量的变化以及PPi对液泡膜H+-ATP酶活性的影响。结果表明:在含NaCl 200mmol/L的1/2 Hoagland 溶液中处理2 d,耐盐品种(滩引2号)根中液泡膜H+‐ATP酶活性增加,然后逐渐下降,而H+-PPi酶活性在NaCl处理9 d中一直下降。盐敏感品种(科品7号)在NaCl胁迫下根中H+-ATP酶和H+-PPi酶活性都下降(图1)。与对照相比较,NaCl 胁迫下耐盐品种根中ATP含量2 d时增加,4 d后下降;盐敏感品种根中ATP积累受NaCl胁迫的抑制(图2)。NaCl胁迫下,两品种的PPi含量皆略有增加(图3)。PPi对液泡膜H+-ATP酶活性有竞争性抑制作用(图4)。结果表明:ATP积累是NaCl胁迫下液泡膜H+-ATP酶活性增加的原因之一,NaCl胁迫下大麦品种根中ATP含量下降和PPi对液泡膜H+-ATP酶的抑制使该酶活性下降。

NaCl胁迫对小麦抗盐突变体根液泡膜H^+ ATP酶和H^+ PP酶活性的影响

随着盐胁迫强度（ ＮａＣｌ ０ ～１５０ｍ ｍｏｌ／Ｌ） 和时间（０ ～７２ ｈ） 的增加，小麦抗盐突变体根液泡膜Ｈ＋ＡＴＰ 酶和Ｈ＋ＰＰ 酶活性显著增加，虽然野生型酶活性在盐胁迫下也有增加，但其增加的幅度显著低于突变体，Ｈ＋ＰＰ酶活性的差异更为显著。Ｈ＋ＡＴＰ酶和Ｈ＋ＰＰ酶的最适ｐＨ 值在两者之间以及盐胁迫前后均无改变，分别为７ ．０ 和８ ．０ 。无盐胁迫下野生型液胞膜５８ ｋＤ 蛋白带缺失，盐胁迫下这一蛋白有微弱的表达。与此不同，突变体５８ ｋＤ 蛋白在盐胁迫前后均有明显的表达，但其２９ ｋＤ 蛋白带在无盐胁迫下明显减弱。

铝胁迫对小麦根系液泡膜ATP酶、焦磷酸酶活性和膜脂组成的效应

研究了铝胁迫下耐铝性不同的两个小麦品种根细胞液泡膜ＡＴＰ 酶、焦磷酸酶活性和膜脂的变化。与对照相比，经２０ 和１００μｍｏｌ／Ｌ的ＡｌＣｌ３ 处理后，耐铝品种Ａｌｔａｓ ６６ 的液泡膜Ｈ＋ＡＴＰ 酶和Ｃａ２＋ＡＴＰ 酶活性迅速下降； 铝敏感品种Ｓｃｏｕｔ ６６ 液泡膜Ｈ＋ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋ＡＴＰ 酶活性则在２０ μｍｏｌ／Ｌ 时增加，１００ μｍｏｌ／Ｌ时下降。焦磷酸酶活性在Ａｌｔａｓ６６ 中下降，在Ｓｃｏｕｔ ６６ 中增加。与对照相比，在ＡｌＣｌ３ ２０ μｍｏｌ／Ｌ处理时，液泡膜磷脂含量增加，Ａｌｔａｓ ６６ 中的增加比Ｓｃｏｕｔ ６６ 更为明显；１００ μｍｏｌ／Ｌ 时，Ｓｃｏｕｔ ６６ 液泡膜磷脂含量迅速下降，而Ａｌｔａｓ ６６ 下降不显著。两品种小麦在铝处理后根液泡膜糖脂结合半乳糖含量均高于对照，而Ａｌｔａｓ ６６ 中的含量又高于Ｓｃｏｕｔ６６ 。铝处理后，两品种小麦根液泡膜的棕榈酸和油酸含量增加，亚麻酸含量下降， 不饱和指数也随之下降，其中Ｓｃｏｕｔ６６ 下降更为明显。表明Ａｌｔａｓ ６６ 根细胞液泡膜比Ｓｃｏｕｔ６６ 对铝胁迫有更强的适应能力。

铝和铝+钙对小麦幼苗根尖质膜、液泡膜微囊ATP酶和膜流动性的影响

研究了铝和铝 +钙对小麦幼苗根尖质膜、液泡膜微囊H+ ATP酶、Ca2 + ATP酶、Mg2 + ATP酶活性及其动力学参数和膜流动性的影响。在质膜和液泡膜微囊制剂中加入 1.0mmol/L的Al3+(AlCl3)时 ,H+ ATP酶、Ca2 + ATP酶、Mg2 + ATP酶活性和酶促反应的Vmax及膜流动性下降 ,而酶促反应的最适pH和Km 均不受影响。提高酶促反应介质的Ca2 +(CaCl2 )浓度可以缓解Al3 +对膜ATP酶活性和膜流动性的影响。推测Al3

水稻液泡膜H^+-ATPase诱导性冷失活机制研究

以水稻液泡膜Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ为研究对象，探讨了造成诱导性冷失活现象的机制．运用ＭＣ５４０荧光对诱导性冷失活过程中的膜脂状态研究表明，冷失活处理后膜脂的有序程度大幅度下降（ＭＣ５４０荧光发射增强５６％），并且通过与常温下诱导物（Ｍｇ２＋、ＡＴＰ）扰动膜脂的效应比较，证明诱导物在冷失活条件下能诱导膜脂有序性迅速丧失，其后才出现酶活丧失．根据实验结果和膜脂－膜蛋白相互作用关系。

液泡膜H^+-PPase及其对逆境胁迫的反应

概述了液泡膜Ｈ~＋-ＰＰａｓｅ的分子组成、生化性质、生理功能及该酶对逆境的响应。

空泡膜类型H^+-ATPase的研究进展

真核细胞内空泡细胞器,如高尔基体、内质网、溶酶体等,膜上存在的质子泵ATPase 与线粒体类型的质子泵 ATPase 类似.近几年对该类型 H^+-ATPase 的结构、作用机制进行了深入的研究,证明这是一类新型质子泵,在进化的过程中与线粒体类型的 H^+-ATPase 有密切的亲缘关系.

急性冷暴对大鼠肝线粒体H+转运ATP酶及膜流动性的影响

目的：为进一步探讨急性冷暴过程中肝线粒体功能的变化．方法：观察雄性大鼠在室温（１８℃），冷暴（－１０℃）１５ｍｉｎ，６０ｍｉｎ和６０ｍｉｎ后室温１５ｍｉｎ时肝亚线粒体膜流动性，Ｈ＋转运ＡＴＰ酶活性及其对寡霉素敏感性的变化．结果：大鼠在冷暴１５ｍｉｎ时，膜流动性即开始降低（０．２５０±０．００５对０．２５７±０．００５），Ｈ＋转运ＡＴＰ酶活性及其对寡霉素的敏感性也明显下降［（７．６７±１．００）对（６．５９±１．００）μｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｍｇ），（９８．９３±１．４４）对（９６．２３±１．１０）％］，在冷暴６０ｍｉｎ时，三项指标下降更明显，室温恢复１５ｍｉｎ后，三项指标仍保持在较低水平．结论：冷应激可以导致肝线粒体Ｈ＋转运ＡＴＰ酶活性的降低，降低的原因可能是冷应激导致的肝线粒体内膜流动性下降，引起了Ｈ＋转运ＡＴＰ酶结构的变化，进而影响酶的活性．

冷胁迫对水稻幼苗根系液泡膜质子泵的伤害及钙的调节作用

选用耐冷性不同的两个水稻品种 ,研究了在低温下幼苗根系活力、液泡膜质子泵活性的变化及外源钙的调节作用。结果表明 ,8℃低温处理的水稻幼苗根系活力降低 ,随着胁迫时间的延长 ,伤害进一步发展 ,抗冷性弱的汕优 6 3比抗冷性强的武育粳 3号伤害严重。 8℃处理 7d内 ,两品种根系V ATPase (液泡膜H+ ATP酶 )和汕优 6 3V PPase (液泡膜H+ 焦磷酸酶 )活性持续下降 ,而武育粳 3号V PPase在前 3d内活性上升 ,5d后才呈下降态势。根系在低温下维持较高的V PPase活性 ,可能是水稻耐冷的原因之一。 8℃低温处理外加 2 0～ 40mmol/LCa (NO3) 2

液泡膜ATP酶亚基的N末端结构域与巨噬细胞集落刺激因子协同极化巨噬细胞影响胃癌细胞的增殖能力

目的探讨液泡膜ATP酶亚基的N末端结构域（a2NTD）和巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）对巨噬细胞极化的协同作用，以及极化的巨噬细胞对胃癌细胞增殖能力的影响。 方法分离健康人外周血单个核细胞，诱导培养巨噬细胞后分为4组：对照组（RPMI1640），实验Ⅰ组（M-CSF 100 ng/ml），实验Ⅱ组（a2NTD 500 ng/ml）和实验Ⅲ组（a2NTD 500 ng/ml加M-CSF 100 ng/ml），刺激48 h后应用双重免疫荧光标记法检测巨噬细胞膜表面抗原的表达，用ELISA法检测细胞因子IL-10和IL-12的分泌情况，并用CCK-8法检测巨噬细胞对胃癌SGC-7901细胞增殖能力的影响。 结果巨噬细胞膜表面抗原CD68在4组巨噬细胞膜上均有表达（＋），平均吸光度值（MD值）分别为：对照组0.092±0.005，实验Ⅰ组0.095±0.006，实验Ⅱ组0.094±0.005，实验Ⅲ组0.094±0.005 ，4组比较，差异无统计学意义（P〉 0.05）。CD206在对照组弱表达（-），MD值为0.025±0.004；在实验Ⅰ组和实验Ⅱ组均有表达（＋），MD值分别为0.191±0.012和0.197±0.136，在实验Ⅲ组超强表达（＋＋＋），MD值为0.285±0.011；除实验Ⅰ组与实验Ⅱ组比较差异无统计学意义（P〉 0.05），其余各组两两比较，差异均有统计学意义（均P〈 0.01）。实验Ⅰ组和实验Ⅱ组细胞分泌IL-10水平分别为（85.65±13.64） ng/L和（87.77±14.25）ng/L，均高于对照组[（71.67±7.56）ng/L，P 〈 0.01] ；分泌IL-12水平分别为（9.91±1.50）ng/L和（10.15±1.80）ng/L，均低于对照组[（16.87±1.10）ng/L，P〈 0.01]。实验Ⅲ组分泌IL-10水平为（116.98±14.27）ng/L，高于其余各组（均P〈 0.01）；分泌IL-12水平为（5.31±0.88）ng/L，低于其余各组（均P〈 0.01）。析因分析显示，在对IL-10和IL-12分泌量的影响上，a2NTD和M-CSF具有交互效应（均P 〈0.05）。各组巨噬细胞均能加快胃癌SGC-7901细胞的增殖，且实验Ⅲ组巨噬细胞对胃癌SGC-7901细胞增殖速度的促进作用明显强于其他各组（均P〈 0.01）。 结论a2NTD与M-CSF在促使巨噬细胞极化及细胞因子分泌上具有协同作用，协同极化的巨噬细胞能明显增强胃癌细胞增殖能力。

硒对盐胁迫下耐盐常夏石竹生物量和渗透物质含量的影响

培养基中加施适量外源硒能够显著提高能耐盐的常夏石竹生物量,过氧化物酶(POD)活性,K^+/Na^+比值,K^+、Na+、叶绿素和游离脯氨酸含量;降低质膜透性和可溶性糖含量;植株叶细胞质膜和液泡膜V-H+-ATP酶的活性增加。

过量表达马蔺VP基因增强烟草抗旱耐盐性研究

干旱与土壤盐渍化已成为限制植物生长的重要影响因素。液泡膜H^+焦磷酸酶(V-H^+-PPase)具有质子泵功能,在植物抗旱耐盐中起重要作用。本研究将课题组得到的转马蔺IlVP(V-H^+-PPase)基因烟草植株(T3和T18)进行不同浓度NaCl处理和干旱胁迫,并以野生型烟草W38(WT)为对照,通过对其生长和生理指标的测定分析,结果显示,在NaCl或干旱处理下,转基因烟草T3和T18植株干重、叶面积、叶片相对含水量和水分利用效率均高于野生型WT植株,其中200mmol·L^(-1) NaCl处理下T18干重、叶面积、叶片相对含水量和水分利用效率分别是W38的2.46、1.69、1.08和3.84倍,干旱处理下T18的各项指标分别是野生型的1.52、1.17、1.07和1.41倍。转基因和野生型植株的叶片质膜透性均随NaCl浓度增加或干旱处理而有所升高,但转基因植株的增量明显低于野生型。转基因及野生型植株根、茎、叶中的Na^+含量均随NaCl浓度升高或干旱处理而增加,而K^+含量呈逐渐降低趋势,但转基因T3和T18烟草根、茎、叶中的Na^+和K^+含量均高于野生型WT。这说明NaCl和干旱胁迫下过量表达IlVP可增强烟草的液泡离子区域的能力,降低Na^+对细胞质的毒害,进而保护膜的完整性,提高烟草的抗旱性和耐盐性。

GmVP1基因克隆与转GmVP1/GmNHX1双价基因的大豆发状根耐盐性分析

将Na^+外排和区隔化作用的Na^+/H^+逆向转运蛋白(NHX)的基因和能够为其提供跨液泡膜H^+梯度驱动力的液泡膜H^+-焦磷酸酶(VP)的基因共转化能够提高植物耐盐性。本研究从抗盐大豆品种‘冀豆7号’中克隆得到液泡膜H^+-焦磷酸酶基因GmVP1,构建了GmVP1单价以及GmVP1与GmNHX1双价转化载体,利用发根农杆菌介导的大豆子叶转化体系验证其功能。结果表明,GmVP1在转录水平响应盐胁迫,GmVP1基因在一定条件下可以提高转基因大豆发状根对NaCl的耐受性,GmVP1/GmNHX1双价基因过表达比GmVP1单基因过表达更能提高大豆发状根相对生长量及其耐盐性。

胃癌组织中a2V表达及与M2型巨噬细胞的相关性

目的探讨液泡膜-ATP酶a2亚基（a2V）在胃癌组织中的表达,及其与M2型巨噬细胞水平的相关性,并探讨a2V表达与胃癌生物学行为的关系。方法应用免疫组化方法检测胃癌组织和癌旁组织中a2V的表达,以CD163标记M2型巨噬细胞,检测其在胃癌组织中的水平,结合病人的临床病理资料分析两者的相关性及a2V与胃癌生物学行为的关系。结果胃癌组织中a2V的阳性表达率高于对应的癌旁正常组织（χ~2=9.751,P〈0.05）。胃癌组织中a2V表达与CD163水平呈正相关（r=0.360,P〈0.05）。a2V的表达与胃癌组织TNM分期、淋巴结转移有关（χ~2=7.581、6.289,P〈0.05）。a2V低表达胃癌病人的生存情况优于高表达病人（χ~2=4.604,P〈0.05）。结论 a2V在胃癌组织中表达上调,与胃癌的侵袭和转移及M2型巨噬细胞的水平有关,a2V蛋白高表达病人的预后不良。