自体LAK高效扩增法的建立及活性诱导实验

目的建立体外高效扩增自体ＬＡＫ细胞方法，并测定诱导扩增的ＬＡＫ细胞是否具有杀瘤细胞作用及表型变化。②方法取２８例不同类型的肿瘤病人外周静脉血液，经密度梯度离心获取ＬＡＫ细胞前体，以白细胞介素２（ＩＬ－２）作为诱导剂，应用独特的液相三步扩增方法扩增自体ＬＡＫ细胞。分别用间接免疫荧光（ＩＦＡ）和四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法，测定细胞表型和对肿瘤细胞的杀伤活性，并与对照组细胞进行比较。③结果以该法诱导扩增４～１２ｄ，细胞数量增加１２０倍，对Ｋ５６２和Ｒａｊｉ细胞杀伤活性最高达６１．７％和４０．１％（效∶靶＝５０∶１），与对照组细胞比较，差异有极显著性（ｔ＝４．５～４．７，Ｐ＜０．０１）。自体ＬＡＫ细胞具有成熟Ｔ细胞表型特点（ＣＤ３和ＣＤ８）。④结论此法可扩增出高数量和高效杀肿瘤细胞活性的自体ＬＡＫ细胞。

人实体瘤肿瘤浸润淋巴细胞的高效扩增及功能评价

目的体外高效扩增肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ），为进一步开展基因治疗肿瘤奠定基础。②方法采用机械分离、酶消化和不连续密度梯度离心法分离提取ＴＩＬ前体细胞；以ＩＬ－２作为诱导剂，采用液相三步扩增方法扩增培养，并分别用ＭＴＴ和ＩＦＡ法与对照的自体ＬＡＫ细胞比较细胞动力学。同时对Ｋ５６２细胞和自体肿瘤细胞（ＡＴＣ）进行杀伤试验以及表型检测。③结果从２８例实体瘤组织和肿瘤引流淋巴结中获取的ＴＩＬ前体细胞，２６例培养成功，其中２３例ＴＩＬ数量达到治疗数量级；ＴＩＬ细胞对ＡＴＣ杀伤作用强于自体ＬＡＫ细胞（ｔ＝１１．４，１８．９，Ｐ＜０．０１）。ＴＩＬ细胞表型特点为ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８淋巴细胞亚群。④结论ＴＩＬ细胞具有高效杀肿瘤细胞作用，ＴＩＬ细胞可作为基因治疗的理想载体细胞。