脉冲光声方法研究液相光化学和光生物化学反应

利用脉冲光声技术,研究液相光化学和光生物化学反应过程,在基本理论和实验技术两方面都有了重要的发展,为直接测定其反应动力学和热力学参量提供有效的方法,并广泛应用于测定各种有机化合物、配合物和动植物蛋白质分子在溶液中的光解反应,对光解反应引起的焓变、结构体积变化以及瞬态中间产物的寿命和量子产率给出丰富的信息。本文对有关领域在国内外的主要进展作了简要的介绍,并提出今后需要研究的一些问题。

HPLC-柱后光化学衍生法测定玉米中黄曲霉毒素B1的不确定度评定

本文采用HPLC-柱后光化学衍生法测定玉米中黄曲霉毒素B1含量,通过系统分析整个测定过程的影响因素,评估不确定度来源,评定各个不确定度分量,发现标准物质浓度、标准溶液配制与测量重复性引入的不确定度对测量结果的影响较大。当玉米样品中黄曲霉毒素B1含量为7.86μg·kg^(-1)时,扩展不确定度为0.68μg·kg^(-1)(k=2)。

高效液相色谱-光化学衍生法测定陈皮中黄曲霉毒素G2的不确定度评定

目的评定高效液相色谱法-光化学衍生法测定陈皮中黄曲霉毒素G2的含量的不确定度。方法参考中国药典四部通则2351黄曲霉毒素测定法第一法对陈皮进行提取,以C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为分析柱,甲醇:乙腈:水(30:12:58,V:V:V)为流动相进行洗脱,流速0.6 mL/min,柱温40℃,使用柱后光化学衍生器连接荧光检测器进行检测。找出影响不确定度的因素,对不确定度进行评估,并给出不确定度,如实反映测量的置信度和准确度。结果该批次陈皮样品中黄曲霉毒素G2的含量为0.08μg/kg,其实际含量可表示为(0.08±0.005)μg/kg(k=2)。结论黄曲霉毒素G2测定过程中主要影响因素为高效液相色谱仪的校准,其次为测量重复性,而样品溶液的配置与对照品溶液的稀释引入的不确定因素较小,天平称量引入的不确定因素可以忽略不计。

高效液相色谱-柱后光化学衍生法测定茵栀黄口服液中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的含量

目的建立HPLC-柱后光化学衍生法测定茵栀黄口服液中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的含量。方法Welch Ultimate XP-C18色谱柱;甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;柱温40℃;进样量10μL;荧光检测器激发波长360 nm,发射波长450 nm。结果黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1分别在进样量为0.00143~0.14 ng(r=0.9998)、0.00381~0.372 ng(r=0.9995)、0.00123~0.12 ng(r=1.000)、0.00381~0.372(r=0.9999)ng与峰面积线性关系良好;平均加样回收率为66.46%~129.3%,RSD≤2.9%。结论该方法可用于茵栀黄口服液中黄曲霉毒素的检测;本次抽检样品中未检测出黄曲霉毒素,但茵栀黄中原料药材茵陈、黄芩、栀子均存在霉变污染风险,建议增订黄曲霉毒素检查项,以提高其安全性。

HPLC-柱后光化学衍生法测定清火片(胶囊)中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1的含量及其安全性评价

目的:建立测定清火片(胶囊)中黄曲霉毒素(AF)G_2、G_1、B_2、B_1的方法,并评价该制剂的安全性。方法:采用高效液相色谱(HPLC)-柱后光化学衍生法,并以全国37个厂家生产的266批清火片(胶囊)为样品。色谱柱为Agilent C_(18);流动相为水-乙腈-甲醇(V/V/V),梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;柱温为40℃;进样量为10μL;荧光检测器激发波长为360 nm、发射波长为450 nm。结果:AF G_2、AF G_1、AF B_2、AF B_1分别在进样量为10.197～101.97(r=0.999 7)、10.197～101.97(r=0.999 6)、9.958 6～99.586(r=0.999 1)、9.999 0～99.990(r=0.998 3)pg范围内线性关系良好;精密度(n=6)、重复性(n=6)、稳定性(12 h,n=5)试验的RSD均小于3.0%;检测限分别为0.80、4.00、0.80、4.00 pg;定量限分别为1.60、8.00、1.60、8.00 pg;加样回收率分别为85%～90%、85%～90%、55%～65%、65%～75%(RSD为1.8%～4.7%,n=6)。在266批样品中均未检测出AF G_2、AF G_1、AF B_2、AF B_1。结论:该方法可用于清火片(胶囊)中AF的检测;虽在抽检样品中未检测出AF,但建议增订AF检查项,以提高其安全性。

桃仁、薏苡仁、肉豆蔻、地龙中黄曲霉毒素的测定方法学研究

选取桃仁、薏苡仁、肉豆蔻、地龙中药材为研究对象,进行黄曲霉毒素的测定方法学研究。采用高效液相色谱-柱后光化学衍生荧光检测法,分别从检测方法的专属性、检测限与定量限、线性与范围、重复性、中间精密度与溶液稳定性等6个方面进行检验分析和方法进行验证。结果表明:黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1分别在0.00060~0.015μg/kg、0.00202~0.0505μg/kg、0.00066~0.0165μg/kg、0.00216~0.054μg/kg范围内线性关系良好,R2=1.000(n=6);重复性试验黄曲霉毒素B1含量RSD为25.7%(n=6),含黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的总量RSD为24.4%(n=6);黄曲霉毒素对照品溶液在12 h内稳定性良好。桃仁、薏苡仁、肉豆蔻、地龙平均回收率分别为84.6%、114.0%、84.3%、113.3%,RSD分别为4.0%、4.8%、6.8%、5.7%(n=6)。该检测方法专属性强、稳定性好、灵敏度高、结果准确可靠,为医药工作者在黄曲霉毒素检测和质量控制方面提供参考。

骨折挫伤胶囊中黄曲霉毒素的测定

目的 用高效液相色谱柱后光化学衍生法对骨折挫伤胶囊中的黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)进行含量测定。方法 用Persuit 5 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-乙腈-水(27∶12∶61)(A)-甲醇(B),梯度洗脱;流速为0.8 mL·min^(-1);激发波长λ_(ex)为360 nm,发射波长λ_(em)为450 nm;柱温为30℃。结果 黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)分别在0.52~5.20、0.19~1.90、0.54~5.40、0.19~1.90 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好;平均回收率分别为84.90%、85.32%、85.37%、81.92%。138批样品中有7批检出黄曲霉毒素B_(1)、G_(1),但均未超过限度,其余均未检出。结论 建立的方法可快速、简便、准确地检测骨折挫伤胶囊中黄曲霉毒素的含量,样品的测定结果也说明所测138批样品在黄曲霉毒素方面不存在安全性风险。

高效液相色谱-光化学衍生法测定湖南产莲子中黄曲霉毒素G1、G2、B1、B2

目的对不同来源的湖南产莲子中黄曲霉毒素G1、G2、B2、B1进行高效液相色谱-光化学衍生法测定。方法采用高效液相色谱–光化学衍生法,采用岛津GL Inertsil ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇–乙腈–水(35∶13∶52),柱温35℃;光化学衍生器(254 nm)激发波长λex=360 nm,发射波长λex=450 nm。结果黄曲霉毒素G1、G2、B2、B1分别在6.7~33.3、11.4~56.8、10.3~51.5、4.1~20.3 pg线性关系良好;平均回收率分别为98.07%、97.72%、96.11%、99.52%,RSD值分别为1.69%、1.40%、2.72%、1.34%(n=6)。9批莲子样品中,有6批未检出黄曲霉毒素,来自于农贸市场农户自存的2批次检出黄曲霉毒素B1,实验室塑料袋包装储存1年的1批检出黄曲霉毒素B1、B2,但质量分数均低于法定标准限量。结论不同来源湖南产莲子中黄曲霉毒素质量分数均低于《中国药典》2020年版规定限量。该法测定结果准确、重复性良好,可为完善莲子安全性控制和质量标准提升提供实验依据。

葛根定眩胶囊中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1含量测定及安全性评价

观察测定黄曲霉毒素(aflatoxin全称,AFT简称)G2,G1,B2,B1含量(葛根定眩胶囊)的方法,并对葛根定眩胶囊安全性进行评价。方法 方法选择,高效液相色谱-柱后光化学衍生法,色谱柱选择150mm×4.6 mm(5μm)的VenusilMP C18柱,色谱柱条件甲醇-乙腈-水流动相,梯度洗脱,40℃柱温设计,1.0 ml/min流速设计,荧光检测器进行检测,检测条件450nm发射波长、360nm激发波长,分析测定AFT G2、AFT G1、AFT B2、AFT B1含量情况,并对葛根定眩胶囊进行测定。结果 试验色谱条件测定AFT G2、AFT G1、AFT B2、AFT B1分离度均大于1.5。AFT G2、AFT G1、AFT B2、AFT B1的平均回收率均在97.5%~99.9%范围内,AFT G2、AFT G1、AFT B2、AFT B1的RSD值均<2.0%,加标回收率、精密度理想。定量限AFT G2的0.45μg/kg、AFT G1的0.48μg/kg、AFT B2的0.42μg/kg、AFT B1的0.32μg/kg;检测限AFT G2的0.08μg/kg、AFT G1的0.10μg/kg、AFT B2的0.11μg/kg、AFT B1的0.12μg/kg。本次研究AFT G2、AFT G1、AFT B2、AFT B1线性回归分析,结果显示各AFT线性关系良好。取葛根定眩胶囊样品共计5批,测定结果AFT含量符合要求。结论 高效液相色谱-柱后光化学衍生法测定AFT G2、AFT G1、AFT B2、AFT B1含量效果理想,可以将其应用于葛根定眩胶囊测定之中,有效进行该药物质控。

吉林省内花生衣药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定

为测定吉林省内花生衣药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量,评估样品污染情况,本文采用免疫亲和柱净化、高效液相色谱光化学衍生荧光检测法,以Agilent ZORBAX SB-C18为色谱柱(4.6×250 mm 5μm);以甲醇-乙腈-水(40∶20∶40)为流动相,流速为0.8 mL/min;柱温为25℃;荧光检测器激发波长λex=360 nm,发射波长λex=450 nm。结果显示,AFB1、AFB2、AFG1、AFG2线性关系良好;AFB1、AFB2、AFG1、AFG2检出限依次为0.155μg/kg、0.050μg/kg、0.155μg/kg、0.058μg/kg;定量限依次为0.465μg/kg、0.150μg/kg、0.465μg/kg、0.175μg/kg。由此可见,该方法快速、准确、重复性好,能够为花生衣中黄曲霉毒素测定方法提供科学依据。

Determination of Baicalin in Traditional Chinese Preparation by High Performance Liquid Chromatography with Chemiluminescence Detection

A new method for the determination of baicalin with HPLC-CL was developed. The method was based on the chemiluminescence reaction between KMnO4 and baicalin sensitized from HCHO. The linear range was 3.7?0-6~9.8?0-5 mol/L with detection limit of 1.7?0-6 mol/L and the relative standard deviation was 2.5 % (Cs=6.6?0-5 mol/L, n=5). The method has been applied to the determination of baicalin in oral administration, injection, Scutellariae radix and granules with good results.

Study on chronic pancreatitis and pancreatic cancer using MRS and pancreatic juice samples

AIM:To investigate the markers of pancreatic diseases and provide basic data and experimental methods for the diagnosis of pancreatic diseases.METHODS:There were 15 patients in the present study,among whom 10 had pancreatic cancer and 5,chronic pancreatitis.In all patients,pancreatic cancer or chronic pancreatitis was located on the head of the p-a-ncrea-s.Pa-thology da-ta-of a-ll p-a-tients wa-s confirmed by biopsy and surgery.Among the 10 patients with pancreatic cancer,3 people had a medical history of longterm alcohol consumption.Of 5 patients with chronic pancreatitis,4 men suffered from alcoholic chronic pancreatitis.Pancreatic juice samples were obtained from patients by endoscopic retrograde cholangiopancreatography.Magnetic resonance spectroscopyn was performed on an 11.7-T scanner (Bruker DRX-500) using Call-Purcell-Meiboom-Gill pulse sequences.The parameters were as follows:spectral width,15 KHz;time domain,64 K;number of scans,512;and acquisition time,2.128 s.RESULTS:The main component of pancreatic juice included leucine,iso-leucine,valine,lactate,alanine,acetate,aspartate,lysine,glycine,threonine,tyrosine,histidine,tryptophan,and phenylalanine.On performing 1D 1H and 2D total correlation spectroscopy,we found a triplet peak at the chemical shift of 1.19 ppm,which only appeared in the spectra of pancreatic juice obtained from patients with alcoholic chronic pancreatitis.This triplet peak was considered the resonance of the methyl of ethoxy group,which may be associated with the metabolism of alcohol in the pancreas.CONCLUSION:The triplet peak,at the chemical shift of 1.19 ppm is likely to be the characteristic metabolite of alcoholic chronic pancreatitis.

测定花生油中黄曲霉毒素B1前处理方法的优化

目的建立一种环保的同时适用于高效液相色谱柱后光化学衍生法(liquid chromatography post-column photochemical derivation, LC-PSD)和酶联免疫吸附筛查法(enzyme-linked immuno sorbent screening,ELISA)测定花生油中的黄曲霉毒素B1的前处理净化方法。方法花生油试样经甲醇-水溶液(70:30, V:V)提取,经乙醚净化、冷冻离心除脂净化和免疫亲和柱净化后,采用LC-PSD法和ELISA法测定。结果黄曲霉毒素B1在0.1~40 ng/mL范围内均表现出良好的线性关系,LC-PSD法相关系数均大于0.999,检出限为0.03μg/kg,定量限为0.1μg/kg。ELISA法相关系数均大于0.9346,检出限为0.1μg/kg,定量限为0.3μg/kg,均满足现行国标要求。黄曲霉毒素B1在添加水平为5μg/kg和20μg/kg时, LC-PSD法的加标回收率为84%~99%,不确定度(n=6)为0.2%~3.3%,ELISA法的加标回收率为109%~124%,不确定度(n=6)为0.3%~10.9%。结论优化后的花生油中黄曲霉毒素B1检测前处理方法可以使检验效率提高40%以上,有机溶剂的使用量降低50%以上,经济效益提高50%以上,优化方法适合大批量测定花生油中黄曲霉毒素B1。

Photocatalytic activity of bauxite-tailings supported nano-TiO_2

TiO2/bauxite-tailings （TiO2/BTs） composites were prepared via a chemical liquid deposition method and characterized by X-ray diffractometry （XRD）, scanning electronic microscopy （SEM） and N2 adsorption analysis. The photocatalytic performance of TiO2/BTs composites was evaluated with UV-Vis spectrophotometer following the changes of phenol concentration under different illumination time. Effects of the calcination temperature, the pH and the cycles on the photocatalytic activity of TiO2/BTs composites were investigated. The composites calcined at 500 and 600 ℃ exhibit the best photocatalytic performance, and the phenol degradation ratios reacting for 40 and 160 rain reach 35% and 78% respectively under the same conditions, higher than those of 29% and 76% of the Degussa P25（TiO2）. The ability of TiO2/BTs500 （BTs500 represents bauxite-tailings calcined at 500 ℃） composites to degrade phenol increases with decreasing pH.

气溶胶中溶解性有机质(DOM)液相氧化

许多实验研究都关注大气凝聚相中单一有机化合物的液相光化学,对于实际大气液相环境中溶解性有机质(DOM)的液相光化学氧化的研究还很少.为此,本文报道了模拟太阳光和紫外光辐照下,大气气溶胶水相萃取的DOM直接或·OH氧化的实验结果.不同光解阶段的产物的吸光、氧化特性采用UV-vis和黑炭气溶胶质谱仪(SP-AMS)分析.结果表明,紫外光体系中DOM得到不断降解,相应的产物f44值远低于太阳光体系;液相光解时会生成多种羧酸,草酸的生成量最高.太阳光照反应条件下吸光度和HULIS浓度变化不大;而UV和UV+·OH条件下,HULIS浓度随反应时间不断增加,UV+·OH中反应23 h时HULIS浓度约为初始的4倍,说明含羧基、羟基和芳香基等官能团的棕色碳的形成.综合研究结果表明,太阳光作用下实际DOM液相氧化时吸光性和棕色碳的形成速率不是很快,而紫外光作用下大部分DOM不断分解为HULIS或小分子物质,剩余的有机物的吸光性可能比较强,导致最终产物的单位质量吸收效率(MAE)比较高.本文首次探讨了实际膜液相氧化过程,结果对厘清大气复合污染的形成机制提供重要依据.