气相冷冻法和液相冷冻法对人类精子运动能力、形态学及超微结构的影响

目的研究液氮蒸汽熏蒸法(简称气相冷冻法)和直接投入液氮冷冻法(简称液相冷冻法)对人类精子冷冻复苏后运动能力、形态学及超微结构的影响。方法选择25例捐精者的精液标本,按照1∶1的比例添加改良甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)作为冷冻保护剂。每份精液标本等分为2份,分别进行气相法冷冻和液相法冷冻。复苏后,利用IVOS精子分析仪测定精子总活动率、前向运动精子百分率、运动参数,巴氏染色观察精子形态并计算形态正常率,透射电子显微镜观察精子超微结构。结果气相法冷冻从28℃降温到-185℃用时468 s,再经过1 h后降温到-196℃;液相法冷冻从30℃降温到-196℃用时90 s。两种方法冷冻复苏后精子总活动率、前向运动精子百分率、运动参数、形态正常率与冷冻前比较均明显降低(P<0.05)。气相法冷冻复苏后精子的复苏率、总活动率、前向运动精子百分率均高于液相法,差异有统计学意义(P<0.05);两种冷冻方法复苏后精子形态正常率、运动参数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。通过透射电子显微镜观察,使用GYC作为冷冻保护剂,两种方法冷冻复苏后,精子头部质膜和顶体膜超微结构未出现明显的损伤。结论改良GYC保护剂对精子超微结构具有保护作用;气相冷冻法冷冻人类精子的复苏结果优于液相法。

超细粒子的制备方法

超细粒子一般指粒径在nm级的超细微粒。超细粒子也被称为纳米粒子,制摆超细粒子的方法故被称为纳米技术。近年来超细粒子方法有多种,以下介绍几种常用的方法。 1 均匀沉淀法:均分散体系是指分散粒子大小、形状相同的体系。这种体系被视为80年代胶体化学最有成绩的研究。Marijeric等用均匀沉淀法制备Cds微粒粒子,由镉盐(Cd2+浓度为1×10-3-5×10M,酸度为1×10-7-0.3M)与TAA混合溶液在一定温度下沉淀,除化24h制备了Cds超细粒子。 2 液相沉淀冷冻干燥法:如Al2O3的超细粒子的制备,首先让Al3+与（NH4）2CO3形成沉淀,经过恒温搅拌形成水合Al2O3溶液,然后进行高速离心分离及超声分散洗涤沉淀,最后进行冷冻干燥而得到Al2O3超细粒子。