液相悬浮芯片技术在黑龙江省沙门菌血清分型中的应用

目的探索液相悬浮芯片技术对黑龙江省食品风险监测的沙门菌分离株的血清分型效果及适用性。方法采用玻片凝集试验对分离的451株沙门菌进行分型,采用液相悬浮芯片技术——沙门菌血清型快速分型试剂盒(SSA)对其中256株沙门菌O抗原、H抗原、AT抗原基因进行分型鉴定。结果 249株分离株可以用SSA完整分型;液相悬浮芯片技术与传统方法血清分型的符合率超过96%。分离鉴定的44种血清型中有7种涉及到的O抗原或H抗原不在SSA检测范围内,其余37种能用SSA成功分型;利用SSA检测15株血清玻片凝集法不能分型的沙门菌,10株可成功分型。结论液相芯片技术能对大部分黑龙江省食品源沙门菌进行血清分型,与传统血清分型方法的一致性较高,且比传统方法具有高通量、高速度、准确性高的特点,可考虑常规用于沙门菌血清分型,特别是在应对食源性沙门菌感染暴发及食品风险监测时优先选用该方法进行血清型别的快速判定。

液相悬浮芯片技术在沙门氏菌血清分型中的应用优势

目的探讨液相悬浮芯片技术对食品风险监测和哨点医院食源性疾病监测中分离的沙门氏菌株血清型别鉴定的可行性及适用性。方法对已分离出的沙门氏菌用传统玻片凝集试验进行血清分型,同时采用液相悬浮芯片技术对沙门氏菌的O抗原、H抗原、AT抗原基因进行分型鉴定。结果2012—2019年共收集沙门氏菌215株,可分出38种血清型,其中96%可用液相悬浮芯片技术进行完整分型,且与传统血清凝集结果相符。其中有11株不能用玻片凝集法分型的沙门氏菌,有8株用SSA试剂盒能成功分型。结论液相芯片技术具有高通量、高灵敏度、高特异性等优点,可在短时间内完成常见沙门氏菌血清型的鉴定。相对传统血清凝集法在检测时间上有明显优势,特别是在处理沙门氏菌暴发疫情时,对沙门氏菌血清快速分型至关重要。

常见7种食源性致病菌xMAP液相芯片快速筛查方法的建立及应用

目的采用xMAP液相悬浮芯片检测方法,建立一管同时检测金黄色葡萄球菌、沙门菌、副溶血弧菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157∶H7、创伤弧菌和空肠弯曲菌的快速筛查方法。方法根据GenBank公布的金黄色葡萄球菌肠毒素nuc基因、沙门菌侵袭性基因ssaR、副溶血弧菌通用基因toxR、单增李斯特菌的hlyA基因、大肠杆菌O157∶H7的rfbE基因、创伤弧菌的vvh基因和空肠弯曲菌的gyrA基因,设计特异性引物和探针,利用上游引物和生物素标记的下游引物对7个靶序列进行不对称实时PCR扩增,7重实时PCR扩增产物和制备的7种偶联探针的微球在同一体系中进行杂交,最后利用藻红蛋白和生物素的亲和作用报告荧光,从而建立7种食源性致病菌的xMAP液相悬浮芯片检测法。结果 xMAP液相悬浮芯片体系检测140株菌株,均出现特异性荧光中值信号,7种食源性致病菌检测互不干扰。DNA和菌液检出限分别为1～100ng和105～108cfu/ml对56份各类食品标本进行检测,检出金黄色葡萄球菌2份、沙门菌4份、副溶血弧菌7份、单增李斯特菌1份、创伤弧菌3份,未检出大肠杆菌O157∶H7和空肠弯曲菌,此结果与传统方法分离结果相一致。结论xMAP液相悬浮芯片技术从样品处理到检测结果需3.5h左右,该方法可应用于食品安全风险监测中食源性致病菌的快速筛查和食源性致病菌的分型鉴定。