骨碎补高效液相指纹图谱研究及主要成分含量测定

目的建立骨碎补的指纹图谱方法,并测定其主要成分的含量。为快速评价骨碎补药材的质量,科学评价及完善骨碎补的质量控制提供可靠方法。方法采用如下液相条件进行指纹图谱分析：Zirchrom C18（4.6 mm×200 mm,5μm）,甲醇-磷酸水溶液（pH3.6）为流动相梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长283 nm,柱温30℃;并对指纹图谱进行相似度和聚类分析。采用如下液相条件进行含量测定：Kromasil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,甲醇-磷酸水溶液（pH3.6）为流动相梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长283 nm,柱温30℃。结果建立了16个不同产地骨碎补药材的HPLC指纹图谱,标定了12个共有峰,指认了其中6个主要色谱峰,峰面积归一化法计算6个主要色谱峰面积之和占所有色谱峰总面积〉70%。通过相似度分析和聚类分析一致发现16批药材质量可分为3类,说明市售骨碎补药材质量参差不齐。初步建立了骨碎补质量控制方法,采用外标法对16批骨碎补中4个主要成分（E）-4-O-β-D-吡喃葡萄糖基香豆酸、咖啡酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,5,7,3′,5′-四羟基二氢黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和柚皮苷进行了含量测定。4个主要成分表现良好的线性范围（r〉0.9995）和回收率（97.9%-103.7%）。结论该方法特征性及专属性强,为科学评价及完善骨碎补的质量控制提供可靠方法。

不同品种桑叶高效液相指纹图谱的聚类分析

目的研究四川地区主流桑树品种桑叶的HPLC指纹图谱,并进行聚类分析,探讨品种对桑叶化学成分累积的影响。方法建立桑叶的HPLC指纹图谱,对16批样品共有峰峰面积进行聚类。结果不同品种桑叶相似度均大于0.90,但所含化学成分的含量存在差异,相同基原不同品种的桑叶被聚类到了不同类别中。结论桑叶中化学成分的累积与品种有一定相关性。

骨碎补高效液相指纹图谱的构建与应用

目的建立骨碎补药材的高效液相指纹图谱,为骨碎补药材的质量控制提供可靠方法。方法色谱柱采用DiamonsilTM C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-pH为3.0的冰醋酸水溶液,梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0 mL/min,检测波长270 nm。结果初步建立了骨碎补药材的高效液相指纹图谱,标定了8个共有峰,测定出10批骨碎补正品中柚皮苷含量为0.49%～0.76%,新北美圣草苷含量为0.49%～0.63%,鉴别出了真伪骨碎补。结论利用高效液相指纹图谱可定性、定量地控制骨碎补药材的质量,方法稳定、简便、快捷。

制炭温度及受热时间对槐花高效液相指纹图谱的影响

目的:考察制炭温度及受热时间对中药槐花高效液相指纹图谱的影响,为槐花炭炮制工艺的规范化研究提供实验数据。方法:采用恒温烘箱为加热设备,从120°C至250°C间隔10°C共14个温度,每个温度下对槐花分别加热30 m in或60 m in,共得到28份样品;以高效液相色谱法分别测定每份样品的指纹图谱。选择生品的指纹图谱为对照图谱,分析各样品指纹图谱的变化。结果:受热30 m in的样品,在120°C^150°C受热时,指纹图谱均未发生变化;在170°C受热时,其指纹图谱均略有变化;180°C^190°C受热时,其指纹图谱均发生显著性变化。200°C以上受热,其指纹图谱均显示化学成分被破坏。160°C以上受热60 m in的样品对温度的敏感性高于受热30 m in的样品。结论:综合考虑指纹图谱变化及能源合理利用,槐花制炭温度以185°C±2°C、加热30 m in为宜。

基于高效液相指纹图谱技术的五常大米产地鉴别研究

为了建立大米指纹图谱,本课题以五常大米和非五常大米为研究对象,经粉碎研磨成大米粉,使用超声协同萃取技术,在乙酸乙酯和盐酸的作用下,提取出大米粉中的物质,在高效液相色谱中得出数据,将数据导入《中药色谱指纹图相似度评价系统A》,实验表明大米乙酸乙酯提取物的高效液相色谱分析方法,具有良好的精密度,利用该实验得出五常大米标准指纹图谱,通过该指纹图谱对大米样品进行分析,以相似度大于0.9为标准,可以准确判断五常大米和非五常大米。

炙甘草汤的高效液相指纹图谱研究

目的:建立酒水共煎法所得炙甘草汤的HPLC特征图谱分析方法,控制炙甘草汤的质量。方法:以经典酒水共煎法所得炙甘草汤为研究对象,采用HPLC法,流动相为乙腈-0.05%磷酸,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,进样量10μL。结果:炙甘草汤HPLC特征图谱的检测波长为0~105 min,280 nm;105~138 min,248 nm时较佳。10批次供试品共有模式指纹图谱中标记出8个峰面积较大、分离度较好的峰,其中甘草酸铵、甘草苷、五羟甲基糠醛特征峰专属性强。结论:本研究所建立的分析方法稳定性和重复性好,可用于控制炙甘草汤的质量。

参苏口服液高效液相指纹图谱研究

目的建立参苏口服液的多成分HPLC指纹图谱。方法采用C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250mm);柱温30℃;以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速1.0 m L·min-1;检测波长283nm;分析时间60 min。结果在该色谱条件下可同时检测出参苏口服液中葛根素等13个共有色谱峰成分,方法学考察结果较好,10批次样品指纹图谱的相似度均>0.9。结论该方法简便、重复性好,为参苏口服液的整体质量评价提供了科学依据。

淡豆豉药材的高效液相指纹图谱研究

目的建立淡豆豉药材高效液相色谱指纹图谱(HPLC-FPS),为其质量控制提供依据。方法应用高效液相色谱法(HPLC),利用反相色谱柱:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-3%冰乙酸梯度洗脱,流速:1 ml/min,柱温:30℃,检测波长:261 nm,进样量:10μl。结果不同产地淡豆豉在化学成分方面具有明显相似性,可建立淡豆豉的指纹图谱。结论建立的HPLC指纹图谱可用于淡豆豉的质量评价。

天山雪莲不同部位总黄酮含量及高效液相指纹图谱分析

目的:测定天山雪莲不同部位的总黄酮和芦丁含量,以及高效液相指纹图谱分析,为雪莲叶进一步开发利用奠定基础。方法:用UV法测定总黄酮的含量;用中药色谱指纹图谱相似度评价系统,对不同部位的HPLC色谱图进行相似度计算。结果:叶的总黄酮和芦丁的含量均较高,与全草的相似度为0.812。

《中药(民族药)液相指纹图谱识别技术》的课程构建与教学

《中国药典》(2020年版)收载中药液相指纹图谱鉴别法70项,显示液相指纹图谱识别技术在中药(民族药)质量控制的重要性,培养出与之相符合、适应的人才是目前乃至未来发展的要求,因此独立的液相指纹图谱识别技术的课程建设及教学工作的开展被提上日程。本文对《中药分析》等教材涉及的中药指纹图谱的教学工作存在问题进行分析,并对《中药(民族药)液相指纹图谱识别技术》的课程的构建和课程教学工作进行介绍,以期为该课程教学的逐步开展提供参考。

《中药(民族药)液相指纹图谱识别技术》课程思政的探索与实践

立德树人一直是教育的本质要求。将思政全过程融入专业课程,能达到传授专业知识和育人的双重目的。本文从课程介绍、课程思政融入途径及实施效果等方面介绍了《中药(民族药)液相指纹图谱识别技术》课程思政的探索与实践,深入探讨中药类专业课程思政对加强学生文化自信和培养学生科学精神的重要价值,力求把学生培养为品行端正、技能突出的社会主义接班人。

平行四波长高效液相指纹图谱鉴定十全大补丸质量

目的建立十全大补丸(Shiquan Dabu Wan,SQDBW)平行四波长高效液相色谱指纹图谱,依据系统指纹定量法结合全息整合法定量鉴定十全大补丸整体质量。方法采用RP-HPLC法,以5-羟甲基糠醛为参照物峰,在265、290、326和360 nm波长下检测,分别确定了51、44、37和17个共有峰,建立了SQDBW的平行四波长高效液相色谱指纹图谱。分别以独立权重法、均值法和投影参数法整合四波长下各样品的定性定量全信息,最终用最简捷准确的均值法评价10批样品的质量等级。结果 10批样品中6批的等级为良好以上,2批为一般,1批为次,1批为劣。结论平行多波长指纹图谱整合法是基于从全信息角度整体定性和定量鉴定中药质量的有效可信方法,其定量鉴定结果具有可靠性。

基于高效液相色谱指纹图谱结合化学计量法分析广西鹅掌柴质量

目的基于高效液相色谱(HPLC)指纹图谱结合化学计量法,评价广西鹅掌柴的质量。方法采用HPLC法,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液进行梯度洗脱,对10个不同产地广西鹅掌柴进行指纹图谱研究,采用聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)对其质量进行评价。结果建立了10个不同产地广西鹅掌柴指纹图谱,共标定22个共有峰,相似度为0.922~0.999,并指认了4个色谱峰(红景天苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、咖啡酸、柚皮素),CA与OPLS-DA分析可将不同产地广西鹅掌柴大致分为四类,主成分分析筛选出的4个主成分累计贡献率达到95.39%。结论通过指纹图谱结合CA、PCA、OPLS-DA分析可全面综合评价广西鹅掌柴质量,为广西鹅掌柴的质量控制进一步评价提供参考。

连朴饮基准样品高效液相色谱指纹图谱建立及化学成分鉴定

采用高效液相色谱(HPLC)技术建立连朴饮(LPD)基准样品的指纹图谱,并对其中的化学成分进行分析。该实验使用Welch Ultimate®XB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸溶液作为流动相,梯度洗脱,检测波长为254 nm,柱温为30℃,体积流量为1.0 mL/min,进样量为10μL。通过相似度评价、聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对不同批次连朴饮进行质量评价。运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术,识别连朴饮中的化学成分。结果表明,15批连朴饮基准样品与对照指纹图谱的相似度均高于0.9,连朴饮基准样品HPLC指纹图谱方法学验证良好。确定23个共有峰,指认8个成分,分别为3号峰栀子苷、7号峰表小檗碱、8号峰盐酸黄连碱、11号峰盐酸小檗碱、12号峰盐酸巴马汀、19号峰染料木素、21号峰和厚朴酚和22号峰厚朴酚。通过聚类分析和主成分分析2种化学模式识别方法,将15批基准样品划分为3类,结果互相印证。主成分1-4是影响其质量评价的主要因子,OPLS-DA共确定12个差异标志物。在连朴饮中鉴定出了91个化合物,主要包含环烯醚萜类、有机酸类、黄酮苷类、黄酮类和异黄酮类、生物碱类、木脂素类和氨基酸类。建立的连朴饮基准样品HPLC指纹图谱方法简单且稳定性、重复性良好,与质谱检测方法相结合,可为其后续制剂开发和质量控制研究提供参考。

基于高效液相色谱指纹图谱和多成分定量的大蓟配方颗粒质量评价

目的评价不同生产企业不同批次大蓟配方颗粒的质量。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定大蓟配方颗粒中5种有效成分的含量,色谱柱为Agilent Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-甲醇(4∶1,V/V)-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为330 nm,柱温为30℃,进样量为10µL;建立指纹图谱,通过比对鉴定共有峰,并进行相似度评价,采用聚类分析法(CA)、主成分分析(PCA)法和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法对5个生产企业的17批样品进行分析。结果大蓟配方颗粒的指纹图谱有14个共有峰,指认出了8个峰;CA和PCA将17批大蓟配方颗粒分为4类;OPLS-DA确定了6种差异标志物成分,对其影响显著性排序分别为芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷>峰7>绿原酸>峰9>隐绿原酸>柳穿鱼叶苷。5种成分在各自质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.9991,n=5);平均加样回收率为95.88%~99.12%,RSD为1.40%~2.00%(n=9)。结论该方法操作简单,方法学考察结果良好,能用于大蓟配方颗粒的质量评价。

HPLC多波长切换指纹图谱结合化学计量学研究白术土炒前后成分变化规律

目的 建立测定白术、土白术水溶性和脂溶性成分的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)多波长切换指纹图谱,结合化学计量学研究白术土炒前后成分变化规律。方法 建立白术、土白术水溶性及脂溶性成分的HPLC-DAD多波长切换指纹图谱测定方法,测定17批白术和17批土白术的HPLC指纹图谱,采用相似度评价、聚类分析、OPLS-DA分析进行统计分析。结果 白术指纹图谱中共标定9个共有峰,土白术指纹图谱中共标定10个共有峰。指认了新绿原酸、绿原酸、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ及苍术酮6个成分,土炒后1号峰、4号峰(白术内酯Ⅲ)、8号峰(白术内酯Ⅱ)峰面积增加,2号峰(新绿原酸)、3号峰(绿原酸)、5号峰、6号峰、7号峰、9号峰(白术内酯Ⅰ)、10号峰(苍术酮)土炒后峰面积均降低。结论 所建立指纹图谱方法能够系统地分析白术土炒前后化学成分的变化规律,可为进一步规范白术土炒工艺,制定土白术专属性质量标准,研究土白术炮制原理提供实验基础。

指纹图谱技术结合化学计量学评价五味子醇提物质量探索研究

目的:优化五味子乙醇提取工艺,建立其醇提物HPLC指纹图谱并结合化学计量学综合分析其质量。方法:基于单因素试验,采用L9(34)正交试验设计,系统研究了乙醇浓度、提取时间、提取次数及料液比等因素对五味子中五味子醇甲和五味子乙素的提取率产生的影响。按最优提取工艺制备9批五味子乙醇提取物,建立其高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。以共有峰峰面积为变量,结合化学计量学方法包括系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)法对9批五味子醇提物质量进行分析。结果:确定最佳提取工艺为:采用80%乙醇作为溶剂,料液比为1:10,进行2次回流提取,每次持续1 h。在9批五味子提取物指纹图谱中共有32个共有峰,并成功鉴定出X18(五味子醇甲)、X29(五味子甲素)和X32(五味子乙素),相似度高于0.94。HCA和PCA结果均显示9批样品有聚为四类的趋势,共有峰X1、X2、X3、X13、X17、X19、X21和X30是引起样品间差异的主要化学成分。结论:所优选的提取工艺稳定可行,不同批次五味子提取物的质量一致性较高,但不同样品间仍存在一定差异。

不同厂家雷公藤多苷片的超高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱结合化学计量学方法,评价不同厂家生产的雷公藤多苷片质量。方法 采用Waters Cortecs T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6μm);乙腈-水系统为流动相,梯度洗脱;流速0.4mL·min^(-1);检测波长220 nm。采用ChemPattern软件建立指纹图谱共有模式,并进行相似度评价、主成分分析和聚类分析。同时采用超高压液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)技术对共有峰进行鉴定。结果 建立了9个厂家共25批雷公藤多苷片的UPLC指纹图谱,标识51个共有峰,鉴定了其中23个色谱峰的结构,发现多数为生物碱类成分。25批样品的相似度为0.18~0.99,存在不同厂家制剂成分差异较大、部分厂家批次间质量不稳定的问题。主成分分析和聚类分析将9个厂家制剂分为3类,并筛选出3个主要差异性成分。结论 UPLC指纹图谱能够反映不同厂家雷公藤多苷片的成分差异,结合化学计量学方法,可为雷公藤多苷片的质量评价提供参考。

赤芝中腺苷和尿苷HPLC指纹图谱及含量分析

采用指纹图谱对赤芝水溶性成分中的腺苷和尿苷进行检测及含量测定,寻找不同来源孢子粉和子实体的含量变化规律,结果表明,不同来源和处理的灵芝粉和孢子粉在指纹图谱上有明显差异。赤芝菌盖中尿苷含量为0.072~0.849 mg·g^(-1),菌柄中尿苷含量为0.056~0.302 mg·g^(-1),破壁孢子粉中尿苷含量为0.032~0.089 mg·g^(-1);赤芝菌盖中腺苷含量为0.019~0.118 mg·g^(-1),菌柄中腺苷含量为0.005~0.024 mg·g^(-1),破壁孢子粉中腺苷含量为0.024~0.107 mg·g^(-1);同品种不同潮次采收的未破壁孢子粉主要成分含量无较大差异;同一品种的破壁孢子粉和未破壁孢子粉之间也无明显差异,但同一品种不同批次的赤芝中腺苷和尿苷含量差异显著。因此,可利用高效液相色谱法指纹图谱在8.5~20.0 min的区域内破壁孢子粉只有一个峰鉴别出破壁孢子粉,利用尿苷和腺苷的含量鉴别孢子粉中是否含有灵芝粉。

小承气汤饮片(水煎液、颗粒)的UPLC指纹图谱相关性研究

目的研究小承气汤饮片(水煎液、颗粒)的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱相关性。方法采用UPLC法建立15批小承气汤饮片(水煎液、颗粒)的指纹图谱,结合相似度评价、皮尔逊相关性分析、聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对三者UPLC指纹图谱的相关性进行评价。结果15批小承气汤饮片(水煎液、颗粒)UPLC指纹图谱均确定了16个共有峰,并指认了14个峰;15批小承气汤饮片(水煎液、颗粒)的指纹图谱与相应对照指纹图谱的相似度均大于0.90,三者对照指纹图谱的相似度均大于0.88。皮尔逊相关性分析结果显示,有8个共有峰在小承气汤饮片(水煎液、颗粒)之间具有极显著正相关关系。CA表明小承气汤水煎液和颗粒性质更接近,PCA发现4个特征值均大于1的主成分,包含了原始数据88%的信息,OPLS-DA筛选出7个变量投影重要性值大于1的差异性标志物。结论小承气汤饮片(水煎液、颗粒)的主要化学成分组成具有一致性,可为小承气汤复方制剂的质量控制和临床使用提供数据支持。