咔唑-9-乙基氯甲酸酯柱前衍生胺类化合物高效液相色谱分离

采用一种新的氯甲酸酯类荧光衍生试剂咔唑 9 乙基氯甲酸酯进行柱前衍生胺类化合物并通过荧光检测的方法进行高效液相色谱 (HPLC)分析。衍生物的荧光激发和发射波长为λex λem =2 93 36 5nm。色谱柱 :HypersilBDSC1 8柱 ,柱温 :35℃ ;流速 :1mL min ;流动相A为水 乙腈 (2 0 80 ,V/V) ,流动相B为乙腈 水 (95 5 ,V/V)。衍生试剂用量 (mol)是胺类化合物总量的 3～ 4倍时 ,衍生化产率最大且恒定。该方法具有检测灵敏度高 ,衍生化反应简单、快速、不受样品基质盐分的干扰 ,尤其适合天然生物样品 ,食品及饲料中的胺类化合物的分析.

肠道病毒71型感染前后宿主细胞蛋白质组的二维液相色谱分离和比较

以肠道病毒71型及其宿主细胞为研究主体,建立了一种二维液相色谱分离和分析比较病毒感染前后细胞蛋白表达谱的方法.该方法以高效液相色谱(HPLC)为技术平台,对细胞裂解物先后进行一维色谱聚焦分离和二维反相色谱分离.利用ProteoVue软件将二维色谱数据转换成模拟胶图,再利用DeltaVue软件对感染前后的宿主蛋白表达谱进行比较和分析,找出差异蛋白.二维液相色谱分离法能够根据蛋白的等电点和疏水性建立精确的细胞蛋白表达图谱,每0.2个pH为一个收集区段,在pH8.5～3.9的范围内可见蛋白条带约1 200条.该方法良好的重现性、自动化以及结果分析的简易化,使之在细胞表达谱差异显示中的应用潜力巨大,并且为研究病毒与宿主相互作用提供了新的方法和思路.

肿瘤细胞蛋白质组的二维液相色谱分离

目的:建立一种利用二维液相色谱法分离肿瘤细胞全细胞裂解液的方法。方法:将肿瘤细胞裂解样品用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,然后先对二维色谱条件进行优化和重现性分析,再将一维收集的pH值8.5-4.0之间的组分分别进行二维反相HPLC分离,利用ProteoVue软件将UV图转换成胶图。结果:一维色谱聚焦分离pH值8.5-4.0之间的组分共收集到16个,每个组分的二维UV图转换成pI／UV胶图。结论:二维液相色谱分离法是一种有效的分离肿瘤细胞裂解液的方法。

脂肪胺荧光衍生物的高效液相色谱分离及质谱鉴定

采用新型荧光衍生试剂2-(9-吖啶酮)-乙酸(AAA)进行柱前衍生并经荧光检测对脂肪胺进行了高效液相色谱(HPLC)分离和在线质谱定性.衍生物荧光激发和发射波长为λex=404nm,λem=440 nm.30℃下在乙腈溶剂中用N-乙基-N'-[(3-二甲氨基)丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC)做催化剂,衍生反应20 min后获得稳定的荧光产物.在Hypersil BDS C18(4.6 mm×100mm,5μm)色谱柱上,采用梯度洗脱对12种脂肪胺衍生物进行了优化分离.采用大气压化学电离源(APCI Source)正离子模式进行在线柱后质谱定性,实现了各种脂肪胺衍生物的快速、准确测定.该方法具有良好的重现性,多数脂肪胺的线性回归系数大于0.999 6,检测限为12.09～25.52fmol.

SDS-蛋白复合物的性质及其液相色谱分离研究

利用一些常用的蛋白质液相色谱的分离方法,首次系统地研完了SDS-蛋白复合物的性质及其液相色谱分离规律,并对有关的原理进行了探讨。该项研究为膜蛋白及基因工程产生的包涵体蛋白的研究提供了重要的参数。

水牛卵泡液液相色谱分离及差异蛋白质分析

本研究采用液相色谱-质谱分离鉴定技术,比较不同直径卵泡液(直径<2mm、直径2～4mm、直径>4mm)的蛋白质组分差异,收集显著差异的馏分,还原烷基化处理后酶解成肽段,再经反相色谱二次分离后质谱鉴定。结果表明,在优势卵泡中(直径>4mm)存在显著高表达的蛋白质峰,质谱鉴定结果为转铁蛋白(transferrin,TRF)。转铁蛋白的功能和表达的变化提示,该蛋白质的高表达可作为潜在排卵的标志物之一。同时,本研究采用的LC-MS技术将为卵泡液大规模蛋白质组分离和表达谱构建提供参考。

大鼠附睾蛋白质组的提取和二维液相色谱分离

背景与目的:提取大鼠附睾液蛋白并建立一种利用二维液相色谱法分离附睾蛋白组的方法。方法:分离提取大鼠附睾液蛋白,样品利用起始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,然后收集pH8.5-4.0之间的组份进行二维反相高压液相色谱分离,最后将获得的二维UV图通过ProteoVue软件转换成PI/UV图谱。结果:成功提取了附睾液蛋白,并通过二维液相色谱成功建立了大鼠头体尾部附睾液蛋白的二维PI/UV图谱,收集了一维色谱聚焦分离的pH8.5-4.0区间的20个组份,并将每个组份进行二维色谱分离后转换为PI/UV图谱。结论:为进一步全面研究附睾蛋白功能和体液差异蛋白质组研究打下了基础。

大鼠附睾液蛋白质组二维液相色谱分离的实验研究

目的建立一种利用二维液相色谱分离和质谱鉴定大鼠附睾液蛋白质组的实验方法,为以后研究其他哺乳动物附睾蛋白质组提供实验基础。方法分离提取大鼠附睾头、体、尾部管腔蛋白,样品经脱盐、浓缩,利用起始缓冲液置换,进行一维色谱聚焦分离,收集pH4．0—8．5之间的组分进行二维反相色谱分离,并通过自动馏分收集器收集分离组份;最后将获得的二维UV图通过ProteoVue软件转换成二维pL／UV图谱;选择含高丰度蛋白的馏分经冷冻干燥浓缩后进行质谱鉴定。结果通过二维液相色谱成功分离了大鼠附睾头、体、尾部附睾液蛋白并建立了二维pL／UV图谱;对二维获得的含高丰度蛋白的馏分进行了质谱鉴定,获得大鼠附睾头、体、尾部主要蛋白。结论为进一步利用二维液相色谱全面分离附睾蛋白和研究附睾功能奠定了基础。

二维液相色谱分离中药复方银黄口服液中的有效成分

建立了二维液相色谱方法分离中药复方银黄口服液的成分。按照中国药典银黄口服液项下比例制备[1],以CN柱作第一维色谱柱,甲醇和0.1%甲酸水溶液梯度洗脱分离;以C18柱作第二维色谱柱,乙腈和0.1%甲酸水溶液梯度洗脱分离。搭建的二维液相色谱的峰容量显著高于一维色谱,分离效率得到了明显的提高。该方法操作简便,可作为中药等复杂体系分离分析的有效手段。

金属螯合物高效液相色谱分离智能解释系统

首先介绍研究金属螯合物（ｍｅｔａｌｃｈｅｌａｔｅ：ＭＣ）高效液相色谱分离（ＨｉｇｈＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：ＨＰＬＣ）智能解释系统（ＩｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔＥｘｐｌａｎａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ：ＩＸＳ）的意义。然后，基于系统实际功能构成，着重阐述了产生式规则的知识表示及知识库管理系统、控制策略、反向推理算法和似然推理ＣＦ（ＣｅｒｔａｉｎｔｙＦａｃｔｏｒ）模型、动态数据库管理系统、解释模块的研究及其实现。

小鼠肝脏磷酸化蛋白质组的二维液相色谱分离

目的利用二维液相色谱法分离小鼠肝脏磷酸化蛋白质组。方法取正常小鼠肝脏,裂解肝脏后利用金属磷酸盐亲和层析树脂提取磷酸化蛋白。将磷酸化蛋白用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,再将一维收集的pH值在8.5至4.0之间的组分分别进行二维无孔硅胶反相高效液相色谱分离。最后利用ProteoVue软件将二维UV图转换成胶图进行分析。结果成功提取了小鼠肝脏磷酸化蛋白,并在浓缩除盐后通过二维液相色谱分离成功建立小鼠肝脏磷酸化蛋白质组pI/UV图谱。其中,一维色谱聚焦分离pH值在8.5至4.0之间共收集16个组分,每个组分的二维UV图转换成pI/UV胶图。结论磷酸化蛋白纯化技术与二维液相色谱技术的结合是研究磷酸化蛋白质组的有效方法,为下一步鉴定和研究磷酸化蛋白的功能打下坚实的基础。

小鼠肝脏磷酸化蛋白质组的二维液相色谱分离(英文)

目的利用二维液相色谱法分离小鼠肝脏磷酸化蛋白质组。方法取正常小鼠肝脏,裂解肝脏后利用磷酸盐金属亲和层析(PMAC)树脂提取磷酸化蛋白。将磷酸化蛋白用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,再将一维收集的pH值在8.5至4.0之间的组分分别进行二维无孔硅胶反相高效液相色谱(RPHPLC)分离。最后利用ProteoVue软件将二维UV图转换成胶图进行分析。结果成功提取了小鼠肝脏磷酸化蛋白,并在浓缩除盐后通过二维液相色谱分离成功建立小鼠肝脏磷酸化蛋白质组pI/UV图谱。其中,一维色谱聚焦分离pH值在8.5至4.0之间共收集16个组分,每个组分的二维UV图转换成pI/UV胶图。结论磷酸化蛋白纯化技术与二维液相色谱技术的结合是研究磷酸化蛋白质组的有效方法,为下一步鉴定和研究磷酸化蛋白的功能打下了基础。

《液相色谱分离材料——制备与应用》

《液相色谱分离材料——制备与应用》（化学工业出版社,2016）由欧俊杰、邹汉法等二十余名在色谱领域从事基础研究和应用的专家集体编著而成。背景色谱作为一种分离技术与方法,已有100年的历史,从技术到理论建立了多种分离模式,并应用于多个科学领域,已经成为分析化学学科中的一个重要分支。人们把色谱柱比喻成色谱的＂心脏＂,其最关键部分是填充在色谱柱内的分离材料。色谱填料的发展是色谱分析的关键,是各种HPLC分离模式赖以建立和发展的基础。液相色谱柱制备技术作为HPLC技术的核心一直是研究的热点,开发新型液相色谱固定相依然是色谱研究工作者的重要研究内容之一。

一种低压液相色谱分离方法及其装置

一种低压液相色谱分离方法及其装置，属于分析化学领域，它公开了一种在0．1～0．5MPa低压下的液相色谱分离方法，以及与该分离方法相配套的分离装置。该装置包括色谱柱和盛放液体的储液槽。储液槽和色谱柱连为一体，在储液槽上设有气体进入口，通过阀门和供气系统相连。利用该方法，可以克服当前普遍使用的经典液相色谱法和高效液相色谱法所存在的缺陷，在强酸介质中实现快速、高效、经济的色谱分离。

反相液相色谱分离肾上腺皮质激素

使用安捷伦新的C18反相色谱柱，以水／乙腈或水／甲醇为流动相可以轻松分离肾上隙皮质激素。本文应用等度洗脱，成功开发了一个OTC膏剂中氢化可的松的定量分析方法。

疣缟芋螺毒素的二维液相色谱分离方法

目的建立一种新的基于二维液相色谱技术的疣缟芋螺毒素分离方法,了解其毒素组构成特点。方法从疣缟芋螺毒管中提取芋螺毒素总肽,在传统的凝胶色谱和反相色谱方法的基础上,根据芋螺毒素的等电点和疏水性,利用目标蛋白快速分离系统(Proteome Lab TMPF2D),对其进行二维分离。结果经过传统分离方法,能够检测得到40个左右的芋螺毒素条带,且分离效果不明显。而通过二维液相色谱分离方法,pI/UV图谱显示共检测到约200个芋螺毒素条带。结论同传统分离方法相比,采用Proteome LabTMPF2D系统对毒素分离更快速、分辨率更高,因此更利于鉴定芋螺毒素肽组分,也为下游序列结构特征与生物活性研究奠定了良好的基础。

快速高分离液相色谱-串联质谱法测定植物组织中雌激素玉米赤霉醇类化合物

应用快速高分离液相色谱-串联质谱仪(RRLC-MS/MS),建立了植物组织中玉米赤霉醇类化合物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮)的检测方法。植物组织样品采用乙腈提取,碱性水溶液反萃取,经混合阴离子(MAX)固相萃取柱进行净化和富集后,用RRLC-MS/MS检测,多反应监测(MRM)模式下进行定性与定量分析。结果表明:玉米赤霉醇类化合物在0～20μg/kg的线性范围内均具有良好的线性关系,方法检出限(LOD)为0.5μg/kg,定量限(LOQ)为1.0μg/kg,6种玉米赤霉醇类化合物的平均回收率为75.8%～105.4%,相对标准偏差为2.4%～12.1%。本方法可用于植物组织中玉米赤霉醇类化合物含量的测定。

用快速分离柱高效液相色谱法测定烟草中的几种酚

研究了用快速分离柱高效液相色谱法测定烟草样品中的苯酚、苯二酚和甲基苯酚。烟草样品中的酚经水蒸汽蒸馏分离后用Waters Sep-Pak-C18固相萃取小柱富集，以ZORBAX Stable Bound（4.6 mm i.d.×20 mm，1.8μm）快速分离柱为固定相，0.05 mol/L KH2PO4缓冲溶液-甲醇梯度为流动相，几种主要酚在2.0 min内可达到基线分离；该方法的相对标准偏差为2.1%-3.6%，标准加入的回收率为88%-97%，已用于几种烟草样品测定。

热浸提-高效液相色谱等度分离-原子荧光光谱法测定水产品中的4种砷形态

建立了水产品中4种砷形态的热浸提-高效液相色谱等度分离-原子荧光光谱分析法,并对流动相浓度及pH、流速、载流浓度、泵速、硼氢化钾浓度等条件进行了优化。在最佳实验条件下,亚砷酸[As(Ⅲ)]、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)和砷酸[As(Ⅴ)]4种砷形态在5~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.9995,检出限在0.01~0.03 mg/kg,相对标准偏差(RSD,n=7)在1.5%~5.0%。同时对不同样品进行3个水平的加标回收实验,各组分的加标回收率在84.0%~97.5%。该方法操作简便,准确度好,精密度高,可用于测定水产品中的砷形态。