优化高效液相色谱荧光法测定水产品中孔雀石绿残留量

为了提高国家标准GB/T 20361—2006中测定水产品中孔雀石绿残留量的高效液相色谱荧光法的回收率,分析影响方法回收率和重复性的关键因素,进行旋转蒸发和固相萃取优化实验。结果表明:在最佳旋转蒸发模式下,旋转蒸发总时间为40 min,浓缩回收率大于95%,采用混合阳离子固相萃取柱进行净化,净化回收率大于97%;优化高效液相色谱荧光法的总体回收率为85.5%~92.5%,相对标准偏差为2.04%~4.88%,测定限为0.33μg/kg;对浓缩和净化过程进行优化后使得前处理步骤简化,方法灵敏度高,重现性好,适用于水产品中孔雀石绿残留量的测定。

免疫亲和柱净化-光化学衍生高效液相色谱荧光法测定植物油中黄曲霉毒素B_1的含量

建立了免疫亲和柱净化-光化学衍生高效液相色谱荧光法测定植物油中黄曲霉毒素B1含量的方法，并对样品的测定条件进行了优化。结果表明：植物油的称样量缩减为5．00 g，黄曲霉毒素B1测定结果与GB/T 18979-2003测定结果基本吻合；工作曲线在1-40 ng/mL质量浓度范围内具有良好的线性关系，相关系数为0．9999，方法检出限为0．3μg/kg；在空白样品中添加低、中、高3个不同添加量水平的黄曲霉毒素B1标准品，其回收率在90．5%-99．8%之间，相对标准偏差在6．3%-9．8%之间。采用光化学衍生，操作简单，无需衍生剂，避免了柱前衍生和柱后衍生受衍生剂浓度、温度、反应时间的影响，所建立的方法适用于植物油中黄曲霉毒素B1含量的测定。

液相色谱荧光法测定稻谷及秸秆中阿维菌素残留量

[目的]运用柱前衍生-高效液相色谱荧光法,建立稻米及水稻秸秆中阿维菌素残留量的测定方法。[方法]稻米样品采用乙腈-乙酸乙酯(1∶1,V∶V)提取,水稻秸秆采用乙酸乙酯提取。提取液经三氟乙酸酐和N-甲基咪唑衍生化后,高效液相色谱荧光法测定。[结果]结果表明,在0.001～0.100mg/kg的添加浓度范围内,阿维菌素在稻米中的添加回收率为80.1%～94.5%,变异系数为3.5%～6.2%;在水稻秸秆中的回收率为77.8%～82.8%,变异系数为1.1%～4.9%。该方法在稻谷中的最小检测浓度为1.000μg/kg,在秸秆中的最小检测浓度为0.500μg/kg。[结论]该方法的灵敏度与准确度符合农药残留分析要求。

固相萃取-高效液相色谱荧光法快速检测食用油中的黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2

采用黄曲霉毒素专用固相萃取柱HiCapt Aft萃取食用油中的5种黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2,结合高效液相色谱荧光分离检测,建立了一种食用油中5种黄曲霉毒素的简单、快速、灵敏、低成本的分析方法。对色谱分离和样品前处理条件进行了优化,在优化好的条件下,G2、B2、B1在0.1~50.0μg/kg,M1、G1在0.5~50.0μg/kg时,5种黄曲霉毒素的质量浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数的平方（R2）都为0.9999。低中高3种添加浓度的加标回收率在81.3%~103.7%,日内日间相对标准偏差分别小于8.6%和9.5%。与传统方法相比,该方法快速简单、有机溶剂消耗少、检测成本低,在食用油黄曲霉毒素的分析中具有较大的应用前景。

固相萃取/高效液相色谱荧光法测定草珊瑚中苯并[α]芘残留

采用固相萃取方法,建立了草珊瑚中苯并[α]芘的高效液相色谱荧光测定方法。以正己烷为提取溶剂对草珊瑚样品进行提取,经中性氧化铝固相萃取柱净化样品后,用高效液相色谱荧光检测器检测,荧光检测器激发波长为370 nm,发射波长为425 nm,流动相为乙腈-水（85∶15）,流速为1.0 m L/min。结果表明：苯并[α]芘在0～20 ng/m L浓度范围内线性关系良好,相关系数（r）为0.999 9,定量下限为0.36μg/kg,回收率为84.4%～101.9%,相对标准偏差（RSD）为1.6%～5.6%。该方法准确,灵敏度高,重复性好,适用于植物药材中苯并[α]芘残留的测定。

高效液相色谱荧光法测定人血浆中唑吡坦浓度及生物等效性研究

目的:建立高效液相色谱荧光法(HPLC-FLU)测定人血浆中唑吡坦的血药浓度并对其口服制剂人体生物等效性进行研究,为临床用药提供参考依据。方法:采用随机自身对照双周期交叉实验设计,18名健康受试者口服受试制剂和参比制剂10 mg,用HPLC-FLU法测定人血浆中的唑吡坦浓度,用非房室模型估算唑吡坦的药动学参数。结果:受试制剂和参比制剂的药动学参数如下:AUC_(0-τ)分别为(564.19±139.11)和(451.58±115.94)μg·h·L^(-1);AUC_(0-∞)分别为(588.49±139.40)和(474.56±119.43)μg·h·L^(-1);C_(max)分别为(155.48±39.43)和(125.11±33.33)μg·L^(-1);t_(max)分别为(0.75±0.27)和(1.14±0.31)h;t_(1/2)分别为(1.76±0.69)和(2.12±0.51)h。受试制剂的相对生物利用度为(126.0±12.0)%。结论:经统计学分析,两种国产唑吡坦片剂不具有生物等效性。

高效液相色谱荧光法测定异丙酚血药浓度

目的 测定异丙酚全血浓度。方法 抗凝全血经环己烷提取后，氮气吹干。残余物用流动相溶解后由高效液相色谱仪进行测定。流动相为乙腈－ 双蒸水－ 三氟醋酸（４０∶６０∶０．１） 。荧光检测器，激发波长２７６ ｎｍ ，发射波长３１０ ｎｍ 。结果 该方法的最低检测浓度为２５ μｇ·Ｌ－１ 。日内相对标准偏差＝４ ．１％ ，日间相对标准偏差＝４．０％ ． 回收率为９０ ．３ ％ 。结论 本方法检测异丙酚全血浓度，灵敏度、精密性和稳定性均较高，实用性强。

高效液相色谱荧光法测定尿中二元有机酸研究

目的：建立尿中丙二酸、丁二酸、戊二酸3种二元有机酸的高效液相色谱荧光测定方法。方法：采用荧光检测器，利用Waters C18（250mm×4．6mmi．d．，5μm）色谱柱，以70％（v／v）乙腈为淋洗液，流速1．0ml／min，采用激发波长345nm、发射波长480nm进行检测，外标法定量。结果：丙二酸、丁二酸、戊二酸在相应的试验浓度范围内均具有良好的线性关系，其相关系数均大于0．999，最低检出限在0．02～0．2mg／L范围，平均回收率在80．2％～109．6％之间，RSD均小于5．0％。结论：该法具有简单、准确、灵敏等优点，适合尿中丙二酸、丁二酸、戊二酸含量的检测。

高效液相色谱荧光法测定胡椒中的阿维菌素

建立以高效液相色谱荧光(HPLC-FLD)法测定胡椒(Piper nigrum L.)中阿维菌素含量的方法。样品用乙腈提取,经氨基柱净化,衍生后,以HPLC-FLD法分析。结果表明,该法在添加回收浓度为0.005,0.010和0.050 mg/kg 3个不同添加水平的回收率为95%～103%,其检出限为0.005 mg/kg。

高效液相色谱荧光法测定人血浆中奥美沙坦浓度

目的建立奥美沙坦血药浓度的高效液相色谱法。方法以盐酸哌唑嗪为内标,血浆样品用沉淀法,色谱柱为奥泰Apollo C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),在线过滤器;以0.1%三乙胺水溶液(甲酸调pH为2.5)-乙腈(75∶25)为流动相;激发波长为260 nm,发射波长为379 nm;流速为1.0 mL/min,柱温为25℃。结果奥美沙坦质量浓度线性范围是10.00～1 280.00 ng/mL(r=0.999 6),最低检测浓度为10.00 ng/mL,方法的相对回收率为97.53%～99.24%(n=5),绝对回收率为86.89%～89.32%(n=5),日内RSD为1.25%～2.26%,日间RSD为1.14%～5.55%。结论该方法简便、准确、灵敏,特异性强,重复性好,可用于血浆中奥美沙坦的测定及药代动力学研究。

高效液相色谱荧光法测定人血浆中顺式阿曲库铵浓度

目的建立测定人血浆中顺式阿曲库铵质量浓度的高效液相色谱荧光法。方法采用乙腈沉淀蛋白进行血样处理,色谱柱为Dia-monsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.04 mol/L磷酸二氢钾(pH 3.0)-乙腈(60∶40),流速为0.5 mL/min,荧光激发波长为230 nm,发射波长为324 nm。结果顺式阿曲库铵进样质量浓度在10.0～2 500 ng/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 0,n=7),检测限和定量限分别为2.5 ng/mL和10 ng/mL,日内RSD小于3.6%,日间RSD小于4.0%,提取回收率为88.91%～91.09%,方法回收率为97.95%～98.70%。结论该方法简便、灵敏、准确、重现性好,适用于人体内顺式阿曲库铵药物代射动力学的研究。

超高效液相色谱荧光法测定大豆中黄曲霉毒素B_1含量

应用超高效液相色谱荧光法（UPLC-FLD）测定大豆中黄曲霉毒素B1（AFB1）含量。大豆样品经过乙腈-水（80／20）提取，净化，通过BEHC18色谱柱分离，乙腈-水作为流动相进行梯度洗脱，荧光检测器检测，外标法定量。结果表明：AFaB1在0．5～100．0μg／L浓度范围内成良好的线性关系，0．2、1．0、5．0μg／kg3个浓度梯度的回收率为87．8％～96．3％，相对标准偏差为2．36％～6．55％。该方法简便、高效、准确，适用于大豆中痕量AFB1的检测。

高效液相色谱荧光法测定印染废水中的二苯胺

建立了印染废水中微量二苯胺的高效液相色谱荧光检测方法。样品经HLB固相萃取小柱净化、浓缩后,在Kromasil C18色谱柱上以水/乙腈（体积比20/80）为流动相进行分离,采用荧光检测器检测,检测波长λex为265 nm,λem为350 nm。二苯胺在5.0~500.0μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数〉0.999,回收率为92.3%~104.2%,相对标准偏差（RSD）为1.2%~4.1%,方法的定量检出限（LOQ）为2.5μg/L。通过试验条件优化建立的方法干扰少、灵敏度高,适用于印染废水中二苯胺的检测。

固相萃取-高效液相色谱荧光法测定液态奶制品中的黄曲霉毒素M1和B1

建立了固相萃取一高效液相色谱荧光法测定液态奶制品中的黄曲霉毒素M_1和B_1的方法。液态奶制品样品用乙腈一正己烷提取,盐析分层,浓缩后经黄曲霉毒素专用固相萃取柱净化富集,以高效液相色谱荧光法对样品中黄曲霉毒素M_1和B_1进行分离分析。在0.1~50.0μg/kg范围内黄曲霉毒素的质量浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数的平方大于0.999 6。黄曲霉毒素M_1和B_1在低、中、高3个浓度的加标回收率分别在69.5%~81.6%和73.0%~87.9%之间,日内日间相对标准偏差低于13.3%。在最优条件下对5种不同的液态奶制品样品进行了加标回收实验,表明该方法具有很好的适用性,可用于各种液态奶制品中黄曲霉毒素M_1和B_1的分析。

高效液相色谱荧光法检测南瓜中色氨酸的含量

目的建立高效液相色谱荧光法测定南瓜中色氨酸的检测方法。方法南瓜样品经蛋白酶水解后,经C_(18)色谱柱分离,以甲醇-0.0085 mol/L乙酸钠溶液作为流动相等度洗脱。采用荧光检测器检测,激发波长283 nm,发射波长343 nm。结果色氨酸在质量浓度为1.0~100 mg/L范围内线性关系良好,相关系数(r2)>0.999,检出限和定量限分别为17、50 mg/kg。在低、中、高3个加标水平下的回收率为95.9%~100.8%,相对标准偏差为1.11%~2.44%(n=6)。结论本方法操作简单、便捷,准确度高,重现性好,适用于南瓜中色氨酸的检测。

高效液相色谱荧光法测定血液透析器中双酚A溶出量

建立高效液相色谱荧光法测定血液透析器中双酚A的溶出量。采用甲醇作为替代溶剂,模拟产品临床使用,循环5 h,以评估血液透析器临床接触量。双酚A的最佳激发波长和发射波长分别为232、314 nm。双酚A质量浓度在51.2~1024 ng/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,线性相关系数为0.9999,方法检出限为10.8 ng/mL。加标回收率为90.23%~104.21%,测定结果的相对标准偏差为0.8318%~3.661%(n=6)。该方法专属性强,可用于血液透析器中双酚A溶出量的测定。

用免疫亲和柱净化-柱后衍生高效液相色谱荧光法检测山楂干中多种黄曲霉毒素含量的效果观察

目的:探讨用免疫亲和柱净化-柱后衍生高效液相色谱荧光法检测山楂干中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2含量的效果。方法:采用免疫亲和柱净化-柱后衍生高效液相色谱荧光法进行本次实验。本次实验的色谱柱为Agilent TC-C18(2)柱(250 mm×4.6 mm,5 um),其流动相为甲醇-乙腈-水(40:20:40),其色谱柱的流速为0.8 ml/min,其柱温为40℃,其激发的波长λex为360nm,其发射的波长λem为450 nm。使用的衍生液是浓度为0.05%的碘溶液,衍生化泵的流速为0.3 ml/min,进行衍生化的温度为70℃,进样量为20μl。结果:黄曲霉素B1在0.6～50 pg、黄曲霉素B2在0.1～15 pg、黄曲霉素G1在0.7～50 pg、黄曲霉素G2在0.2～15 pg范围内时与各自的峰面积呈良好的线性关系,进行精密度实验、稳定性实验、重复性实验的RSD均≤2.0%,加样回收率为79.4%～89.9%,RSD为3.1%～4.3%。结论:用免疫亲和柱净化-柱后衍生高效液相色谱荧光法检测山楂干中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2含量的效果较为理想。

高效液相色谱荧光法测定炒党参中4种多环芳烃

目的:建立高效液相色谱荧光法(HPLC-FLD)测定炒党参中苯并[a]蒽、䓛、苯并[b]荧蒽和苯并[a]芘4种多环芳烃的含量。方法:采用Waters PAH C_(18)色谱柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速为1.2 mL·min^(-1)。结果:4种多环芳烃在1.00~100 ng·L^(-1)浓度范围内线性良好,相关系数r≥0.9998,加标回收率为84.5%~90.6%,RSD为1.0%~1.9%,检测限为0.012~0.042μg·kg^(-1)。结论:该方法具有操作简便、灵敏度高、准确度好等优点,可以用于炒党参中4种多环芳烃含量的测定。

柱前衍生-高效液相色谱荧光法测定婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖含量

目的建立柱前衍生-高效液相色谱荧光法测定婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖的检测方法。方法样品经乙酸调节pH到4.5,使用淀粉葡萄糖苷酶和β-半乳糖苷酶酶解、2-氨基苯甲酰胺衍生。经色谱柱分离,荧光检测器检测。通过响应曲面设计优化衍生关键因素水平,包括衍生剂浓度、衍生温度与衍生时间。结果优化后的衍生剂浓度为0.45mol/L、衍生温度为55℃与衍生时间为120min。定量化合物3’-半乳糖基乳糖在10.0~100.0mg/L范围内线性良好(r^(2)=0.9993)。在低聚半乳糖添加水平为2.5、10.0、40.0g/kg时,回收率为92.5~102.7%,相对标准偏差为3.69%~6.69%(n=6)。方法检出限为0.8 g/kg,定量限为2.5 g/kg。结论本方法操作简单、回收率高和重现性好,可使用3’-半乳糖基乳糖对婴幼儿配方乳粉中的低聚半乳糖进行定量分析。