基于超高效液相色谱—高分辨质谱联用方法及网络药理学的芪玉颗粒降血糖作用机制研究

目的 基于超高效液相色谱—高分辨质谱联用方法(ultra-performance liquid chromatography/quadrupole time-of-flight-tandem mass spectrometry, UPLC-Q-TOF/MS)及网络药理学技术探究芪玉颗粒降血糖的作用机制。方法 利用UPLC-Q-TOF/MS技术对芪玉颗粒的入血成分进行研究,再以入血成分为药效成分进行网络药理学分析构建成分—靶点—疾病网络,预测芪玉颗粒治疗糖尿病可能的作用机制,并建立高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素诱导的糖尿病模型验证芪玉颗粒对糖尿病大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase, PI3K)-丝氨酸—苏氨酸激酶(threonine-protein kinase1, AKT)-磷酸化的糖原合成酶激酶-3β/糖原合成激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)通路的调节作用。结果 入血成分分析共鉴定出葛根素、黄芪甲苷、白杨素、大豆苷等17个原型成分和来源于咖啡酸、葛根素、阿魏酸、大豆苷等成分的69个代谢产物,结合网络药理学分析结果共得到肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)、丝氨酸—苏氨酸激酶1(threonine-protein kinase1, AKT1)等98个关键靶点及癌症的途径、胰岛素抵抗等144条通路。芪玉颗粒给药9周后,糖尿病大鼠血糖显著下降(P<0.001),PI3K、AKT、GSK-3β明显升高(P<0.01,P<0.05,P<0.001)。结论 通过血清药物化学结合网络药理学挖掘预测芪玉颗粒防治糖尿病的作用机制,为芪玉颗粒的降血糖作用机制研究及质控评价提供科学依据。动物实验初步证实了芪玉颗粒可通过调控PI3K-Akt-GSK-3β信号通路相关蛋白发挥预防治疗糖尿病的作用。

大鼠血浆五味子甲素、乙素、醇甲和酯甲高效液相色谱串联质谱测定方法的建立

目的：建立大鼠血浆中五味子甲素、乙素、醇甲和酯甲的高效液相色谱串联质谱（LC-MS／MS）分析方法，为五味子提取物中四种主要成分的药代动力学研究提供理想的测定手段。方法：采用高效液相色谱串联线性离子阱质谱同时检测五味子提取物中四种主要成分，采用电喷雾（ESI）离子源，多反应监测模式（MRM）进行检测。色谱柱为ZORBAX SB-C18（2．1×100mm，3．5μm），流动相为甲醇-水（75：25，0．1％甲酸），流速为0．2mL／min。双环醇（BY）为内标（IS），血浆样品经甲醇沉淀、高速离心后进样分析，各成分监测离子分别为：甲素m／z 439→393，乙素m／z 423→377，醇甲m／z 455→409，酯甲m／z 559→437，BYm／z 413→399。结果：五味子甲素、醇甲、乙素、酯甲在0．01～2．0μg／mL的浓度范围内线性关系良好，，最低定量限为0．01～0．02／mL，R2〉0．99。五味子四种成分的日内和日间精密度RSD均〈15％，绝对回收率〉80％。结论：本研究成功建立了大鼠血浆中五味子甲素、乙素、醇甲和酯甲的高效液相色谱串联质谱定量方法，该方法专属性强、快速、灵敏、可靠，可满足五味子提取物中四种主要成分药代动力学研究的要求。

超高效液相色谱-同位素稀释质谱法测定配方奶粉中的泛酸

建立测定配方奶粉中泛酸的超高效液相色谱-同位素稀释质谱方法.样品经乙酸铵溶液提取、三氯甲烷除蛋白后,进行超高效液相色谱-串联质谱分析,采用HSS T3液相色谱柱分离,以10 mmol/L乙酸铵溶液（含0.1％甲酸）和乙腈为流动相进行梯度洗脱,多反应监测模式,内标法定量.结果表明：方法定量限为0.040 mg/100 g,线性范围内低、中、高3个标准添加水平的回收率为96.9％～104.3％,相对标准偏差为3.78％～5.04％.该方法操作过程简单、分析周期短、灵敏度高、重复性好,适用于奶粉中泛酸的测定.

液相色谱-质谱串联法测定人血浆头孢卡品浓度

目的建立测定人血浆头孢卡品浓度的液相色谱-质谱串联方法。方法血浆样品经甲醇沉淀蛋白,以甲醇∶2.5 mmol.L-1醋酸铵缓冲液(32∶68)为流动相,Waters Symmetry C18(3.9 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离,样本经电喷雾离子源负离子化,通过三重四极杆串联质谱仪,在多反应监测模式下对头孢卡品(m/z452.1→348.1)和内标头孢拉定(m/z409.1→270.0)的浓度进行测定。结果血浆头孢卡品在3.600～3 600μg.L-1范围内线性良好,定量下限3.600μg.L-1,批内精密度<4.3%,批间精密度<2.1%,提取回收率为97.0%～102.5%。结论该分析方法简便、灵敏、准确,适用于盐酸头孢卡品酯片人体药动学研究。

超高效液相色谱-质谱/质谱联用法快速测定苦碟子注射液中两种倍半萜内酯类成分的含量

目的:建立快速测定苦碟子注射液中两种倍半萜内酯类成分Ixerin Z、11,13α-dihydroixerin Z含量的超高效液相色谱-质谱/质谱联用方法(UPLC-ESI-MS/MS)。方法:采用Waters ACQUITY BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为乙腈-水系统梯度洗脱,流速为0.4 m L·min-1,柱温为40℃;在ESI负离子模式下,采用多反应离子监测(MRM)扫描方式进行检测。结果:苦碟子注射液中两种倍半萜内酯类成分在2 min内完全分离,Ixerin Z的线性范围在5.70-182.50 ng·m L-1,11,13α-dihydroixerin Z的线性范围在4.60-131.25 ng·m L-1,相关系数r均大于0.999 0,加样回收率(n=6)分别为98.18%、97.52%,RSD值均小于1.5%。应用所建立的方法对市售苦碟子注射液中两种倍半萜内酯类成分Ixerin Z、11,13α-dihydroixerin Z进行含量测定,两个厂家6个批次苦碟子注射液中Ixerin Z、11,13α-dihydroixerin Z的含量有一定的差异。结论:所建立的方法快速、准确、灵敏,可用于苦碟子注射液中两种倍半萜内酯类成分的含量测定。

液相色谱—质谱联用法测定生猪尿中多残留物

建立了生猪尿中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇残留检测的(HPLC-MS/MS)。猪尿经酶解后,通过调pH值9. 5、用OasisMCX萃取柱子依次用5mL甲醇,5mL水活化,取备用液全部过柱,再依次用5mL水、5mL2%的甲酸水溶液、5mL甲醇淋洗,减压抽干,用5mL 5%的氨水甲醇溶液洗脱,洗脱液在50℃下用氮气吹干,残余物用0. 5mL的甲醇水(1∶9)定容,同时对样品基质影响的分析、净化过程的质谱条件、梯度洗脱条件等进行了优化得出了较好的实验效果。

超高效液相色谱-串联质谱法-非衍生化-QuEchERS快速测定奶酪中8种生物胺

目的:建立奶酪中组胺、腐胺、酪胺、尸胺、色胺、β-苯乙胺、精胺和亚精胺的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。方法:样品经水提取后,经ODS-H C_(18)色谱柱分离,0.1%甲酸-水、0.1%甲酸-乙腈溶液作为流动相体系梯度洗脱,ESI源电喷雾正离子扫描,多反应监测模式下获得质谱数据,外标法定量。结果:15 min内8种生物胺分离良好,10~2000 ng·mL^(-1)线性良好,相关系数R均≥0.995;检出限为0.05 mg·kg^(-1);定量限为0.15 mg·kg^(-1);奶酪样品中生物胺的回收率为76%~106%,相对标准偏差<10%。结论:该方法操作便捷、快速高效、测定结果可靠,适用于实验室批量样品的检测。

比较高效液相色谱法与液相色谱质谱联用方法测定大鼠肾脏中多黏菌素B的浓度

目的建立高效液相色谱紫外法测定大鼠肾脏组织中多黏菌素B的含量,并与液相色谱质谱联用方法测定的结果进行对比。方法色谱条件：色谱柱为Platisil ODS C18（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-无水硫酸钠（7 g·L-1）-磷酸（6.8%,V/V）-水（22.25∶50∶5∶22.75）,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为205 nm,蛋白沉淀剂：磺基水杨酸。将多黏菌素B2.5 mg·kg-1连续2 d从尾静脉给予各组大鼠,然后分别给予4、8和16 mg·kg-1,连续给药3 d,检测大鼠肾脏中的多黏菌素B的浓度,并以LC-MS/MS进行结果验证。结果采用高效液相方法时,肾脏组织中多黏菌素B检测浓度线性范围为2~20μg·m L-1（r=0.997 8）。体外高、中、低3个浓度的绝对回收率在97%~102%之间;日内、日间精密度的RSD均小于5.0%;样品处理前后及反复冻融后稳定性的RSD均小于10%。高、中、低3个剂量组大鼠肾脏中药物含量分别为（86.16±3.28）、（47.40±0.51）、（21.48±1.63）μg·g-1。液相色谱质谱联用方法验证结果分别为（80.64±2.17）、（42.44±0.61）、（24.46±3.04）μg·g-1,两种方法检测结果的误差均在20%以内。结论本实验建立的高效液相色谱紫外法可用于检测大鼠肾脏中多黏菌素B的含量,其结果与液相色谱质谱联用方法测定的结果相似。

高效液相色谱-质谱法测定人血浆中褪黑素浓度

目的采用高效液相-串联质谱方法测定血浆褪黑素的药物浓度。方法血浆样本经乙酸乙酯提取后,上清液经真空浓缩仪浓缩吹干,残留样本使用流动相[0.1%甲酸水溶液-甲醇(56∶44)]溶解,高速离心后取上清液进样,样本经Xterra~RP_(18)(4.6 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱分离后由电喷雾离子源正离子化后,通过三重四极杆串联质谱仪,在多反应监测模式下对褪黑素(m/z 233.1→174.1)和内标褪黑素-D7(m/z 240.2→178.0)的浓度进行测定。结果褪黑素的血浆浓度在0.020 00~30.00 ng·m L^(-1)内线性良好,定量下限为0.020 00 ng·m L^(-1),批内、批间精密度<15%,提取回收率为59.0%~65.0%,基质效应为95.5%~98.9%,变异小于15%。结论该分析方法简便、灵敏、准确,适用于褪黑素缓释片人体药动学研究。

液相-高分辨质谱法测定维格列汀原料药中三种潜在基因毒性杂质

建立液相-高分辨质谱联用法(LC-HRMS)测定维格列汀原料药中的三种卤代烷烃类潜在基因毒性杂质。方法 借助Agilent Eclipse C18(4.6×100 mm,3.5 μm)色谱柱,流动相为0.1 %甲酸水溶液(A)-甲醇(B),实施梯度洗脱,设置为30 ºC柱温、0.4ml/min流速。使用轨道阱高分辨质谱(Q Exactive),采用大气压化学电离(APCI)离子源,正离子模式进行定量分析。结果 基因毒性杂质VGZ-1、VGZ-2、VG-2浓度在18.8~150 ng·mL-1范围内线性关系良好(r ≥0.999);检测限为18.75 ng·mL-1,定量限为37.5 ng·mL-1;三种基因毒性杂质加样回收率分别为93.1 %、101.6 %和101.0 %;进样精密度峰面积RSD均在0.7 %~1.7 %之间,重复性良好。结论 本方法所用方法专属性强、准确性好、灵敏度高可用于维格列汀原料药中三种潜在基因毒性杂质(VGZ-1、VGZ-2、VG-2)的检测。

干血点技术在反兴奋剂领域的应用研究与前景展望

作为一种血液样本的替代采集方法,干血点(dried blood spot,DBS)采样技术在新生儿筛查以及临床和药学等领域被广泛应用,同时在反兴奋剂领域也受到了关注。为进一步了解DBS在运动员样本的采集、运输、保存等方面的潜在优势以及在兴奋剂检测中的研究现状,对近10年的相关文献资料进行归纳总结,发现DBS技术具有操作简单、血量需求少、微创性、易保存与运输等优势,克服了传统采样方法的诸多缺点;同时,DBS与液相色谱和质谱技术联用在各类禁用物质检测中也显示出一定优势,DBS是一种良好的替代或补充基质。就DBS在当前应用中面临的难点以及可能的解决方法进行探讨,并对DBS在反兴奋剂领域的应用前景进行展望。

复方苯磺酸氨氯地平/阿托伐他汀钙片的人体药动学

目的:研究复方苯磺酸氨氯地平/阿托伐他汀钙片中氨氯地平和阿托伐他汀钙在健康人体的药动学特征。方法:30名健康志愿者随机分成3组,每组10名(男女各半),分别单次空腹口服不同规格的受试药品复方苯磺酸氨氯地平/阿托伐他汀钙片,规格分别为5mg/10mg/片,10mg/10mg/片,5mg/20mg/片各1片,采用液相色谱串联质谱方法(LC-MS/MS)研究2种成分的血药浓度经时过程,计算相应的药动学参数,并评价复方苯磺酸氨氯地平/阿托伐他汀钙片在人体的药动学特征。结果:氨氯地平5mg/10mg/片剂量组中的药动学参数分别为Cmax为(3.1±0.5)μg.L-1,AUC0-120为(131±22)μg.h.L-1;10mg/10mg/片剂量组,Cmax为(6.8±1.2)μg.L-1,AUC0-120为(327±110)μg.h.L-1;5mg/20mg/片剂量组,Cmax为(3.1±0.5)μg.L-1,AUC0-120为(130±16)μg.h.L-1。阿托伐他汀5mg/10mg/片剂量组中的药动学参数分别为Cmax为(11.3±6.7)μg.L-1,AUC0-120为(133.8±93.3)μg.h.L-1;10mg/10mg/片剂量组,Cmax为(16.7±12.1)μg.L-1,AUC0-120为(107.7±60.4)μg.h.L-1;5mg/20mg/片剂量组,Cmax为(15.0±9.4)μg.L-1,AUC0-120为(147.3±59.3)μg.h.L-1。结论:复方苯磺酸氨氯地平/阿托伐他汀钙片中氨氯地平的Cmax,AUC0-120,AUC0-∞与剂量呈线性;阿托伐他汀的Cmax,AUC0-120,AUC0-∞与剂量呈非线性药动学特征。

痰热清注射液有效成分在大鼠肺组织靶向性研究

目的:通过清热化痰法的代表方痰热清注射液有效成分在大鼠肺组织的靶向性研究,初步探讨清热化痰法治疗慢性阻塞性肺疾病的机制。方法:运用高效液相色谱二级质谱联用方法对痰热清注射液制剂中的有效成分及其在大鼠血浆与组织中能够检测的有效成分进行定性定量分析和比较。结果:痰热清注射液制剂中能够检测出黄芩、金银花、连翘、熊胆粉4味配伍中药的有效成分,其中黄芩苷、绿原酸、咖啡酸、汉黄芩素、野黄芩苷能够进行定量检测。在大鼠血浆及肺组织中,能够同时定性定量分析痰热清注射液中首入肺经的黄芩、金银花两味中药的有效成分,其主要有效成分黄芩苷、绿原酸在肺组织的峰浓度明显高于其他组织。结论:大鼠血浆及肺组织中能够检测到清热化痰方剂痰热清注射液中的有效成分;痰热清注射液对肺组织具有一定的靶向性和中药归经作用;可通过方剂有效物质基础及组织靶向性的研究方式探讨清热化痰法治疗慢性阻塞性肺疾病的机制。

基于层次分析-熵权法优化刺五加多组分超声提取工艺

基于超高效液相色谱-质谱(ultra-high performance liquid chromatography-mass spectrometry,UPLC-MS/MS)定量方法以及多指标综合评价方法,对刺五加多组分超声提取工艺进行优化。开发UPLC-MS/MS定量方法,同时测定刺五加多组分(绿原酸、紫丁香苷、刺五加苷E、异嗪皮啶、咖啡酸、芝麻素)含量;再由层次分析法(analytic hierarchy process,AHP)及熵权法(entropy weight method,EWM)组建多指标综合评价方法—层次分析-熵权法(AHP-EWM);最终由单因素结合基于Box-Behnken设计(Box-Behnken design,BBD)的响应面法(response surface methodology,RSM)优化刺五加多组分超声提取工艺。结果表明,RSM优化所得刺五加多组分超声提取最佳工艺:超声功率780 W,超声时间17.5 min,乙醇体积分数57%,料液比1:40 g:mL,原料粒径80目。由此,刺五加根茎中绿原酸、紫丁香苷、刺五加苷E、异嗪皮啶、芝麻素的含量分别为2235.841±12.17、517.959±6.09、861.247±5.30、66.657±1.22、45.745±0.77、99.355±0.69μg/g,且基于AHP-EWM所得的综合得分为95.45±0.39,与预测理论值接近。刺五加定量分析方法与高效提取工艺的有效开发,为其资源利用以及药效基础研究奠定基础。

化妆品中克罗米通的测定与验证

为建立化妆品中克罗米通的液相色谱检测方法和液质联用仪验证方法,将样品用甲醇超声提取10 min后,经滤膜过滤后液相色谱进样,采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm×5μm)分离,流动相为乙腈-质量分数1%三乙胺的磷酸二氢钾溶液(0.05 mol/L),用磷酸调体系pH至4.0(体积比40/60),二极管检测器分离,在波长242 nm下有最大吸收,标准曲线定量。结果发现,线性范围为10~500μg/mL,r>0.9999,检出限为20μg/g,空白膏霜、水剂及凝胶类化妆品在54.93、183.09及915.46μg等3个加标水平下的回收率为98.5%~109.5%,相对标准偏差为0.5%~3.1%。该方法操作简单,重现性好,适用于化妆品中克罗米通的测定。

LC-MS/MS测定精油和面膜中禁用白芷组分欧前胡素和异欧前胡素

建立一种三重四极杆液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),对精油和面膜中禁用白芷组分欧前胡素和异欧前胡素进行定性定量分析。试验前处理采用QuEChERS方法,制备样以乙腈作为萃取溶剂,以QuEChERS法进行提取,再经LC-MS/MS分析,以基质空白配标,外标法定量。结果显示欧前胡素和异欧前胡素在0.5~5.0 ng/mL范围内具有较好的线性关系,相关系数均大于0.99。加标水平在10、20、50 ng/g时,欧前胡素和异欧前胡素的回收率范围在84.3%~98.3%,目标物相对标准偏差<8.0%。此方法适用于精油和面膜化妆品中禁用白芷组分欧前胡素和异欧前胡素的分析检测。

何首乌活性成分在肝L-02细胞中吸收及代谢产物的LC-MS/MS定性分析

目的研究何首乌主要活性成分在肝L-02细胞中的吸收和代谢。方法将何首乌主要活性成分二苯乙烯苷(TSG)、大黄素(EN)作用于正常人肝L-02细胞,给药0、2、4、6、8、12、24、36、48 h后,分别取上层培养液及细胞裂解液,利用HPLC探究二者的吸收、蓄积及代谢规律,并用LC-MS法进行代谢产物的定性分析。结果 TSG在肝L-02细胞中无明显蓄积,HPLC检测出TSG和一个代谢产物吸收峰,且在8 h后浓度随给药时间延长呈递增趋势,经LC-MS/MS鉴定为二苯乙烯苷葡萄糖醛酸结合物;EN在肝L-02细胞中有部分蓄积,细胞呈黄色,检测出4个EN的代谢产物吸收峰,浓度随时间的延长而增加,经LCMS/MS鉴定为大黄素葡萄糖醛酸的3个同分异构体及大黄素硫酸结合物。结论大黄素较二苯乙烯苷更易被L-02细胞吸收,在L-02细胞中二者的Ⅰ相代谢产物均未被检测到,仅检测到二者的Ⅱ相代谢产物。

LC-MS/MS法同时测定复方鹿角颗粒中13种成分的含量

目的：建立液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS法）同时测定复方鹿角颗粒中13种主要成分（补骨脂素、异补骨脂素、马钱苷、淫羊藿苷、柚皮苷、橙皮苷、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ、朝藿定A、朝藿定B、红景天苷、特女贞苷、淫羊藿次苷Ⅱ）的含量。方法：采用Phenomenex Luna-C18色谱柱（2.0 mm×100 mm,5μm）,流动相A为0.1%甲酸水溶液,流动相B为90%乙腈水溶液,洗针液为50%甲醇水溶液,梯度洗脱（0~6 min,10%B→40%B;6~9 min,40%B→80%B;9~10 min,80%B→90%B;10~12 min,90%B;12~12.01 min,90%B→10%B;12.01~13 min,10%B）,流速0.8 m L·min-1,柱温40℃;采用电喷雾离子源（ESI）,多反应监测（MRM）,结合正负离子扫描切换,其中补骨脂素、异补骨脂素、马钱苷、淫羊藿苷、柚皮苷、橙皮苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ采用正离子模式检测,红景天苷、特女贞苷、淫羊藿次苷Ⅱ采用负离子模式检测。结果：复方鹿角颗粒中13种有效成分在13 min内达到基线分离,补骨脂素、异补骨脂素、马钱苷、淫羊藿苷、柚皮苷、橙皮苷、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ、朝藿定A、朝藿定B、红景天苷、特女贞苷、淫羊藿次苷Ⅱ的线性范围分别为5.00~250、10.0~300、10.0~300、50.0~500、1.00~150、50.0~500、50.0~500、1.00~150、10.0~300、5.00~250、10.0~300、20.0~400、1.00~150 ng·m L-1,相应的线性范围内呈良好的线性关系（r〉0.99）;检出限分别为1.20、2.25、1.15、11.5、0.250、12.5、11.7、0.250、1.00、1.25、2.15、4.50、0.200 ng·m L-1;日内和日间精密度RSD均小于5%,平均加样回收率均在86.6%~105.6%范围内,RSD均小于4.8%。11批样品中上述13种成分的含量依次为1.75~2.02、2.13~2.59、3.78~4.19、14.0~15.5、0.756~0.800、13.6~15.2、13.3~14.6、0.376~0.412、3.73~4.09、1.83~2.04、3.85~4.35、6.73~7.65、0.550~0.629 mg·g-1。结论：经方法学验证,本方法简单、快速、灵敏,重复性好,可以用于复方鹿角颗粒中13个成分的含量测定。通过对11个批次的复方鹿角颗粒进行分析测定,结果显示各个批次含量无明显差别,可为该复方颗粒的质量控制提供依据。

从暴发腹泻的贻贝中同时检出腹泻性贝类毒素和扇贝毒素

目的:2011年5月25日-5月27日,我市苍南县暴发了57例因食用贻贝引起的腹泻性贝类毒素(DSP)中毒事件,采集了19份样品进行检测。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱方法对贻贝中5种脂溶性贝类毒素进行检测,根据欧盟贝类毒素的限量值进行评价。结果:15份样品检出大田软海绵酸(OA)、鳍藻毒素-1(DTX-1)和7-epi-pectenotoxin-2 seco acid(7-epi-PTX-2sa),16份检出pectenotoxin-2seco acid(PTX-2sa),7份检出pectenotoxin-2(PTX-2)。其中4份样品中游离OA和DTX-1含量超出欧盟限量值3倍多,它们的总OA约超出9倍。其余均低于欧盟限量值。首次在我国贝类中检出了PTX-2sa和7-epi-PTX-2sa。结论:鉴于部分贻贝样品DSP超标,今后应加强贝类上市前的监测工作。

液-质联用法测定人血浆中卢非酰胺的浓度及其在药动学研究中的应用

目的:建立高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)测定人血浆中卢非酰胺浓度的方法。方法:40名健康受试者随机分成4组,分别单剂量口服给药卢非酰胺片200,400,800,1 200 mg。血浆样品经乙腈沉淀蛋白提取分离,色谱柱为Ultimate?AQ-C18(100 mm×2.1 mm,5μm,Welch Material Inc.);流动相为乙腈-5 mmol·L^(-1)乙酸胺水溶液(含0.1%甲酸)=32∶68;流速为0.30 mL·min^(-1);内标为埃索美拉唑。采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。结果:卢非酰胺的血浆浓度在40~5 000 ng·mL^(-1)范围内线性良好,定量下限为40 ng·mL^(-1),日内精密度(RSD)均≤8.20%,日间精密度(RSD)均≤6.35%,提取回收率为91.94%~96.48%。卢非酰胺呈非线性药动学特征,单剂量空腹口服给药卢非酰胺片200,400,800,1 200 mg后,Cmax分别为1 803.50±528.06,2 485.00±562.71,3 710.00±965.50和4 158.00±1 181.91μg·L^(-1)。AUC0–t分别为34 522.13±9 525.00,56 138.53±18 021.98,88 848.53±23 348.14和107 058.03±34 420.08μg·h·L^(-1)。结论:该法操作简单,灵敏,准确,重复性好,适用于卢非酰胺片临床药动学研究。从药动学研究可知,卢非酰胺在中国健康受试者中呈非线性药动学特征。