高效液相色谱-蒸发光散射法测定油莎豆块茎发育过程中的水溶性糖

基于高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)建立油莎豆块茎发育过程中水溶性糖(果糖、葡萄糖、蔗糖)含量的检测方法。以乙腈∶水(体积比75∶25)为流动相,流速为1.0 mL/min,并将蒸发光散射检测器条件优化为氮气压力206.8 kPa、漂移管温度65℃。结果表明:3种水溶性糖在0.10~20.0 mg/mL质量浓度范围内线性关系良好(r>0.999),检出限为0.04~0.10 g/100 g,回收率为96.0%~100.2%,相对标准偏差(RSD)为1.00%~7.32%(n=6)。在油莎豆块茎发育过程中,其果糖含量为0.376~0.692 g/100 g,葡萄糖含量为0.366~0.787 g/100 g,两者呈显著正相关(P<0.01);蔗糖含量为5.49~24.2 g/100 g,呈先降低后总体升高的趋势。所建方法灵敏度高、重现性好,适用于油莎豆块茎发育过程中水溶性糖的测定。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定化妆品中二硬脂基二甲基氯化铵

建立了测定多种化妆品中二硬脂基二甲基氯化铵(DSDMAC)含量的高效液相色谱-蒸发光散射分析方法。样品经乙腈水溶液(体积比2∶1)超声分散后,加入氯化钠进行振荡提取,取上层有机相分析。采用AcclaimTM Surfactant柱(150 mm×4.6 mm,5µm)分离,以乙腈和100 mmol/L乙酸铵水溶液(pH 5.5)为流动相进行梯度洗脱,外标法定量。结果表明,该类化合物可在18 min内实现有效分离,在10~200 mg/L质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数(r^(2))为0.9994,检出限(LOD,S/N=3)和定量下限(LOQ,S/N=10)分别为3.27 mg/kg和9.96 mg/kg。在100、500、1000 mg/kg加标水平下,卸妆油等10种典型空白样品的平均回收率为82.5%~101%,相对标准偏差(RSD,n=6)均不大于6.3%。采用该方法对133个市售样品进行检测,1个乳液样品中DSDMAC的测定值超出法规要求。该方法精密度好,准确度高,适用于各种化妆品中DSDMAC的测定,可为化妆品的质量安全监测提供技术支持。

快速滤过型净化结合液相色谱-蒸发光散射法检测茶叶中5种糖类成分

采用聚酰胺粉作为净化吸附剂材料,基于快速滤过型净化(multi-plug filtration cleanup,m-PFC)前处理方法,开发适用于茶叶样品的专用前处理净化小柱,结合高效液相色谱-蒸发光散射法建立同时检测茶叶中5种糖类成分的分析方法。茶叶样品加水振荡提取,加入二氯甲烷反萃杂质,取上层溶液经m-PFC柱净化,高效液相色谱法测定,外标法定量。结果表明:鼠李糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖5种成分在各自相应线性范围内,峰面积对数与其质量浓度对数线性关系良好,相关系数大于0.99,检出限为0.04~0.1 g/100 g,定量限为0.10~0.20 g/100 g。低、中、高三水平的平均添加回收率为91.0%~103%,相对标准偏差为1.0%~4.6%。本方法操作简便,净化效果好,适合茶叶中5种糖类成分的定量检测。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定气血双补口服液中黄芪甲苷的含量

目的气血双补口服液现行质量标准仅采用薄层色谱法对黄芪进行定性鉴别,而无相应的定量检测项目。文中建立适用于气血双补口服液中黄芪甲苷的高效液相色谱测定方法,为有效控制该产品质量,制订该制剂新的质量标准提供参考依据。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射法(High-performance liquid chromatography evaporative light-scattering detec-tor,ELSD-HPLC),色谱柱:汉邦ODS-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(79∶21);体积流量:0.8 ml/min;柱温:室温;漂移管温度:70℃,载气流速:2.24 L/min。结果黄芪甲苷在2.51～12.55μg范围内线性关系良好,黄芪甲苷平均回收率为99.01%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.34%。结论该方法简便易行,方法学验证符合要求,可用于气血双补口服液的质量控制。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定人肠黏膜通透性的方法学及其临床应用研究

目的进行高效液相色谱-蒸发光散射法测定人肠黏膜通透性的方法学研究,同时应用此方法研究重度慢性乙型病毒性肝炎患者肠道屏障功能的变化并探讨其治疗方法。方法(1)采用高效液相色谱-蒸发光散射法检测30例健康人(正常组)和90例重度慢性乙型病毒性肝炎患者尿乳果糖、甘露醇排泄率比值(L/M)的变化,同时测定血清二胺氧化酶(DAO)的变化,以此两项指标来反映肠道屏障功能的变化并将两组加以比较。(2)将90例重度慢性乙型病毒性肝炎患者按随机数字表法分为对照组、乳果糖组,谷氨酰胺组3组,每组30例。对照组采用常规治疗;乳果糖组在常规治疗的基础上加用乳果糖10g,3次/d;谷氨酰胺组在常规治疗的基础上加用谷氨酰胺颗粒10g,3次/d。疗程均为2周。于治疗前后分别测定3组患者的肝功能、内毒素(ET)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、DAO、白介素-2(IL-2)、白介素-8(IL-8)、T淋巴细胞亚群、L/M等,并采用协方差分析法加以比较。结果采用高效液相色谱-蒸发光散射法测定L/M的变化,甘露醇和乳果糖能得到很好地分离,乳果糖的线性范围为0.65～13.0μg/L(r=0.9980),甘露醇的线性范围为0.74～14.7μg/L(r=0.9983)。乳果糖和甘露醇日内精密度的相对标准偏差(RSD)分别为1.56%、0.65%(n=6),日间精密度的RSD分别为1.77%、0.99%(n=6)。乳果糖的加样回收率为98.68%～100.4%,平均值为99.51%;甘露醇的加样回收率为99.52%～100.5%,平均值为99.94%。乳果糖在尿中的最低检测浓度为94.2μg/L,甘露醇在尿中的最低检测浓度为29.9μg/L。重度慢性乙型病毒性肝炎患者L/M、DAO水平明显升高(P<0.01)。治疗2周后,与对照组相比,乳果糖组TBIL、ET、TNF-α的变化差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,谷氨酰胺组治疗后ALT、TBIL、TNF-α、ET、IL-2、L/M、DAO的变化差异有统计学意义(P<0.05);乳果糖组与谷氨酰胺组相比,治疗后ALT、TBIL、TNF-α、IL-2、L/M的变化差异有统计学意义(P<0.05)。结论(1)高效液相色谱-蒸发光散射法检测肠道通透性的准确度高,重复性好,方法简便,是目前临床评价肠黏膜通透性变化的实用方法。(2)与健康人相比,重度慢性乙型肝炎患者存在肠黏膜屏障的损伤。(3)在常规治疗的基础上加用乳果糖或谷氨酰胺对减轻重度慢性乙型病毒性肝炎患者的内毒素血症及炎症反应,降低肝功能水平都有一定的作用,但谷氨酰胺的作用更为显著,并且能纠正肠道屏障损伤。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定黄氏响声含片中贝母素甲和贝母素乙含量

目的建立测定黄氏响声含片中贝母素甲和贝母素乙含量的高效液相色谱-蒸发光散射法。方法色谱柱为Phenomenex Gemini-NX C_(18)柱(150 mm×4. 6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(65∶35,V/V,含0. 35%二乙胺),流速为1. 0 mL/min,柱温为30℃,进样量为20μL,蒸发光散射器漂移管温度为70℃,载气流速为1. 4 L/min。结果贝母素甲和贝母素乙质量浓度线性范围分别为25. 32～202. 56μg/mL(r=0. 999 8)和25. 19～201. 48μg/mL(r=0. 999 9),定量限分别为189. 9 ng和251. 9 ng,检测限分别为79. 1 ng和75. 6 ng,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%(n=6),平均回收率分别为100. 22%(RSD=2. 18%,n=6)和98. 96%(RSD=2. 42%,n=6)。结论该方法操作简便、准确,精密度、稳定性、重复性均良好,可用于测定黄氏响声含片中贝母素甲和贝母素乙的含量。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定肤痒颗粒中薯蓣皂苷元的含量

目的:建立一种准确测定肤痒颗粒中薯蓣皂苷元含量的方法。方法:以白英中薯蓣皂苷元为检测指标,采用高效液相色谱-蒸发光散射法测定肤痒颗粒中薯蓣皂苷元的含量。色谱柱为Eclipse XDB-C 18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(95∶5),流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,进样量为20μL;采用Alltech 3300 ELSD蒸发光散射检测器。肤痒颗粒供试品溶液的制备采用酸水解提取,水浴回流3 h,用石油醚(60~90℃)萃取4次,回收石油醚至干,用甲醇溶解得到供试品溶液进行测定。结果:薯蓣皂苷元在20.82~104.10μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好。平均回收率为92.97%(n=6),RSD=4.8%。测定14个厂家肤痒颗粒中薯蓣皂苷元含量,发现含量相差较大。结论:本方法准确,专属性强,能客观地反映肤痒颗粒中薯蓣皂苷元的含量。不同厂家肤痒颗粒中薯蓣皂苷元含量参差不齐,应加强质量控制。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定黑归脾丸中黄芪甲苷含量

目的建立黑归脾丸的定量控制方法。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)法测定黑归脾丸中黄芪甲苷的含量,色谱柱为Zorbax SB-C18柱(250mm×4.6mm,4.6μm),流动相为甲醇-水(75∶25),流速0.5mL/min,柱温30℃,蒸发光散射检测器的漂移管温度为90℃,气体流速为1.5L/min。结果黄芪甲苷进样量在0.428～10.7μg内与峰面积线性关系良好,平均回收率为100.80%,RSD=5.38%(n=6)。结论HPLC-ELSD法简便、重现性好,可用于控制黑归脾丸的质量。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定痹痛定胶囊中黄芪甲苷含量

目的：建立HPLC—ELSD测定痹痛定胶囊中黄芪甲苷的含量。方法：色谱柱为Alltima C18（250mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇-水（80：20，v／v）；检测器参数：漂移管温度为40℃，气流压力为3．3bar。结果：黄芪甲苷在0．8688～5．792μg范围内呈良好的线性关系（r为0．9996），平均回收率为98．56％（RSD为1．33％）。结论：该法简便、准确、灵敏。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定果维康Vc含片中果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖的含量

目的：建立果维康Vc含片中果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖的含量测定方法。方法：色谱柱：Shodex AsahipakNH2P-50 4E,流动相：乙腈＋水（82＋18）,流速：1.0 ml/min,检测器：Alltech ELSD-2000,漂移管温度：80℃。结果：果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖在1.0～6.0μg范围内呈线性（r〉0.9982）,回收率分别为：98.91%、98.03%、99.12%、98.17%、98.33%。结论：方法专属性强,简单可靠,可用于检测果维康Vc含片中五种糖的含量。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定黄芪中单糖和双糖的含量

目的采用高效液相色谱-蒸发光散射法建立黄芪中单糖和双糖含量的测定方法。方法色谱柱为Waters X Bridge^TM氨基柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-水（70∶30）,流速为1.0mL/min,柱温为30℃。蒸发光散射检测器参数：雾化器温度为50℃,漂移管温度为90℃,气体流量为1.60L/min,增益值为1.0。结果果糖、蔗糖和麦芽糖分别在0.10-0.90μg（r=0.999 9）、1.00-9.00μg（r=0.999 6）、0.25-2.25μg（r=0.999 4）范围内其对数值与峰面积的对数值呈良好的线性关系;平均回收率分别为97.97%（RSD=1.56%）、97.82%（RSD=1.53%）、97.36%（RSD=1.59%）。结论所建立的高效液相色谱-蒸发光散射法简单、准确、重复性好,可用于黄芪中单糖和双糖的含量测定。

高效液相色谱-蒸发光散射法检测雪胆溶液中雪胆甲素的研究

采用 HPLC －ELS 法，C18柱（4．6 mm ×250 mm），流动相为乙腈－水（40∶60）；流速0．8 mL／min；柱温为室温；检测器为 Alltech 2000蒸发光散射检测器；检测温度100℃；ELSD 载气为高纯氮气；载气压力为0．35 MPa，对雪胆溶液中雪胆甲素含量进行测定。结果表明：在该方法下，雪胆甲素进样量在3．34～16．70μg之间，进样量的自然对数与峰面积积分值的自然对数呈良好的线性关系，其平均回收率为98．81％，RSD 为0．92％（n ＝6）。所建方法简便易行、准确可靠，可用于雪胆溶液中雪胆甲素含量的测定。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定鹅去氧胆酸及杂质熊去氧胆酸含量

目的建立测定鹅去氧胆酸原料药含量的高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)法。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶填充C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-0.10%甲酸溶液(58∶10∶32,V/V/V),流速为1.0 m L/min,等度洗脱,柱温为30℃,380-ELSD检测器,漂移管温度为90℃,N2流速为2.6 L/min。结果鹅去氧胆酸质量浓度在1.0~100.5μg/m L范围内与峰面积线性关系良好,R2=0.9896(n=7);检测限(LOD,S/N=3)、定量限(LOQ,S/N=10)分别为0.45μg/m L,1.52μg/m L;平均回收率为99.22%,RSD为1.29%(n=9);熊去氧胆酸质量浓度在1.0~103.2μg/m L范围内与峰面积线性关系良好,R2=0.9944(n=7);LOD(S/N=3)和LOQ(S/N=10)分别为1.14μg/m L和3.79μg/m L;平均加样回收率为96.72%,RSD为3.97%(n=9)。结论该方法操作方便,重复性好,精密度高,准确性强,可有效控制鹅去氧胆酸原料药的质量。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定补肾斑龙片中黄芪甲苷的含量

目的建立补肾斑龙片质量控制方法。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射法测定黄芪甲苷的含量。结果线性范围1.44～4.32μg(r=0.9999),平均加样回收率为99.69%,RSD=1.16%。结论本方法简便快速,灵敏度高,为补肾斑龙片的质量控制提供了有效方法。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定蛇皮中胶原蛋白含量

建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定蛇皮胶原蛋白含量的方法。胶原蛋白经盐酸水解后,采用Thermo Hypersil Gold C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱进行分离,以乙腈(含0.2%甲酸,A相)-0.2%甲酸水溶液(B相)为流动相进行梯度洗脱,洗脱时间15 min,柱温30℃,流速0.4 m L/min。ELSD参数:雾化器温度85℃,蒸发器温度85℃,氮气作载气,蒸发器气流1.2 L/min。进样量10μL。在此条件下,羟脯氨酸的线性范围为10~100 mg/L,R2=0.999 6,检测限为5.56 mg/L,定量限为10 mg/L。蛇皮胶原蛋白的平均回收率为94.53%,RSD为2.15%。蛇皮中胶原蛋白质量分数平均值为40.21%,为蛇皮的主要蛋白质。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定解热消炎片中猪去氧胆酸的含量

目的:建立用高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)法测定解热消炎片中猪去氧胆酸的含量测定方法。方法:采用Kromasil100-5C18色谱柱,以乙腈-0.1%乙酸溶液(50∶50)为流动相,流速为1ml/min。蒸发光散射检测器参数:漂移管温度为40℃,雾化气体为空气,压力3.0bar。结果:猪去氧胆酸在1.987～15.890μg范围内有良好的线性关系,r=0.9996;平均回收率为100.37%,RSD为1.10%(n=6)。结论:HPLC-ELSD法测定猪去氧胆酸的含量适用于解热消炎片生产过程中的质量控制。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定食品中的单糖、双糖、低聚果糖和糖醇

建立了食品中常用的木糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、赤藓糖醇、木糖醇、甘露糖醇、麦芽糖醇等13种单糖、双糖、低聚果糖和糖醇的高效液相色谱同时分离检测的方法。该法采用NH2色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测;13种糖在0.1～5 g/L内均具有良好的线性关系,检出限均在0.1 g/L以下,精密度(RSD)为2.69%～7.21%,回收率为96.1%～105.2%,结果较为理想。将该法用于实际样品检测,结果显示食品标签明示和实际成分相差较大。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定杏贝止咳颗粒中贝母素甲和贝母素乙含量

目的建立测定杏贝止咳颗粒中贝母素甲和贝母素乙含量的高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)法。方法色谱柱为Phenomenex C18柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),流动相为70%乙腈溶液(含0. 08%二乙胺),流速为0. 8 L/min,ELSD漂移管温度为85℃,载气(氮气)流速为2. 1 L/min,雾化器温度为70℃,进样量为10μL。结果贝母素甲和贝母素乙进样量分别在0. 133～2. 655μg和0. 125～2. 547μg范围内与峰面积线性关系良好,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2%,加样回收率分别为99. 22%～100. 66%,96. 08%～99. 86%,RSD分别为0. 48%和1. 08%(n=9)。结论该方法操作简便、准确,精密度、稳定性、重复性好,可用于杏贝止咳颗粒中贝母素甲和贝母素乙的含量测定。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定牛黄中多种有效成分含量及其质量相关性研究

建立高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)同时快速测定牛黄中7种组分的含量的方法。色谱柱为UltimateAQ-C18柱,流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速1mL/min;蒸发光散射检测器参数:漂移管温度100℃,载气(N2)流速1.9L/min。在选定色谱条件下,胆固醇、各种胆汁酸及其钠盐峰形良好且能达到很好地分离。各组分色谱峰峰面积的对数与浓度的对数呈良好线形关系(r>0.9972);标准加入回收率为98.8%～112.7%;7种组分的最低检出限为0.001～0.007g/L。本方法可简便、快速地同时检测不同牛黄样品中7种组分的含量并可表征不同牛黄样品的质量,从而为该名贵药材的质量控制提供更全面的依据和参考。