高效液相-串联质谱技术在新生儿遗传代谢性疾病筛查中的应用价值

目的探讨高效液相-串联质谱技术(HPLC-MS/MS)在新生儿遗传代谢性疾病筛查的应用价值。方法选取我院就诊的301例新生儿,新生儿出生48 h~7 d内采集足底血制作血斑样本,采用HPLC-MS/MS技术对样本中多种氨基酸代谢、有机酸代谢和脂肪酸代谢进行筛查,初筛阳性结果患儿召回复查并做进一步诊断。结果301例筛查样本中初筛可疑阳性21例(0.70%),召回20例进行复查,最终进行基因诊断确诊3种遗传代谢性疾病,其中1例甲基丙二酸血症(MMA),1例精氨酸血症,1例瓜氨酸血症。结论HPLC-MS/MS技术应用于新生儿遗传代谢性疾病筛查,具有高效、准确、快速等优势,本地可能是此病的高发地区,大力推广新生儿遗传代谢性疾病筛查,做到早发现、早诊断、早治疗,对降低本地出生缺陷,提高人口素质有重大意义。

在线固相萃取-二维高效液相-串联质谱法测定水中微囊藻毒素-LR

建立了全自动化在线固相萃取-二维高效液相色谱-串联质谱法测定水中微囊藻毒素-LR的新方法。一维液相系统（上样泵）直接将100μL水样泵送入固相萃取柱富集，六通阀自动切换，另一维液相系统（分析泵）则将微囊藻毒素-LR冲洗至分析柱进行分离检测。试验结果表明，该方法快速、灵敏度高、精密度好。能够满足生活饮用水及其水源水中痕量微囊藻毒素-LR的检测要求，也非常适合突发水质污染时的应急检测。饮用水和水源水中高低两种浓度微囊藻毒素-LR的平均加标回收率分别为99．1％～106．0％和108．4％～108．8％，相对标准偏差为2．4％～7．0％和1．8％～9．4％，微囊藻毒素-LR的检出限为0．0026μg／L远低于国标0．06μg／L的检出限。

采用高效液相-串联质谱测定饲料中的氨基酸

建立了饲料中16种氨基酸含量的测定方法,为饲料中氨基酸的检测提供一种新的分析手段,解决了亮氨酸和异亮氨酸分离度达不到要求的问题。采用微波消解法进行前处理,实现了在不需要衍生的情况下一次进样同时检测16种氨基酸。方法线性:(0.012 5~0.25)mmol/L;定量限均高于0.1%;回收率为79.3%~123.5%;相对标准偏差(RSD)<7.56%。操作简单,线性范围广,结果准确可靠。

超高效液相-串联质谱法测定牛奶中乙酰甲喹及其代谢物

建立了采用PAX固相萃取小柱净化-超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中乙酰甲喹及其代谢物残留的方法。样品经乙酸乙酯提取,分析了分别经PAX及PEP固相萃取柱净化、富集的结果;以乙腈/甲醇-0.1%甲酸水为流动相,经岛津Inertsil ODS-3柱色谱柱分离,采用多反应检测正离子模式进行定性及定量分析。该方法线性良好,2种组分相关系数r均大于0.999。喹噁啉-2-羧酸的方法检出限为0.10μg/kg,方法定量限为0.40μg/kg;在0.42,1.05,2.10μg/kg 3个加标水平下回收率分别为100%,66.2%,50.5%;乙酰甲喹的方法检出限为0.10μg/kg,方法定量限为0.30μg/kg;在0.33,0.83,1.65μg/kg 3个加标水平下回收率分别为117%,52.8%,52.4%,RSD在6.4%~8.9%之间,方法的准确性和重复性良好。

超高效液相-串联质谱法同时测定生鲜乳中45种兽药残留量

建立了采用Oasis PriMEHLB固相萃取柱净化-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定生鲜乳中45种兽药残留含量的方法。该法为样品经质量分数为0．2％甲酸乙腈沉淀蛋白后，通过Oasis PriME HLB固相萃取柱一次性净化除去磷脂及非极性干扰物；用Waters HSS T3色谱柱，流动相为0.1％甲酸水（质量分数10％甲醇）-乙腈（含10％甲醇）梯度洗脱，电喷雾-正离子多反应监测模式（除氯霉素），内标法定量。该方法在质量浓度为1-50ng／mL范围内线性良好，45种兽残相关系数r均大于0．991。经添加1，5，10μg／kg三个质量分数水平的加标样品的测定，回收率在62．1％-118％之间，RSD％在1．5-9．4之间，方法的准确性和重复性良好。

猪肉中13种磺胺类药物多残留检测超高效液相-串联质谱法

建立了用超高效液相-串联质谱仪检测猪肉中种磺胺多残留的方法。采用乙腈提取,正己烷去脂,碱性氧化铝柱净化后,用超高效液相-串联质谱仪进行定性及定量分析。方法最低检出限为0.25μg/kg。方法灵敏、准确,可实现多种磺胺激素同时进行定性及定量分析。

浓缩石榴汁中熊果苷的超高效液相-串联质谱检测方法研究

建立了浓缩石榴汁样品中熊果苷含量测定的固相萃取-超高效液相-串联质谱测定方法。样品用水稀释,HLB和氨基固相萃取柱净化,采用BEHAmide色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm)分离,以乙腈和水梯度洗脱,多反应监测模式测定,定量离子对为m/z271.2>108.0,定性离子对为m/z271.2>160.9,外标法定量。熊果苷的检测限为0.006mg/kg,在0.004～0.2mg/L浓度范围内,熊果苷的线性相关系数为0.9994,熊果苷的加标回收率均在80.6%～108.1%范围内,相对标准偏差均低于8.3%。该方法样品净化效果良好,检测简便、快速、准确,能够满足浓缩石榴汁中熊果苷含量测定和定性确证的要求。

超高效液相-串联质谱法测定茶叶中草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸残留

探讨一种超高效液相-串联质谱法测定茶叶中草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸残留的测定方法,以期为建立茶叶中草铵膦、草甘膦及其代谢产物等农残检测方法的国家标准提供参考。茶样经超纯水、二氯甲烷提取和CAX萃取柱净化后,在硼酸盐缓冲液中与9-芴基甲基三氯甲烷(FMOC-Cl)进行衍生反应,衍生后产物在Waters HSS T3色谱柱上进行超高效液相色谱分离,质谱检测采用电喷雾正离子源、多反应离子监测模式。在0~100 ng/mL范围内,草铵膦、草甘膦和氨甲基膦酸均有良好的线性关系(R2>0.999);方法检出限为0.7μg/kg;在不同茶类(乌龙茶、花茶、白茶)中添加浓度为2.0、4.0、10.0μg/kg时,草甘膦的平均回收率为86.3%~100.2%,草铵膦的平均回收率为85.7%~101.5%,氨甲基膦酸的平均回收率为88.1%~98.4%;相对标准偏差(RSD)在1.1%~5.0%之间。该方法样品前处理简单,分析时间短,回收率和精密度等符合农药多残留检测技术的要求,适用于茶叶中草铵膦、草甘膦和氨甲基膦酸残留的同时检测。

鸡肉中的激素类药物多残留检测超高效液相-串联质谱法研究

建立了用超高效液相-串联质谱仪检测鸡肉中十种激素多残留的方法。依次用乙腈、乙醚提取之后,用超高效液相-串联质谱仪进行定性及定量分析。方法最低检出限为1 ng/mL,最低定量限为10 ng/mL,回收率为61.90%-95.18%,批内相对偏差为2.79%-16.21%,批间相对偏差为2.71%-17.74%。方法灵敏、准确,可实现多种激素同时进行定性及定量分析。

高效液相-串联质谱法同时测定水产品中孔雀石绿和氯霉素残留量

建立了高效液相色谱质谱联用检测水产品肌肉组织中孔雀石绿和氯霉素残留的同步分析方法.样品经乙腈提取后上中性氧化铝柱净化,浓缩、去脂后,液相色谱-串联质谱进行测定,内标法定量.孔雀石绿和隐性孔雀石绿在0.5～30 μg/kg浓度内有良好的线性关系.氯霉素在0.1～30 μg/kg浓度内有良好的线性关系.最低检出限分别为0.5和0.1μg/kg.实际样品检测中,三种药物的加标回收率为80％～110％.本方法的灵敏度较高,且简单、快速,可以满足水产品肌肉组织中孔雀石绿和氯霉素残留同时检测的需要.

超高效液相-串联质谱测定鸡蛋17种兽药残留的方法

建立了Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化-超高效液相色谱-串联质谱法,同时测定鸡蛋中酰胺醇类、喹诺酮类、磺胺类17种兽药残留含量。该法为样品经无水硫酸钠脱去鸡蛋中的水分、 0.2%甲酸乙腈沉淀蛋白后,通过Oasis PRiME HLB固相萃取柱一次性净化除去磷脂及非极性干扰物;用Waters UPLC C18色谱柱,流动相为0.2%甲酸水-乙腈梯度洗脱,电喷雾-正负离子多反应监测模式,内标法定量。该方法在质量浓度为0.5～50ng/ml、 0.1～10ng/ml范围内线性良好, 17种兽残相关系数r均大于0.993。经添加1, 5, 10μg/kg 3个加标样品的测定,回收率61.8%～117%, RSD%1.2～9.7,方法的准确性和重复性良好。

QuEChERS技术结合超高效液相-串联质谱同时测定薄皮甜瓜中7种葫芦素

采用改良的QuEChERS方法,建立同时测定甜瓜中7种葫芦素的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品用乙腈提取,离心后取1 mL上清液经50 mg乙二胺-N-丙基硅烷和50 mg十八烷基硅烷净化,使用XBridge C_(18)色谱柱分离,以乙腈和0.1%甲酸加5 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源电离,正/负离子快速切换多反应监测模式进行分析。在此条件下,7种葫芦素在16 min内得到较好分离,在0.1~1500μg/L质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99;进行3个水平添加实验(n=5),7种葫芦素在20、100μg/kg和500.0μg/kg三个添加水平下的回收率在75.7%~118.3%之间,相对标准偏差在0.5%~13.6%之间,该方法的检出限及定量限分别为0.16~4.33μg/kg和0.27~13.11μg/kg。该方法简便、灵敏度高、分析时间短,精密度和准确性良好,可用于甜瓜中7种葫芦素的同时检测。

固液萃取-超高效液相-串联质谱法同时测定污水处理厂进出水中14种抗生素

目的建立固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱(SPE-UPLC-MS/MS)分析方法同时测定5个污水处理厂进出水中7类14种抗生素的残留量。方法水样经过滤后,添加适量乙二胺四乙酸二钠(100 mg·L^(-1))并用盐酸调节p H值为4.0。采用Cleanert PEP-2固相萃取柱对水样中的目标化合物进行富集、净化。采用Waters ACQUITY UPLC~BEH Phenyl(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,流动相为乙腈和体积分数0.1%的甲酸水溶液。质谱检测采用ESI源正负离子同时扫描,多反应检测模式(MRM)。结果目标分析物在各自的线性范围内峰面积与质量浓度线性关系良好,r为0.998 1~0.999 9。方法检测限为0.04~3.89 ng·L^(-1)。14种抗生素的加标平均回收率为46.68%~98.31%,RSD为2.39%~11.05%(n=9)。使用标准添加法定量以减小基质效应的影响。用此法对5个污水处理厂进出水中14种抗生素进行定量检测,大多数抗生素能检出,表明污水处理厂的处理工艺并没有完全去除抗生素,大多数抗生素又2次排入水体。结论该方法适用于污水中抗生素类药物的检测。

亲水色谱-超高效液相-串联质谱法测定滇橄榄中水解氨基酸研究

目的:建立滇橄榄中的水解氨基酸的亲水色谱-超高效液相-串联质谱法测定方法。方法:采用盐酸水解滇橄榄中的17种氨基酸,DE-52纤维素除氯离子后,利用亲水色谱柱,结合超高效液相色谱-串联质谱仪,采用正离子模式,多反应监测(MRM),外标法定量,测定滇橄榄中17种水解氨基酸。结果:DE-52纤维素能够有效去除水解溶液中的氯离子,亲水色谱柱对于亮氨酸和异亮氨酸等具有较好的分离效果,在0.0003~2.0μg·mL^-1质量浓度范围内,17种氨基酸的线性关系较好,检出限为0.015~13.0 mg·kg^-1,回收率为73.8%~98.8%,RSD为3.25%~7.79%。结论:该方法重复性好、灵敏度高,适合滇橄榄中17种水解氨基酸的测定。

超高效液相-串联质谱法同时测定蜂蜜中15种喹诺酮类药物残留

建立了蜂蜜样品中15种喹诺酮类兽药残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。蜂蜜样品用磷酸盐缓冲溶液溶解提取后,用Oasis HLB固相萃取柱净化,超高效液相-电喷雾串联四级杆质谱检测,外标法定量。测定时用Acquity UPLC BEHC18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,体积分数0.1%甲酸溶液-乙腈系统梯度洗脱,质谱测定采用多重反应监测(MRM)模式。15种喹诺酮类兽药的检出限均低于或等于1.0 ng/mL,回收率均在78.6%～112.9%范围内,相对标准偏差均在10%范围内。该方法各项指标均能满足国内外各项法规的要求,可用于蜂蜜样品中喹诺酮类药物残留的定量和定性检测。

超高效液相-串联质谱法同时测定动物尿液中11种违禁兽药残留分析方法研究

目的建立采用OasisMCX固相萃取柱净化超高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物尿液中β-激动剂类、酰胺醇类、抗病毒类11种违禁药物残留含量的方法.方法样品经盐酸甲醇提取,OasisMCX固相萃取柱净化;流动相为0.2%甲酸水-乙腈梯度洗脱,电喷雾正负离子多反应监测模式,内标法定量.结果该方法在质量浓度为0.5~50ng/ml范围内线性良好,11种违禁药物残留相关系数r均大于0.99.经添加1,5,10μg/kg三个加标样品的测定,回收率在75.1%~106.5%之间,RSD小于12.5%.结论方法适合检测动物尿液中11种违禁药物残留.

超高效液相-串联质谱法测定生鲜乳中26种药物残留量

目的 建立生鲜乳中磺胺类、氟喹诺酮类、酰胺醇类、β-激动剂、四环素类药物超高效液相色谱-串联质谱检测方法.方法 样品经0.2%甲酸乙腈沉淀蛋白后,通过Oasis PRiME HLB固相萃取柱提取净化,用C18色谱柱,流动相梯度洗脱,正、负离子多反应监测模式检测.结果 线性良好,R>0.99,经三个加标浓度样品测定,回收率在50~130%之间,RSD<20%,该方法检测速度快、准确性和重复性良好.

超高效液相-串联质谱法测定糕点中的三氯蔗糖

建立了检测糕点中三氯蔗糖的超高效液相-串联质谱(UPLC-MS/MS)测方法。样品经亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液去除糕点中蛋白、油脂等杂质后,用甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用Aglient Eclipse Plus C18(3.0×100mm)分离后,用电喷雾负离子(ESI-)模式离子化,选择多反应检测(MRM)方式监测,串联质谱测定,外标法定量。实验结果表明:三氯蔗糖在0.1-3.0ng/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数为r=0.998,三氯蔗糖的方法检出限为0.1μg/kg,回收率为93.8%-97.6%,相对标准偏差(RSD)为1.38%。本方法快速简便,操作稳定,可适用于糕点三氯蔗糖的质量控制检测。

超高效液相-串联质谱法同时检测血液和尿液中15种降血糖药

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定血液和尿液中15种降糖药物(二甲双胍、维达列汀、苯乙双胍、罗格列酮、西他列汀、吡格列酮、甲苯磺丁脲、妥拉磺脲、格列吡嗪、格列齐特、格列本脲、格列美脲、那格列奈、格列喹酮、瑞格列奈)的分析方法。方法分别用乙腈对血液和尿液样品沉淀蛋白过膜后,采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪测定。色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(2.1 mm×100 mm×3.5μm),有机相为0.1%甲酸甲醇溶液,水相为5 mmol/L乙酸铵和甲酸水溶液,进行梯度洗脱;流速为0.3 mL/min,采用电喷雾正离子模式,选择反应监测方式(SRM)检测。结果15种药物在血液和尿液中在低浓度(0.5~10 ng/mL)至高浓度(200~1000 ng/mL)范围内线性关系良好,R^(2)均大于0.998。二甲双胍提取回收率为28.1%~42.9%,其余14种降糖药物提取回收率在60.8%~119.0%之间;二甲双胍在尿液中检出限为5 ng/mL,其余14种药物在血液和尿液中的检出限均低于2 ng/mL。15种药物在血液和尿液三种添加浓度中日内和日间精密度相对标准偏差RSD均不高于8.9%(n=6)。结论该方法检测灵敏度高、速度快、专属性高、重复性好,可用于生物样品血液和尿液中15种降血糖药物的同时检测。

液相色谱-串联质谱法测定土壤、沉积物和水中3种新型除草剂残留

除草剂在杂草和有害植物防控上发挥着重要的作用,但其有效利用率低,大量除草剂进入环境中,对生态环境和人类健康构成了潜在威胁,因此建立环境样品中除草剂的残留分析方法尤为重要。该文采用电喷雾正离子源模式,建立了液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定土壤、沉积物和水中异噁唑草酮、吡唑草胺和苯嘧磺草胺残留量的方法。土壤和沉积物样品经乙腈振荡提取、盐析后经C18固相萃取小柱净化,水样过滤后经C_(18)固相萃取小柱净化;再用LC-MS/MS测定样品中异噁唑草酮、吡唑草胺和苯嘧磺草胺的残留量。实验优化了仪器检测和前处理条件,考察了方法的线性关系、基质效应、检出限和定量限,并选取4种土壤、2种沉积物和水样进行了方法验证。在0.0005~0.02 mg/L范围内,异噁唑草酮、吡唑草胺、苯嘧磺草胺的线性关系均良好,r≥0.9961。3种除草剂在土壤、沉积物和水中的基质效应为-10.1%~16.5%。异噁唑草酮、吡唑草胺和苯嘧磺草胺的检出限分别为0.05、0.02、0.01μg/kg,定量限分别为0.2、0.05、0.05μg/kg。异噁唑草酮、吡唑草胺和苯嘧磺草胺在土壤、沉积物和水样中3个水平(0.005、0.1、2.0 mg/kg)下的加标回收率分别为77.2%~101.9%、77.9%~105.1%、80.8%~107.1%;相对标准偏差(RSD)分别为1.4%~12.8%、1.2%~7.7%、1.5%~11.5%。结果表明:本方法操作简单,方法稳定,定量准确,实用性强,可用于土壤、沉积物和水中异噁唑草酮、吡唑草胺和苯嘧磺草胺残留量的检测。