高效液相-质谱联用技术在食品添加剂检测中的使用

高效液相色谱-质谱联用技术是二十世纪七十年代逐渐开始应用的一项新型检测技术,这项技术的优点在于分析速度快、精确度和灵敏度高,甚至对比较复杂的微量化合物也可以做到准确的鉴定。而且对于检测的大部分化合物在高效液相上不需要进行衍生物的处理,就可以在质谱仪中进行精确的定性、定量分析,使得此项技术在食品、制药、环境保护等领域中得到广泛认可和使用。本文主要针对食品添加剂的介绍、高效液相-质谱联用技术的原理及对合成色素、防腐剂、甜味剂等食品添加剂的检测使用进行了相关的阐述和说明。

高效液相-质谱联用法对盐酸关附甲素在大鼠尿中代谢物的研究

目的 研究盐酸关附甲素在大鼠尿中的代谢产物。方法 大鼠iv盐酸关附甲素后收集尿 ,用高效液相 质谱联用方法测定。通过与标准化合物的色谱保留时间、分子离子峰、碎片离子峰对照从而鉴定I相代谢物。通过用葡糖醛酸酶和硫酸酯酶酶解鉴定其水解产物 (苷元 )从而确定II相结合物。结果 大鼠尿中发现I相代谢物关附醇胺和关附壬素 ;尿经过葡糖醛酸酶和硫酸酯酶酶解后 ,产生关附甲素和关附壬素。结论 盐酸关附甲素在大鼠体内可以转化为关附壬素、关附醇胺、关附甲素葡糖醛酸和硫酸结合物、关附壬素葡糖醛酸和硫酸结合物。经过生物转化 ,代谢产物的极性增加 。

高效液相-质谱联用测定人血浆中单硝酸异山梨酯的浓度

目的 建立了高效液相 质谱联用法测定人血浆中单硝酸异山梨酯 (IS 5 MN)的浓度。方法 采用WatersC1815 0mm×2 .1mm色谱柱 ,以甲醇 氨水溶液 (0 .0 3mol·L-1) =2 0∶80 (pH =7.8)为流动相 ,流速为 0 .2 5mL·min-1,检测质荷比 (m/z)为190 ,血浆样品用醋酸乙酯直接提取 ,进样量为 2 0 μL。 结果 线性范围为 10～ 6 40 μg·L-1,最低检测浓度 7μg·L-1,日内、日间的RSD皆小于 8%。

高效液相-质谱联用法测定盐酸二甲双胍血药质量浓度

目的：建立测定盐酸二甲双胍血药质量浓度的高效液相-质谱联用方法（LC／MS／MS）。方法：色谱柱：CAPCELL C18柱（150mm×2．0mm，5μm）；流动相：10mmol·L^-1醋酸铵缓冲液-乙腈（50：50）；流速：0．2mL·min^-1；血浆样品用乙腈沉淀蛋白法处理，在三级四极杆串联质谱中经ESI源离子化，以多反应离子监测方式测定盐酸二甲双胍（m／z 130．0→71．0）的质量浓度。结果：盐酸二甲双胍血药质量浓度在10～2000μg·L^-1范围线性良好（r=0．9981），回收率为86．01％～98．28％，绝对回收率为92．72%～96．08％，日内、日间精密度均不大于10％。结论：方法灵敏、准确、快速、特异性强，可用于该药临床药动学特征的研究。

高效液相-质谱/质谱联用法测定人血清中的盐酸氟桂利嗪

目的：建立高效液相-质谱/质谱分析方法测定人血清中的氟桂利嗪，并用于研究健康受试者静脉滴注盐酸氟桂利嗪注射液后的药动学。方法：血清经1mol·L^-1氢氧化钠溶液碱化后，正己烷-异丙醇（95：5）提取，采用Shimadzu ODS柱（150mm×4.6mm，5μm）为分析柱，甲醇-醋酸铵溶液（10mmol·L^-1，冰醋酸调pH3.5）（75：25）为流动相，流速1.0mL·min^-1，柱后分流，0.2mL·min^-1进入质谱，柱温35℃。质谱检测方式为多反应离子监测，选择监测的离子为m/z 203.4→m/z 183.1（氟桂利嗪）和m/z 285.4→m/z 193.2（地西泮）。结果：氟桂利嗪的线性范围为0.5～500μg·L^-1（r=0.9998），血清中氟桂利嗪的检测限达0.1μg·L^-1（S/N〉3），回收率大于85％。结论：本法简便，准确，灵敏度高，适用于氟桂利嗪的药动学研究。

联合液相-质谱分析和网络药理学方法探讨清热活血方防治动脉粥样硬化的作用机制

目的联合液相-质谱(liquid-mass spectrometry,LC-MS)分析和网络药理学方法探究由清热活血方防治动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的潜在靶点。方法首先,采用LC-MS定性分析对清热活血方化学成分进行鉴定,并将得到的成分输入Swiss Target Prediction数据库进行目标靶点预测,并采用Cytoscape 3.7.1构建清热活血方活性成分-核心靶点网络;其次,从疾病数据库中收集AS相关靶点;将AS相关靶点与清热活血方靶点取交集,得到清热活血方抗AS靶点,并制作靶标蛋白相互作用网,然后进行GO(Gene Ontology)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析。之后,随机将50只雄性ApoE^(-/-)小鼠分为空白组、模型组、清热活血方低、中、高剂量组,并通过高脂饮食的方式建立ApoE^(-/-)小鼠AS模型,清热活血方组给予低、中、高剂量药物干预,16周末取主动脉组织,对筛选出的通路进行基因和蛋白水平的验证。最后,将LC-MS定量分析筛选出含量最高的两个成分,与筛选出的通路基因进行分子对接,将靶基因进行二次筛选。结果LC-MS分析清热活血方共筛选出中68个活性成分,对应靶标223个;通过检索疾病数据库,去除重复后共得到与AS相关疾病靶点3291个;将清热活血方对应靶标与AS靶点取交集得到136个核心基因。GO富集分析结果显示包含炎症反应的调控、膜微域和配体-激活转录因子活性等的参与;KEGG通路富集分析结果显示涉及PI3K/Akt等47条清热活血方抗AS信号通路。WB和RT-qPCR结果提示,清热活血方可以下调p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt水平,且可下调PI3K/Akt通路的13个基因表达水平。LC-MS定量分析得出黄芩苷和丹酚酸B是含量最多的两个成分,与PI3K/Akt通路上的13个基因进行分子对接,结果提示RXRA基因与黄芩苷和丹酚酸B自由结合能最低。结论清热活血方可能通过介导RXRA基因调控PI3K/Akt信号通路实现抗AS作用,本研究为清热活血方干预AS提供新思路和新靶点。

高效液相-质谱法研究犬体内香贝注射液的药代动力学

目的以苦木碱丁为检定物,测定杂种犬血浆中苦木碱丁的含量,研究香贝注射液的药代动力学过程。方法两组杂种犬分别经股静脉注射香贝注射液0.8,1.6mL·kg-1,然后采集血样,用高效液相-质谱联用(HPLC-MS)方法测定各时间点血浆中的药物浓度,应用实用药代动力学软件3p97拟合计算药代动力学参数。结果犬股静脉给药后的血药浓度-时间曲线符合二室开放模型,0.8,1.6mL·kg-1两个剂量对应的主要药代动力学参数分别为:分布半衰期(t1/2α)为1.15min和1.24min,消除半衰期(t1/2β)分别为8.69min和9.85min,曲线下面积(AUC)为124.27ng·mL-1·min-1和234.78ng·mL-1·min-1;血浆清除率(CL)为450.64mL·min-1和477.04mL·min-1。结论香贝注射液静脉给药后,在犬体内具有分布快,消除迅速的特点。

高效液相-质谱联用法测定人血浆中盐酸度洛西汀浓度

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定盐酸度洛西汀在人血浆中的浓度,以研究该药物在人体内的药动学,并为临床用药提供参考。方法:以氟西汀为内标,血浆样品采用固相萃取的预处理方法,用phenomenex C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)进行分离,以5mmol·L-1醋酸铵(含1‰甲酸)-乙腈(55∶45)为流动相,柱温40℃,流速1.0mL·min-1。采用质谱电喷雾电离源(ESI)将样品离子化,选择性正离子监测(SIM)准分子离子峰。结果:血浆中度洛西汀在0.78～93.60μg·L-1范围内线性关系良好,r为0.999 1;最低定量质量浓度为0.78μg·L-1;萃取回收率和方法回收率均大于92.05%;日内日间变异系数均小于15.0%。结论:本方法简便迅速,灵敏准确,选择性高,可用于度洛西汀药动学研究,并为临床用药提供部分参考依据。

基于液相-质谱联用技术对保胎灵制剂中阿胶标准提升研究

目的:建立高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定保胎灵制剂中阿胶定性及定量的研究方法,为原料阿胶质量及投料情况提供技术支持。方法:采用胰蛋白酶对保胎灵制剂进行酶解,利用UPLC-MS/MS,在电喷雾离子化(ESI+)模式下,进行多反应监测(MRM),并进行阿胶专属鉴别及阿胶特征多肽含量测定。结果:驴源多肽A_(1),A_(2)在0.050 2~1.225 0μg·ml^(-1),0.052 4~1.310 0μg·ml^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999),29批保胎灵制剂均检出阿胶,但14批低于阿胶特征多肽含量拟定限度。结论:所建立的方法准确可靠,专属性强,可用于保胎灵制剂中阿胶的质量评价。

化学发光免疫法和液相-质谱串联法测定血清地高辛浓度的结果比较

探索化学发光免疫法(CLIA)和液相-质谱串联法(HPLC-MS-MS)测定血清地高辛的准确性。方法:采用CLIA和HPLC-MS-MS测定我院心内科15例病人血清地高辛浓度,通过独立T检验对两种检测方法的进行统计学分析,F-Score来评估两种检测方法与临床诊断的准确性差异。结果:两种方法结果相比较,CLIA测定值明显高于HPLC-MS-MS测定值,通过独立T检验方法显示具有显著性差异,平均血药浓度(ng/mL)( CLIA Vs HPLC-MS-MS: 1.29±0.63 Vs 0.84±0.41,P=0.027;两年龄组相比较,高年龄组的CLIA测定值明显高于HPLC-MS-MS测定值,通过独立T检验方法显示具有统计学差异,平均血药浓度(ng/mL)( CLIA Vs HPLC-MS-MS: 1.45±0.58 Vs 0.896±0.44,P=0.047);较年龄组两种检测方法之间没有统计学差异,平均血药浓度(ng/mL)( CLIA Vs HPLC-MS-MS: 1.15±0.67 Vs 0.788±0.41,P=0.155)。同时通过F-Score分析,CLIA和HPLC-MS-MS两方法的精准率和召回率,F1-Scole(CLIA)=0.727 小于F1-Scole(HPLC-MS-MS)=0.833 。结论:HPLC-MS-MS测定地高辛血药浓度比CLIA更具准确性,同时HPLC-MS-MS在高年龄组人群的检测中更具优势。

高效液相-质谱联用法测定人血浆中艾司西酞普兰浓度

目的建立测定人血浆中艾司西酞普兰浓度的HPLC-MS法。方法以Agilent ZORBOX SB-C18反相柱(50mm×2.1mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸(48∶52,pH 5.5),流速为1mL.min-1,柱温35℃,正离子检测模式。结果标准曲线在0.1～40 ng.mL-1,范围内线性关系良好(r=0.9990),样品平均回收率为90.6%(n=9),RSD为3.87%,重复性试验RSD为3.61%(n=5),精密度试验等均符合生物等效性实验要求。结论本方法灵敏,简单,结果准确可靠,重现性好,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。

高效液相-质谱联用技术在食品添加剂检测中的使用

现如今,食品安全问题备受人们关注,国家对食品安全问题也高度重视。在各种食品安全问题中,食品添加剂的滥用和超范围添加问题比较多见,长期食用这种不合格的食品会对人体的健康产生不利影响,因此加强对食品添加剂的检测就显得非常必要。当下,高效液相-质谱联用技术在食品添加剂检测中应用较为普遍。

利用体外血脑屏障模型结合高压液相-质谱技术筛选传统中药——朝鲜淫羊藿有效成分(英文)

血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)是位于中枢神经系统(central nervous system,CNS)和中枢系统环境间的一层生理保护屏障.凡是作用于CNS的药物,必须先通过BBB.为了寻找能够进入CNS的药物,通过细胞培养时间优化和跨膜电阻测定等,建立了ECV304/C6共培养通过BBB药物筛选模型.并将该模型应用于从传统中药淫羊藿的提取物中,筛选可能作用于CNS的活性成分,结合高压液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS),对筛选出的化合物进行鉴定分析.研究结果表明,淫羊藿提取物中至少有13种成分能够穿越BBB模型,其中2种成分被确认为淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ,为CNS药物开发的早期快速筛选提供了实验依据.

基于超高效液相-质谱联用技术的淋巴瘤患者血浆代谢组学分析

目的:筛选淋巴瘤患者血浆特异性生物标志物。方法:运用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(UPLC-Q Exactive)技术对12例淋巴瘤患者及12例正常人血浆样品进行代谢组学分析,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法对数据进行模式识别,分析两组的代谢差异,并进一步筛选差异代谢物。结果:OPLS-DA模型结果显示,淋巴瘤患者与正常人血浆代谢谱有明显差异,共筛选出8种差异代谢物。与正常人相比,淋巴瘤患者血浆中天冬氨酸、4-吡哆酸含量显著升高(P<0.05),L-α-甘油磷脂酰胆碱、亚油酸、癸酰基肉毒碱、苯丙氨酰苯丙氨酸、牛磺酸及苏糖酸含量显著降低(P<0.05)。结论:应用代谢组学方法筛选到的8种差异代谢物有望成为淋巴瘤的潜在生物标志物。

基于超高效液相-质谱联用技术的胃癌患者血浆代谢组学研究

目的:采用超高效液相色谱-质谱联用技术,考察胃癌患者与健康志愿者血浆代谢谱的差异,并筛查胃癌的生物标志物,为胃癌发病机制的探究和胃癌的初步诊断提供依据。方法:运用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术对30例胃癌患者及30名健康志愿者的血浆样本进行代谢组学分析,采用正交偏最小二乘判别分析法对数据进行模式识别,分析胃癌患者与健康志愿者间的代谢谱差异,并筛选出胃癌患者的差异代谢物。结果:胃癌患者血浆中脯氨酸、苯丙氨酸等8种代谢物浓度上升,亮氨酸、赖氨酸等5种代谢物浓度下降;而精氨酸和脯氨酸代谢、苯丙氨酸代谢等代谢通路均发生明显重编程,提示胃癌患者体内形成了新的代谢调控网络。结论:代谢通路的显著变化可能与胃癌的发病机制有关,筛选出的差异代谢物有望作为胃癌患者的潜在生物标志物。

高效液相-质谱联用仪检测各类食品中成分方法探讨

文章通过使用型号为HP100的高效液相色谱-质谱的检测仪器对于食物中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠进行检测,得出结论:对食物中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠进行检测的过程中,使用高效液相色谱-质谱联用仪的手段进行检测,能够取得较好的检测效果。

高效液相-质谱联用技术在食品添加剂检测中的应用及研究进展

近年来,液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)技术由于兼具液相色谱的高分离能力和质谱的高灵敏度、高专属性特点,正逐渐成为食品安全研究中强有力的分析工具。简要介绍了HPLC-MS的基本特点,并对其在食品添加剂检测中的应用和研究进展进行了综述。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定蔬菜中氯酸盐和高氯酸盐

建立超高效液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中氯酸盐和高氯酸盐。样品以少量水稀释分散后,加入乙腈提取,经PRIME HLB小柱净化,用Waters Torus DEA色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以同位素内标法定量。在各自的线性范围内,氯酸盐、高氯酸盐的质量浓度与氯酸盐、高氯酸盐和相应同位素内标物的色谱峰面积比线性关系良好,相关系数均大于0.999。氯酸盐的检出限为3.0μg/kg,定量限为10μg/kg,高氯酸盐的检出限为1.5μg/kg,定量限为4.5μg/kg,平均回收率为88.9%~97.1%,相对标准偏差为2.9%~7.4%(n=6)。该方法简便、快速,适用于蔬菜中氯酸盐和高氯酸盐的同时快速检测。

改进的QuEChERS结合超高效液相色谱-串联质谱法检测饲料中的环匹阿尼酸

采用改进的QuEChERS前处理方法结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分离检测,建立了饲料中真菌毒素环匹阿尼酸(CPA)的快速分析新方法。详细优化了UPLC-MS/MS分离检测条件和影响CPA回收率的QuEChERS条件,优化后的分析方法如下:1.0 g饲料加入2 mL水和4 mL 0.5%乙酸乙腈溶液进行提取,再加入提取盐包(0.4 g氯化钠和1.6 g无水硫酸镁),离心分层后,取1 mL乙腈提取液,加入150 mg无水硫酸镁和50 mg C_(18)吸附净化,上清液进行UPLC-MS/MS分离检测;采用Waters HSS T3柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm),以含0.5%甲酸的2 mmol/L乙酸铵水溶液和乙腈作为流动相,梯度洗脱,电喷雾正离子模式下以多反应监测(MRM)扫描模式定量。CPA在2~200 ng/mL的范围内具有良好的线性,相关系数良好(r=0.999 5),方法的检出限和定量限分别为0.6和2μg/kg,饲料中CPA在10、100、500μg/kg 3个加标水平下的回收率为70.1%~78.5%,日内RSD为4.1%~5.8%,日间RSD为6.1%~7.2%。将本方法应用于实际饲料样品中CPA的分析,取得了很好的效果。本研究将改进的QuEChERS方法应用于饲料中CPA的提取净化,为饲料中CPA的风险监测、评估和限量标准制定提供了一种有效的检测技术。