离子阱飞行时间串联质谱快速筛查农产品中农药残留

本文使用离子阱飞行时间串联质谱(LCMS-IT-TOF)定性检测大米和菠菜样品中的19种农药。对大米和菠菜的空白和阳性样品分别进行前处理,使用超快速液相(UFLC)和离子阱飞行时间串联质谱(LCMS-IT-TOF)联用对空白和阳性样品分别进行了分析,通过软件谱图对比功能鉴定出了19种农药。并且对其中4种农药进行了3级质谱的分析,使用分子式预测软件对目标离子进行了分子式预测。与1级质谱的预测结果相比可以明显地减少候选分子式数量,提高了分子式预测结果的准确性。

75例肝病患儿干血滤纸片串联质谱结果分析

目的探讨液质联用串联质谱技术在筛查以黄疸为主要表现的肝病患儿中的临床意义。方法选取2010年4月至2011年4月首都医科大学附属北京儿童医院肝病门诊就诊和消化内科住院且临床表现为黄疸、肝大、肝酶增高的儿童75例。收集其干血滤纸片进行液质联用串联质谱检测,并且进行数据分析。结果 75例患儿中有49例患儿的串联质谱分析结果正常;26例患儿出现不同程度的氨基酸谱或酰基肉碱谱的异常,其中包括有确诊遗传代谢性疾病5例和非遗传代谢性疾病15例,6例患儿尚未明确诊断。结论临床上患儿出现不明原因的肝大、黄疸或肝酶增高等,尤其伴有血氨(NH3)或血清乳酸(LAC)升高时,应该考虑遗传代谢性疾病的可能。一些非遗传代谢性疾病患儿也可因肝脏继发损伤出现氨基酸谱或酰基肉碱谱的异常。

基于局部回归的色谱保留时间对齐可逆算法

提出并实现一种基于局部回归的对齐算法,选择鉴定结果最多的一次实验作为参考,实现色谱保留时间的可逆对齐,将n次实验的对齐建模次数从n(n-1)/2次减少为n-1次。该算法还实现不同实验间色谱保留时间的非线性对齐,并且能够克服少量从色谱柱中多次流出肽段的影响。研究结果表明:该方法计算时间复杂度远比现有算法的低,对齐精度也能够满足后续计算的需要。

高通量质谱法用于小鼠器官内源性肽的鉴定

内源性肽以细胞因子、生长激素、激素肽等形式在人体的内分泌、神经、细胞生长和生殖各个领域发挥功能。神经肽是一种内源性肽,与痛觉、睡眠、情绪、学习与记忆等生理活动相关,不但存在于脑部神经细胞,也存在于其他体液和器官内并发挥重要作用。目前对器官内源性肽的研究仍不足,尤其是其中的神经肽。文中应用液质联用串联质谱高通量鉴定胰腺、心脏、肝脏和肾脏中内源性肽的分布以及神经肽的种类。鉴定结果显示,在肝脏中内源性肽和神经肽的数目最多,而胰腺中最少;所鉴定到的内源性肽具有器官特异性,在4个器官中分别呈现不同的动态分布;4个器官中神经肽的LPV(最长肽变异体)数目差异较大,而且基因家族的分布也各不相同,比如胰腺中的神经肽多属于Glucagon家族,心脏中的神经肽分别属于ACBD7、Granins、PEBP等几个家族。鉴定结果将为疾病的机制研究和治疗药物的研发提供参考。

LC-MS/MS法同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度

目的建立可同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的液质联用-质谱串联法(LC-MS/MS)。方法以地西泮为内标,血浆样品经乙酸乙酯萃取后经超高效液相色谱(Acquity UPLC)BEH C18色谱柱(2.1×100 mm,1.7μm)分离,欧前胡素与异欧前胡素在质谱条件为正电喷雾电离(ESI+)(m/z:271.5>204.2),锥孔电压为20 V,碰撞能量为33 V,考察特异性、线性范围、定量下限、基质效应以及方法学回收率、精密度和稳定性。结果欧前胡素与异欧前胡素保留时间分别约1.5 min及2.4 min,欧前胡素浓度在0.1~20 ng/mL范围内线性良好(r 2=0.9982),定量下限0.1 ng/mL(信噪比S/N>10)。异欧前胡素浓度在0.05~10 ng/mL范围内线性良好(r 2=0.9989),定量下限0.05 ng/mL(S/N>10),基质效应为94.89%~110.70%,方法学回收率为94.3%~104.3%。欧前胡素与异欧前胡素的重复性以CV表示,CV分别<4.91%、5.26%,期间CV分别<16.39%、14.87%。冻融条件下二者CV均不大于7.21%,室温下均不大于10.44%。结论建立了同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的LC-MS/MS法,该法灵敏度高、特异性好、稳定性好。

利用HPLC DAD ESI/IT TOF/MSn分析不同品种蓝莓果实的花青素结构

以6种不同品种的蓝莓果实(埃利奥特、爱国者、北蓝、北陆、杜克、蓝丰)为原料,利用甲醇水溶液提取蓝莓中的花青素。用二极管阵列-高效液相色谱-电喷雾离子阱飞行时间串联多级质谱仪(High performance liquid chromatography-electric spray four pole flight time series multipolar mass spectrometer,HPLC-DAD-ESI/IT-TOF/MSn)及紫外可见光谱及多级质谱数据对得到的6种不同品种的蓝莓花青素结构进行鉴定和对比。结果表明,6种蓝莓果实中共鉴定出13种花青素类化合物,苷元分别为锦葵色素、花翠素、矢车菊素、牵牛花色素、芍药素。其中埃利奥特蓝莓检测到11种花青素,爱国者10种,北蓝7种,北陆12种,杜克9种,蓝丰6种。从花青素结构上分析,6种蓝莓均可检测到带糖配基的锦葵色素-3-O-半乳糖、不连接糖苷的花翠素及矢车菊素;不同的蓝莓品种间所含有的花青素种类、个数、结构等均有明显差异。本研究为快速获取蓝莓中花青素的结构信息提供一定的理论支撑。

孕鼠补充牛磺酸对宫内生长受限胎鼠脑组织牛磺酸水平的影响

目的探讨宫内生长受限（IUGR）胎鼠脑组织牛磺酸水平及孕鼠补充牛磺酸对IUGR胎鼠脑组织牛磺酸水平的影响。方法采用全程低蛋白饮食法建立IUGR胎鼠模型，将15只孕鼠随机分为3组：正常对照组、IUGR组、IUGR＋孕鼠补充牛磺酸组（牛磺酸组）。牛磺酸组自怀孕第12天起饮食中添加牛磺酸300mg／（kg·d）直至自然分娩。每窝随机抽取2只胎鼠断头取脑，采用液质联用串联质谱法检测各组胎鼠脑组织牛磺酸水平。结果正常对照组、IUGR组与牛磺酸组胎鼠平均出生体质量分别为（6．619±O．413）g、（4．509±0．454）g、（5．176±0．436）g，组间差异有统计学意义（F=429．818，P〈0．01）。正常对照组、IUGR组与牛磺酸组胎鼠脑组织牛磺酸水平分别为（2．399±0．134）×10μg/g、（1．881±0．166）×10μg／g和（2．170±0．191）×10μg／g，组间差异有统计学意义（F=24．828，P〈0．01）。结论孕鼠补充牛磺酸可增加IUGR胎鼠脑组织内牛磺酸水平。

乳头状甲状腺癌患者血清中特异性标志物的检测与鉴定

目的 探讨并鉴定乳头状甲状腺癌患者血清中肿瘤相关蛋白作为特异性标志物的可能性。方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术检测35例乳头状甲状腺癌、40例甲状腺良性结节和34例健康对照者的血清标本，应用生物信息学方法筛选差异蛋白峰，经高效液相色谱（HPLC）分离出差异蛋白，酶解后进行液质联用串联质谱（LC-MS／MS）分析，用SEQUEST检索程序查询Bioworks数据库蛋白序列进行鉴定。结果筛选出6个最显著的差异蛋白质，质荷比（M／Z）分别位于6651、6452、7653、7932、15106和15848。M／Z位于6651、6452处的蛋白质在乳头状甲状腺癌组表达低于甲状腺良性结节和健康对照组；M／Z位于7653、7932、15106、15848处的蛋白质在乳头状甲状腺癌组表达高于甲状腺良性结节和健康对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。联合6种潜在蛋白质标志物，区别乳头状甲状腺癌和非乳头状甲状腺癌的特异度为88．0％，敏感度为92．5％。M／Z位于6651、6452、7653和15106、7932和15848处的蛋白标志物分别为载脂蛋白C—Ⅰ、载脂蛋白C-Ⅲ、α-珠蛋白、β-珠蛋白。结论鉴定出的载脂蛋白C—Ⅰ、载脂蛋白C-Ⅲ、α-珠蛋白和β-珠蛋白在乳头状甲状腺癌的诊断中具有一定的价值和广泛的应用前景，值得进一步研究和探讨。