微囊藻毒素的液-质谱联用和直接进样检测方法比较

采用高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术和直接进样(DIA)技术对7种微囊藻毒素进行定性、定量分析,比较两种方法在精密度、灵敏度、经济性等方面的优缺点,并用于螺蛳中微囊藻毒素的检测。LC-MS/MS技术选用Waters XSelect HSS T3(2.1mm×150mm,3.5μm),用0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液作流动相,在电喷雾离子源(ESI)正离子多反应离子检测模式(MRM)下扫描,线性范围为0.9965~0.9993,相对标准偏差3.6%~6.1%,检出限和定量限分别小于0.54ng/mL和1.81ng/mL,回收率介于73.9%~83.4%之间。DIA技术选用碎片m/z135.2为特征母核,优化选定DP60eV和CE55eV,经母离子扫描(PreIS)得到各微囊藻毒素的离子峰较为纯净,均以[M+2H]2+为主。两种方法比较结果显示:LC-MS/MS各项参数均优于DIA,而DIA检测速度较快,仅需1min即可完成7种微囊藻毒素的快速测定。应用两种方法对60个随机样品的检测表明,螺蛳中的微囊藻毒素阳性率达到63.3%,主要污染种类为MC-RR和LR。根据研究结果建议当待测样品数量较多时,首先采用DIA进行初次筛选,对于阳性样品利用LC-MS/MS进行二次检测,可有效减少检测时间、色谱柱损耗及溶剂消耗,提高结果的可靠性。本分析策略可用于快速分析水体及动植物中的微囊藻毒素残留,确定监测物种、采样站位和频率、警戒值和防控反应机制等,为相关部门完善和强化水产品监测和管理工作提供科学依据,从而保障食用安全和近岸养殖业的健康发展。

浅谈液相色谱-质谱联用技术在食品安全分析中的应用

本文以当前食品安全研究为重点,探讨了高效液相色谱-质谱联用技术,介绍了当前食品安全研究的现状,同时展开了对当前食品安全监管分析情况的调查研究,对当前食品安全监管研究中液相色谱-质谱联用技术的实际运用情况作出了详细研究,并对液相色谱-质谱联用技术的发展进行了总结。

液液萃取-气相色谱/质谱联用法测定水中4种半挥发性有机物

通过液液萃取-气相色谱/质谱联用法同时测定水中阿特拉津、苯并[a]芘、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯4种半挥发性有机物的分析方法,找到最佳色谱分析条件,在此条件下,水中4种半挥发性有机物的线性关系良好。样品量为1 L时,方法检出限为0.0019~0.0320μg/L。对地下水和地表水进行了加标回收实验,地表水回收率为100.0%~129.0%,地下水回收率为99.5%~129.2%。该方法可用于地下水、地表水等环境水样中阿特拉津、苯并[a]芘、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯4种半挥发性有机物的痕量测定具有良好的精密度和准确度。

高效液相色谱-质谱联用法同时测定盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏的血药浓度

目的建立灵敏、快速的高效液相色谱-质谱联用法同时测定盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏的血药浓度。方法以非那雄胺为内标物,采用C18柱,水(含0.5‰甲酸)-乙腈-甲醇(18∶32∶50)为流动相,1 mL血浆样品经液液萃取后,电喷雾离子化源,选择性正离子反应监测。结果盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏分别在3.9～375.0 ng/mL和0.2～19.2 ng/mL时线性关系良好。盐酸金刚烷胺低、中、高浓度测定的相对回收率分别为106.4%,94.9%和93.1%;日内RSD分别为2.6%,3.2%和4.1%;日间RSD分别为4.3%,5.4%和5.6%;最低定量限为3.9 ng/mL,RSD为3.1%。马来酸氯苯那敏低、中、高浓度测定的相对回收率分别为98.9%,97.9%和101.8%;日内RSD分别为8.5%,8.0%和4.1%;日间RSD分别为6.9%,5.5%和5.6%;最低定量限为0.2 ng/mL,RSD为1.7%。结论所建方法简便、准确、灵敏度高,适合测定盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏的血药浓度,可用于临床药物代谢动力学研究。

高效液相色谱-质谱联用法同时测定人血浆中盐酸非索非那定和盐酸伪麻黄碱的浓度

目的建立高效液相色谱-质谱联用法同时测定人血浆中盐酸非索非那定和盐酸伪麻黄碱的方法。方法以苯乙双胍为内标,采用C18柱,流动相由乙腈及30mmol/mL醋酸铵（含0.1%甲酸和0.01%三氟乙酸）组成,采用梯度洗脱程序,血浆样品经简单的乙腈沉淀蛋白萃取后,电喷雾离子化源,选择性正离子反应监测,测定血浆中盐酸非索非那定和盐酸伪麻黄碱的浓度。结果非索非那定和伪麻黄碱分别在2.26~676.46ng/mL和22.11~736.96ng/mL线性关系良好。非索非那定高、中、低浓度测定的相对回收率分别为109.9%、103.1%和101.5%,日内RSD分别为2.1%、2.5%和9.8%,日间RSD分别为1.3%、5.7%和7.1%,定量下限浓度为2.26ng/mL,RSD为0.7%。伪麻黄碱高、中、低浓度测定的相对回收率分别为89.3%、97.1%和104.1%,日内RSD分别为6.1%、4.9%和6.0%,日间RSD分别为4.8%、5.7%和9.4%,定量下限浓度为23.16ng/mL,RSD为2.7%。结论所建方法简便、快速,重现性好,专属性强,灵敏度高,适合测定非索非那定和伪麻黄碱的血药浓度,可用于盐酸非索非那定和盐酸伪麻黄碱复方制剂的临床药代动力学研究。

超高效液相色谱-串联质谱法测定土壤、蔬菜及水果中苯醚甲环唑和丙环唑残留

建立了超高效液相色谱-串联四极杆液质谱联用(UPLC-MS/MS)检测土壤、番茄、茄子、梨和香蕉中苯醚甲环唑和丙环唑的残留分析方法。样品采用乙酸乙酯提取,弗罗里硅土固相萃取柱净化,超高效液相色谱分离多反应监测模式下测定,外标法定量。结果显示:苯醚甲环唑和丙环唑的线性关系良好。苯醚甲环唑和丙环唑在不同基质中平均回收率分别为79.7%～107.1%和72.8%～104.6%,相对标准偏差分别为0.7%～13.1%和2.7%～18.9%。最低检出质量分数均为0.001mg/kg。

牛奶中四环素类药物残留的确证方法——液质联用法

为了确证牛奶中土霉素、四环素、金霉素的残留,建立了电喷雾高效液相色谱/串联质谱法,采用正离子检测,选择离子方式扫描.牛奶样品经McIlvame-EDTA缓冲溶液提取离心后,上清液过C18小柱净化后甲醇洗脱,然后氮气吹干,甲醇-水(30:70)溶解(以去甲金霉素为内标)后进行分析.结果表明,牛奶中土霉素、四环素和金霉素的检测限(LODs)为0.01 mg/L,定量限(LOQs)为0.025 mg/L.3种药物在0.05～0.5 mg/L范围内均呈良好线性关系,并且3个添加浓度的平均回收率范围为70.0%～87.6%,批内变异系数不大于10%,以最大残留限量浓度添加后所测得回收率的批间变异系数小于15%.本方法特异性强、灵敏度高、准确可靠,可作为牛奶及其他动物组织中四环素类药物残留的确证方法.

HPLC-MS/MS联用技术定量测定人血浆中氢可酮

建立HPLC-MS/MS方法定量测定人血浆中氢可酮浓度。以地西泮为内标,采用甲醇-0.05%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,以Agilent-C18（2.1×50 mm×3.5μm）色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源（ESI）,以正离子多反应监测（MRM）方式进行检测。用于定量分析的离子对分别为m/z300.2→199.1（氢可酮）和m/z285.0→193.0（地西泮,内标）。氢可酮线性范围为0.5~50μg/L,定量下限为0.5μg/L（n=6）,日内、日间精密度的RSD均小于15%,平均回收率大于75%。本方法专属性强、样品处理简便、灵敏度高,适用于氢可酮临床药动学研究。

LC-MS/MS法同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度

目的建立可同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的液质联用-质谱串联法(LC-MS/MS)。方法以地西泮为内标,血浆样品经乙酸乙酯萃取后经超高效液相色谱(Acquity UPLC)BEH C18色谱柱(2.1×100 mm,1.7μm)分离,欧前胡素与异欧前胡素在质谱条件为正电喷雾电离(ESI+)(m/z:271.5>204.2),锥孔电压为20 V,碰撞能量为33 V,考察特异性、线性范围、定量下限、基质效应以及方法学回收率、精密度和稳定性。结果欧前胡素与异欧前胡素保留时间分别约1.5 min及2.4 min,欧前胡素浓度在0.1~20 ng/mL范围内线性良好(r 2=0.9982),定量下限0.1 ng/mL(信噪比S/N>10)。异欧前胡素浓度在0.05~10 ng/mL范围内线性良好(r 2=0.9989),定量下限0.05 ng/mL(S/N>10),基质效应为94.89%~110.70%,方法学回收率为94.3%~104.3%。欧前胡素与异欧前胡素的重复性以CV表示,CV分别<4.91%、5.26%,期间CV分别<16.39%、14.87%。冻融条件下二者CV均不大于7.21%,室温下均不大于10.44%。结论建立了同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的LC-MS/MS法,该法灵敏度高、特异性好、稳定性好。

液液萃取-气相色谱-质谱联用法同时测定曼陀罗中的消旋山莨菪碱、东莨菪碱与(-)-莨菪碱

目的建立一种气相色谱-质谱联用法同时测定消旋山莨菪碱、东莨菪碱与（-）-莨菪碱的方法。方法曼陀罗经2mol／L盐酸超声提取30min后过滤，滤液用浓氨水调节pH≈9后用三氯甲烷提取3次，挥干定容后上机测定。结果消旋山莨菪碱、东茛菪碱与（一）一莨菪碱在0．1～0．5mg／ml质量浓度范围内呈良好的线性关系，相关系数（r^2）为0．9981～0．9995，在0．2～0．4mg／ml两个浓度水平的加标回收率为76．7％～119．0％，RSD为0．8％～7．3％，检出限为0．1～1．0μg／kg。结论本方法简单、快速、可靠，能够满足曼陀罗中消旋山莨菪碱、东莨菪碱与（-）-莨菪碱的检测分析。

海藻糖生产菌株筛选过程中产物鉴定的研究

在海藻糖生产菌的筛选过程中 ,微生物胞内酶转化淀粉生成的产物复杂 ,将产物逐一纯化是非常烦琐的 ,但又必须确证产物中是否含有海藻糖。本文将薄层层析、高效液相电喷雾电离质谱联用及核磁共振等分析手段综合应用于海藻糖生产菌株的筛选 ,在酶反应产物不必被纯化的前提下 ,准确、快捷地鉴定了酶反应产物中的未知糖组分 ,最终证明食尼古丁节杆菌 (Arthrobacternicotinovorus)D 97利用淀粉或麦芽寡糖的酶反应产物中含有海藻糖。该方法在筛选海藻糖及其它功能性葡二糖生产菌株时较为严密。

非索伪麻缓释胶囊在中国健康人体内的药动学

目的建立高效液相色谱-质谱联用法同时测定人血浆中盐酸非索非那定和盐酸伪麻黄碱的方法,研究健康志愿者单剂量和多剂量口服非索伪麻缓释胶囊后非索非那定和伪麻黄碱在人体内的药动学。方法以苯乙双胍为内标,用C18柱,醋酸铵及乙腈组成流动相,血浆样品经乙腈沉淀蛋白萃取后,电喷雾离子化源,选择性正离子反应监测,测定血浆中盐酸非索非那定和盐酸伪麻黄碱的浓度。健康志愿者24名,随机抽取以研究单剂量和多剂量口服非索伪麻缓释胶囊的药动学。结果血药浓度在给药数次后第六天已达到稳态状态。2次/d服药可以维持体内波动较小的稳态血药浓度。单剂量或多剂量口服受试制剂,两组分药动学参数在性别间均无显著性差异(P>0.05)。ρmax、AUC0-40、和AUC0-∞药动学参数与剂量相关。结论所建方法预处理简单,重现性好,专属性强,灵敏度高,适合测定非索非那定和伪麻黄碱的血药浓度,可用于盐酸非索非那定和盐酸伪麻黄碱复方制剂的临床药代动力学研究。

生态服装中有害物质的检测分析

生态服装的安全检测越来越受到人们的关注。本文简要介绍了生态服装的含义和检测标准,分析了纺织品及皮革制品中有害物质的危害性,分别讨论了检测不同有害物质的分析方法。

建立同时检测大鼠组织中真武汤有效成分的LESA-MS/MS方法研究

目的:建立同时检测大鼠组织中真武汤有效成分的表面液滴萃取-质谱联用(LESA-MS/MS)方法,为中药体内分布研究探索新的检测方法。方法:清洁级健康雄性SD大鼠40只,随机分为两组:正常对照组、真武汤组。真武汤组给予真武汤粉剂9.1g/kg,每日早晚各1次,均以0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃给药,灌胃体积为10mL/kg,正常对照组大鼠根据体质量给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液,连续灌胃给药60d。给药60d后取两组大鼠心脏、肾脏和肝脏组织制备冰冻切片。本研究以甲醇、水和氨水作为萃取溶液,采用LESA-MS/MS方法进行检测:通过工作站控制机器人在多重反应监测(MRM)模式下进行检测,负离子扫描模式,扫描范围120到1000Da,分辨率100000,采集时间2min。监测离子对:去甲乌药碱m/z 270.1→135.1,茯苓酸m/z 527.3→221.2,次乌头碱m/z 616.3→338.1。结果:稳定性考察显示,心脏、肾脏和肝脏组织中的待测物在反复复融3次后检测结果稳定,在-80℃冰箱中冷冻保存14d后检测结果稳定,在室温下放置24h后检测结果稳定。结论:本研究建立了同时测定大鼠组织中去甲乌药碱、茯苓酸和次乌头碱3种真武汤中有效成分的LESA-MS/MS分析方法。该方法样品前处理简单,省时省力,稳定性好,适于在临床医学领域推广和应用。

CESI-MS/MS和NanoLC-MS/MS技术对促红细胞生成素中糖肽的分析

目的:使用无鞘液毛细管电泳-质谱联用(CESI-MS/MS)和纳升液相色谱-质谱联用(NanoLCMS/MS)2种方法,对高糖基化蛋白促红细胞生成素(EPO)的糖肽进行分析,并对2种方法的分析结果进行对比。方法:以EPO为研究对象,还原烷基化后用胰蛋白酶进行酶切,酶切得到的肽段利用CESIMS/MS和NanoLC-MS/MS检测方法进行分离鉴定。CESI-MS/MS分析方法:采用熔融的石英毛细管,以10%醋酸水溶液为背景电解质,在34.5 kPa压力下进样60 s,分离电压为30 kV,同时施加正向压力6.9kPa;离子源温度为50℃,喷雾电压为1650 V,MS扫描范围为m/z 350~1250,MS/MS扫描范围为m/z 100~1500。NanoLC-MS/MS分析方法:采用YMC C_(18)色谱柱,以含0.1%甲酸的水溶液(A)-含0.1%甲酸的乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速5μL·min^(-1);离子源温度300℃,喷雾电压为+5500 V,MS扫描范围为m/z 350~1250,MS/MS扫描范围为m/z 100~1500。将采集到的质谱数据导入到软件BiopharmaView^(TM)3.0中进行搜库检索,对糖肽进行鉴定。结果:采用CESI-MS/MS方法可以单独鉴定到32条糖肽,采用NanoLC-MS/MS方法可以单独鉴定到40条糖肽;通过2种方法可以共鉴定到84条糖肽,共涉及56种糖型。对比2种方法的结果,发现对于EPO糖肽的分析,CESI-MS/MS方法可以鉴定到更多的含唾液酸的糖肽,并表现了更优异的分离效果。此外,CESI-MS/MS方法鉴定出的糖肽分子量范围更宽,可以有效分析NanoLC-MS/MS方法中未鉴定到的高分子量糖肽。结论:在糖蛋白的分析中,通过糖肽水平的分离和鉴定,可以获得糖基位点和糖基序列的信息。CESI-MS/MS方法和NanoLC-MS/MS方法提供了互补的分析结果,其联合使用可鉴定出更多种类的糖肽,为糖蛋白的研究中糖肽水平的分析提供了更全面的解决方案。

注射用雷贝拉唑钠在健康人体中的药动学及安全性研究

目的研究健康志愿者单剂量静脉滴注注射用雷贝拉唑钠和口服雷贝拉唑钠肠溶片后的药动学行为，并评价注射用雷贝拉唑钠药动学参数与剂量的相关性。方法将12名健康志愿者进行随机三交叉试验，分别单剂量静脉滴注注射用雷贝拉唑钠20、40、60mg；注射用雷贝拉唑钠试验结束后，经过1个清洗期，12名受试者再次口服20mg雷贝拉唑钠肠溶片，测定给药后10h（或12h）内的血药浓度，用DAS3．0软件计算药动学参数。结果单剂量静脉滴注20、40、60mg注射用雷贝拉唑钠后，雷贝拉唑钠的消除半衰期（t1/2）大约为1～2h，血浆药物浓度（Cmax）随剂量增加呈线性增加（0．9628±0．1321～2．9782±0．4947μg·mL-1）；20—60mg剂量曲线下面积（AUC）也呈线性增加（AUC0-t 1．3247±0．3597～3．9924±1．0μgh·mL-1；AUC0-∞：1．3390±0．3706-4．0410±1．0355μg·h·mL-1）；口服20mg雷贝拉唑钠肠溶片后，雷贝拉唑钠的tmax为3．4±0．8h，t1／2为1．38±0．50h，Cmax为0．5078±0．1798μg·mL-1，AUC0-t 为1．0518±0．4606μg·h·mL-1，AUC0-∞。为1．0641±0．4756μg·h·mL-1。结论静脉滴注注射用雷贝拉唑钠的药动学在20～60mg时剂量呈线性，Cmax、AUC的升高与剂量成正比；不同剂量组间的药动学参数无统计学差异；除20mg剂量组的t1/2性别间存在显著性差异外，其他剂量组的药动学参数性别问均无统计学差异。