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RNAi沉默淀粉分支酶sbe3基因对水稻直链淀粉的影响
被引量:
10
1
作者
陈忠正
郭健
+2 位作者
李斌
文海涛
赵亮
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期291-295,共5页
本研究利用RNAi技术,通过RT-PCR方法克隆出水稻淀粉分支酶sbe3基因片断,经两步组装法将sbe3基因片断分别正向、反向组装入pRNAi-ubi,成功构建sbe3基因RNAi转化载体pRNAi-ubi/sbe3。在农杆菌介导下,对粳稻中花11未成熟胚诱导的愈伤组织...
本研究利用RNAi技术,通过RT-PCR方法克隆出水稻淀粉分支酶sbe3基因片断,经两步组装法将sbe3基因片断分别正向、反向组装入pRNAi-ubi,成功构建sbe3基因RNAi转化载体pRNAi-ubi/sbe3。在农杆菌介导下,对粳稻中花11未成熟胚诱导的愈伤组织进行转化,通过PCR、Southern杂交鉴定获得一批转基因植株。半定量RT-PCR鉴定出转化苗T1代种子中sbe3基因表达被明显抑制,但只引起转基因水稻胚乳中直链淀粉含量少量的提高,说明采用RNAi仅沉默sbe3基因对水稻胚乳直链淀粉含量没有显著影响。
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关键词
水稻
淀粉分支酶3
RNA干涉
直链
淀粉
下载PDF
职称材料
RNA干扰水稻SBE3基因的表达对籽粒淀粉合成及其关键酶活性的影响
被引量:
12
2
作者
汪结明
张建
+3 位作者
江海洋
朱苏文
范军
程备久
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期313-320,共8页
为探讨RNA干扰水稻SBE3基因的表达对籽粒淀粉合成及其关键酶活性的影响,以水稻品种中花11及以其为受体的转基因株系为材料,分别检测水稻SBE3基因的表达、籽粒发育各时期淀粉合成关键酶活性变化及直链、支链淀粉相对含量。结果表明,导入...
为探讨RNA干扰水稻SBE3基因的表达对籽粒淀粉合成及其关键酶活性的影响,以水稻品种中花11及以其为受体的转基因株系为材料,分别检测水稻SBE3基因的表达、籽粒发育各时期淀粉合成关键酶活性变化及直链、支链淀粉相对含量。结果表明,导入的SBE3基因RNA干扰结构成功地降低了目的基因的表达,并使其酶活性在籽粒发育各时期均显著降低并提前3d达高峰期,且不同株系间具有差异。同时也使不同发育时期籽粒的ADPG-PPase和SSS及DBE活性均不同程度地显著降低,尤其以SSS和ADPG-PPase活性峰值降幅最大。此外,两个转基因水稻株系各时期籽粒直链淀粉含量均显著高于对照,而其成熟籽粒千粒重却显著降低,直链淀粉含量越高,千粒重越低。
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关键词
水稻
RNA干扰
淀粉分支酶3
淀粉
合成
酶
活
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职称材料
题名
RNAi沉默淀粉分支酶sbe3基因对水稻直链淀粉的影响
被引量:
10
1
作者
陈忠正
郭健
李斌
文海涛
赵亮
机构
华南农业大学食品学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期291-295,共5页
基金
华南农业大学创新课题基金项目
文摘
本研究利用RNAi技术,通过RT-PCR方法克隆出水稻淀粉分支酶sbe3基因片断,经两步组装法将sbe3基因片断分别正向、反向组装入pRNAi-ubi,成功构建sbe3基因RNAi转化载体pRNAi-ubi/sbe3。在农杆菌介导下,对粳稻中花11未成熟胚诱导的愈伤组织进行转化,通过PCR、Southern杂交鉴定获得一批转基因植株。半定量RT-PCR鉴定出转化苗T1代种子中sbe3基因表达被明显抑制,但只引起转基因水稻胚乳中直链淀粉含量少量的提高,说明采用RNAi仅沉默sbe3基因对水稻胚乳直链淀粉含量没有显著影响。
关键词
水稻
淀粉分支酶3
RNA干涉
直链
淀粉
Keywords
Oryza sativa L.
starch branch enzyme
3
(sbe
3
)
RNA interference
amylose
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
RNA干扰水稻SBE3基因的表达对籽粒淀粉合成及其关键酶活性的影响
被引量:
12
2
作者
汪结明
张建
江海洋
朱苏文
范军
程备久
机构
安徽农业大学作物生物学安徽省重点实验室
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期313-320,共8页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2008AA10Z408
2006AA10Z1B4)资助
文摘
为探讨RNA干扰水稻SBE3基因的表达对籽粒淀粉合成及其关键酶活性的影响,以水稻品种中花11及以其为受体的转基因株系为材料,分别检测水稻SBE3基因的表达、籽粒发育各时期淀粉合成关键酶活性变化及直链、支链淀粉相对含量。结果表明,导入的SBE3基因RNA干扰结构成功地降低了目的基因的表达,并使其酶活性在籽粒发育各时期均显著降低并提前3d达高峰期,且不同株系间具有差异。同时也使不同发育时期籽粒的ADPG-PPase和SSS及DBE活性均不同程度地显著降低,尤其以SSS和ADPG-PPase活性峰值降幅最大。此外,两个转基因水稻株系各时期籽粒直链淀粉含量均显著高于对照,而其成熟籽粒千粒重却显著降低,直链淀粉含量越高,千粒重越低。
关键词
水稻
RNA干扰
淀粉分支酶3
淀粉
合成
酶
活
Keywords
Rice
RNA interference
Starch branching enzyme
3
Starch accumulation
Enzyme activity
分类号
S511 [农业科学—作物学]
Q522 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RNAi沉默淀粉分支酶sbe3基因对水稻直链淀粉的影响
陈忠正
郭健
李斌
文海涛
赵亮
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007
10
下载PDF
职称材料
2
RNA干扰水稻SBE3基因的表达对籽粒淀粉合成及其关键酶活性的影响
汪结明
张建
江海洋
朱苏文
范军
程备久
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
12
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职称材料
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