血小板β-淀粉样肽前体蛋白免疫强度及异构体比率对Alzheimer病的诊断价值

目的探讨血小板β-淀粉样肽前体蛋白(APP)免疫强度及异构体比率对Alzheimer病(AD)的诊断价值。方法应用流式细胞术和Western Blot方法分别检测31例AD患者、22例血管性痴呆(VD)患者、28例神经变性病患者及30名健康老年人血小板APP免疫强度和APP异构体比率。结果APP免疫活性各组间差异无统计学意义;APP130/APP106比率AD组明显低于VD组、神经变性病组和健康老年组(均P<0.05);AD组APP130/APP106比率与其简易智力状态量表(MMSE)评分呈正相关(r=0.607,P<0.01)。结论血小板APP异构体比率降低可用于临床对AD的诊断。

血小板β-淀粉样肽前体蛋白免疫强度及异构体比率对Alzheimer病的诊断价值

目的探讨血小板β-淀粉样肽前体蛋白(APP)异构体比率对Alzheimer病(AD)的诊断价值。方法应用流式细胞术和Western Blot分别检测31例AD患者、22例血管性痴呆(VD)患者、28例神经变性病患者及30例健康老年人血小板APP免疫强度和APP130/APP106比率。结果APP免疫活性各组间差异无显著性;AD组APP130/APP106比率明显低于VD组、神经变性疾病组和健康老年组(均P<0.05),AD组APP130/APP106比率与其MMSE评分呈显著正相关(r=0.607,P<0.01)。结论AD患者血小板APP异构体比率降低可用于临床对AD鉴别。

β-淀粉样肽前体蛋白的结构及生物活性

β 淀粉样肽前体蛋白是AD患者脑内神经炎斑的主要成分———β 淀粉样肽的代谢前体。其基因定位于人第 2 1号染色体 ,经可变剪接可产生 1 0种转录物。β 淀粉样肽前体蛋白广泛表达于几乎所有的神经元和非神经元组织 ,具有一个较长的细胞外肽链、单一跨膜区及一个短的胞内区域。研究表明 ,它具有神经营养、调节细胞粘附及抑制丝氨酸蛋白酶等多种生物活性。现有资料还提示β 淀粉样肽前体蛋白可能是细胞因子 (或其类似物 )

二苯乙烯苷对神经细胞淀粉样肽前体蛋白表达的影响及其与CREB调节相关的作用机制

目的探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucoside,TSG)对培养神经细胞淀粉样肽前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)表达的影响及其作用机制。方法应用Western blotting法检测APP和c AMP效应元件结合蛋白(c AMP responsive element-binding protein,CREB)的表达。用Matinspector软件分析APP启动子区CRE顺式反应元件;构建不同长度APP启动子区荧光素酶表达质粒;用双荧光素酶报告基因系统检测细胞中荧光素酶活性。结果由Forskolin激活SH-SY5Y细胞中CREB的同时可下调APP表达,成功构建了含有CRE元件的APP启动子区荧光素酶表达质粒。TSG能够抑制SH-SY5Y细胞内APP表达,并对APP启动子转染细胞内含有CRE1和2的APP荧光素酶报告基因质粒表达有显著抑制作用。结论 TSG能够下调神经细胞中APP的表达,其机制可能与影响CREB与CRE元件的结合有关。

淀粉样肽前体蛋白17肽对紫外线照射后皮肤成纤维细胞内活性氧簇和基质金属蛋白酶-1 mRNA表达的作用

目的通过建赢体外培养人皮肤成纤维细胞的紫外线损伤模型，探讨淀粉样肽前体蛋白319～335肽段（APP17肽）对紫外线（ultraviolet，UV）照射后人皮肤成纤维细胞的保护作用及其可能的机制。方法从健康青年男性的包皮组织原代培养成纤维细胞。UV照射培养的成纤维细胞，并给予不同浓度的APP17肽保护。MTT法检测细胞活性。激光共聚焦显微镜检测活性氧（ROS）的水平，实时定最RTPCR方法检测基质金属蛋白酶-1（MMP-1）mRNA的表达。结果成功培养原代人皮肤成纤维细胞，并建立体外UV损伤模型。UV照射后细胞活性下降（P〈0．05），细胞内ROS产生增多（P〈0．05），MMP-1 mRNA表达增加1．78倍（P〈0．01）。APP17肽可增加UV照射后细胞活性（P〈0．05），降低细胞内ROS水平（P〈0．05），抑制MMP-1 mRNA表达（P〈0．05）。结论APP17肽对成纤维细胞的UV损伤有保护作用，APP17肽的光保护作用可能与其抑制ROS产生有关。

子宫内膜癌中淀粉样肽前体样蛋白2表达变化及对预后的影响分析

目的探讨子宫内膜癌中淀粉样肽前体样蛋白2(APLP2)的表达变化及对预后影响,为改善患者预后提供参考依据。方法通过免疫组织化学法对38例子宫内膜癌和42例正常子宫内膜石蜡切片的APLP2表达情况,并收集患者的临床资料和随访结果,分析APLP2的表达与患者临床资料关系,根据患者APLP2表达情况分为阳性组和阴性组,比较2组患者生存情况。结果子宫内膜癌组织中APLP2的阳性表达率为28.95%,明显低于正常子宫内膜组织的85.71%(P<0.05);APLP2阳性表达与肌层浸润、雌激素受体表达、分化程度相关(P<0.05),与年龄、FIGO分期、病理类型、淋巴结转移无关(P>0.05);随访时间6~36个月,阳性组生存率为81.48%,明显高于阴性组的55.45%(P<0.05)。结论子宫内膜癌患者中APLP2呈低表达,其低表达与肌层浸润和分化程度有关,并可作为患者预后的重要评估指标。

TO901317对海马神经元β-分泌酶表达及β-淀粉样肽生成的影响

目的研究肝X受体(LXR)配体TO901317对海马神经元淀粉样前体蛋白(APP)、α-分泌酶(ADAM10)和β-分泌酶(BACE1)mRNA表达的影响及与β-淀粉样肽(Aβ)生成的关系。方法大鼠海马神经元培养至第7天,在饲养液中加入2.0μmol/LTO901317,继续培养48h。应用RT-PCR方法研究海马神经元APP、ADAM10和BACE1等基因的mRNA的表达,放免法检测培养液Aβ含量的变化。结果TO901317降低海马神经元APP和BACE1 mRNA表达(P<0.01),减少培养液Aβ含量(P<0.01),但不影响ADAM10 mRNA表达(P>0.05)。结论TO901317激活LXR,能通过降低APP和BACE1的表达来减少海马神经元Aβ分泌。

淫羊藿黄酮与淫羊藿苷对APP转基因小鼠大脑伊淀粉样肽及α-synuclein的影响

目的：β淀粉样肽前体蛋白（APP）经淀粉源途径水解产生过量Aβ表达是AD病理发生、发展级联反应的主要起始病因和重要病理机制。β分泌酶BACE是产生β-淀粉样肽（Aβ）的淀粉源途径中的重要分泌酶，对Aβ生成有直接影响。α-synuclein（α-syn）是AD病人脑内老年斑的核心成分的前体蛋白。本实验的拟观察淫羊藿黄酮和淫羊藿苷对APP转基因小鼠脑内APP、BACE蛋白表达、A8含量及淀粉样斑块数量及α-syn表达的影响。方法：用药组小鼠自4月龄开始灌胃给予淫羊藿黄酮小（30mg／kg／d）、大剂量（100mg／kg／d）及淫羊藿苷小（18mg／kg／d）、大剂量（58mg／kg／d）6个月至10月龄，正常对照组、转基因阴性对照组及模型组以同样方式灌胃给予蒸馏水。应用免疫组化学及Western blot方法分别检测海马CAl区及皮层中APP、BACE和α-syn的表达，采用双抗体夹心ELISA试剂盒测定海马中不溶性Aβ-42含量，采用刚果红染色和Bielsehowsky镀银染色法检测淀粉样斑块，采用免疫荧光双标染色方法分别检测Aβ与淀粉样纤维、α-syn与Aβ及淀粉样纤维共表达。结果：10月龄的APP转基因小鼠大脑海马和皮层APP、BACE、α-syn表达及海马不溶性Aβ1-42含量明显增加，海马和皮层淀粉样斑块数量明显增加，并且淀粉样纤维与Aβ1-42在海马CAl区、齿状回和皮层顶叶存在共定位关系，提示转基因小鼠脑内淀粉样斑块形成与Aβl-42密切相关。结论：10月龄的APP转基因小鼠脑内存在多种拟AD痴呆样病理改变，是较好的拟AD痴呆动物模型。淫羊藿黄酮和淫羊藿苷能减少APP转基因模型小鼠脑内Aβ经由淀粉源途径生成及含量，并能降低α-syn表达，从而减少Aβ与α-syn彼此促进的淀粉样纤维聚集，对防治AD等神经退行性疾病具有良好的应用前景。

小鼠糖尿病脑病神经元退变的机制及淀粉样β蛋白前体17肽的作用

目的 观察小鼠糖尿病脑淀粉样 β肽 (Aβ)和内质网Aβ结合蛋白 (ERAB)的变化 ,以了解糖尿病神经元退变的可能机制并观察淀粉样 β蛋白前体 (APP) 17肽的作用。 方法 用链脲佐菌素诱发糖尿病小鼠模型 ,并用APP17肽保护。 4周后 ,取脑 ,做APP17肽、Aβ 1～ 40、Aβ 1～ 42、Aβ 1～ 16及ERAB免疫组化染色。结果 正常小鼠海马内表达APP17肽、Aβ 1～ 40、Aβ 1～ 42、Aβ 1～ 16及ERAB的神经元数目少 ,染色淡 ,糖尿病小鼠海马内上述各种神经元的染色数目及染色程度均比正常小鼠明显增加 (P <0 .0 5 ) ,用APP17肽保护后 ,上述各种神经元染色数目及程度与正常小鼠接近。结论 糖尿病小鼠海马神经元表达Aβ和ERAB比正常小鼠明显增加 ,这可能是糖尿病脑病海马神经元退变的机制之一。APP17肽可使糖尿病小鼠Aβ及ERAB表达恢复正常 ,提示APP17肽有调节Aβ代谢和改善神经元退变的功能。

尿酸与阿尔兹海默症相关蛋白的关系研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是高发于老年前期和老年的一种中枢神经系统退行性疾病[1],以进行性认知障碍并伴有行为损伤为特征。主要临床表现为交流障碍、视空间功能障碍、记忆力持续衰退和社会接触能力减退,严重者发展为痴呆,丧失生活自理能力。AD是严重影响老年人健康的疾病之一,据2019年全球疾病负担研究统计,在1990年至2019年期间,中国AD发病率增长了264.8%,死亡率上升了247.9%,40岁及以上人群因AD而死亡的估计人数从1990年的9万增加到2019年的32万,给人群健康和医疗保健系统带来了巨大的挑战[2]。AD起病隐匿,发病进程缓慢,临床前期大脑内已经有AD相关生物标志物的病理改变。

APP17肽对链佐星-大鼠海马胰岛素信号转导相关蛋白表达的影响

目的 通过免疫组化的方法 ,研究APP1 7肽对链佐星 (STZ)诱发的糖尿病大鼠海马神经元Akt PKB ,CREB ,GSK 3β以及Bax ,Bcl 2等蛋白表达的影响。方法 用STZ腹腔注射诱发糖尿病模型 ,并皮下注射APP1 7肽对糖尿病组进行治疗。 1 0周后行通道水迷宫测定 ,取脑组织进行Akt PKB ,GSK 3β以及Bax ,CREB ,Bcl 2的免疫组化染色。结果 糖尿病组海马内Akt PKB ,CREB的阳性反应神经元数目减少 ,染色淡。GSK 3β,Bax阳性神经元较对照组明显增多 (P <0 .0 1 )。Bcl 2阳性神经元数目 3组间相比无明显差异。糖尿病APP1 7肽治疗组与对照组相近。结论 糖尿病脑病大鼠海马存在胰岛素信号转导途径相关和凋亡级联反应相关蛋白的表达异常 ;APP1 7肽能改善这些蛋白表达 。

APP17肽对D-半乳糖脑老化小鼠海马凋亡相关基因表达的影响

目的 研究APP17肽对D 半乳糖脑病小鼠海马神经元凋亡的影响。 方法 用D 半乳糖制备脑老化模型 ,皮下注射APP17肽治疗D 半乳糖脑老化小鼠 ,3个月后取脑组织做Bcl 2、Bax、CREB、AKt、AIF免疫组织化学染色。 结果 D 半乳糖脑病小鼠海马内Bax、AIF阳性反应神经元胞浆与突起深染 ,而正常小鼠及APP17肽保护的D 半乳糖小鼠海马阳性细胞数目少 ,染色淡 ;D 半乳糖小鼠海马内Bcl 2、CREB、AKt阳性细胞数目少 ,染色淡 ;而正常小鼠及APP17肽保护的D 半乳糖小鼠海马阳性反应神经元胞浆与突起深染。 结论 促进凋亡的Bax、AIF在D 半乳糖小鼠海马表达增加 ;抑制凋亡的Bcl 2、CREB、AKt在D 半乳糖小鼠海马表达降低。APP17肽能影响D 半乳糖脑病小鼠脑内Bcl 2、Bax、CREB、AKt、AIF的表达 。

PI3K特异性抑制剂Wortmannin和APP17肽对SY5Y细胞胰岛素信号转导通路的作用

目的利用PI3K的特异性抑制剂Wortmannin阻断体外培养的人神经母细胞瘤株SY5Y细胞的存活信号转导通路,观察β淀粉样肽前体蛋白(APP)17肽对SY5Y细胞生长的影响及其作用机制。方法体外培养SY5Y细胞,分为对照组、Wortmannin组、APP17肽组、APP17肽+Wortmannin组、葡萄糖组、葡萄糖+APP17肽组、葡萄糖+Wortmannin+APP17肽组,观察各组细胞的噻唑蓝(MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞轴突长度、胞体面积。结果(1)APP17肽可促进SY5Y细胞MTT代谢率升高、LDH漏出率降低、细胞轴突长度和胞体面积增加,但经Wortmannin作用后,其作用减弱。(2)APP17肽对高糖环境下的SY5Y细胞也有上述作用,且经Wortmannin作用后其作用减弱。结论APP17肽能通过激活胰岛素的PI3K信号转导通路发挥其神经保护作用。

脑室注射链脲佐菌素对大鼠海马神经元凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察App17肽对脑室注射链脲佐菌素的大鼠海马神经元凋亡相关蛋白表达的影响,探讨胰岛素信号转导通路障碍对神经元存活的作用。方法脑室注射链脲佐菌素(STZ)制作大鼠痴呆模型。3周后,皮下注射App17肽。4周后取脑组织做Bcl-2、Bax、CytoC免疫组织化学染色及Western blotting半定量分析。结果模型组大鼠海马内Bax、CytoC阳性反应神经元细胞数目多,胞质深染,细胞计数与正常组及治疗组有显著性差异(P<0.01);模型组大鼠海马内Bcl-2阳性细胞数目少,胞质染色淡,细胞计数与正常组及治疗组有显著性差异(P<0.01)。Western blotting半定量分析可见、Bcl-2、Bax、CytoC出现清晰的条带,组间可见较明显的差异(P<0.01)。结论脑室注射STZ的大鼠海马内促进凋亡的Bax、CytoC表达增加;抑制凋亡的Bcl-2表达降低。App17肽可影响上述蛋白的表达,使之接近正常。胰岛素信号转导通路对神经元存活有一定作用。

APP17肽和救脑益智胶囊水提液对D-半乳糖脑老化小鼠海马PP-1表达的影响

为探讨 APP17肽及救脑益智胶囊水提液对 D-半乳糖脑老化小鼠海马蛋白磷酸酯酶 -1( PP-1)表达的影响。本研究将昆明小鼠随机分为 5组 :正常对照组、D-半乳糖对照组、APP17肽治疗组、小剂量中药治疗组、大剂量中药治疗组 ,每组动物 8只。用 D-半乳糖制备脑老化模型 ,并皮下注射 APP17肽或救脑益智胶囊水提液灌胃对 D-半乳糖脑老化小鼠进行治疗 ,3个月后取脑组织做 PP-1免疫组织化学染色。结果显示 :D-半乳糖小鼠和大剂量救脑益智胶囊水提液治疗组小鼠海马 PP-1阳性细胞数目少 ,染色淡 ;而正常小鼠、APP17肽保护和救脑益智胶囊水提液小剂量治疗的 D-半乳糖小鼠海马阳性反应神经元数目多 ,胞浆与突起深染。结果提示 :抑制凋亡的 PP-1在 D-半乳糖小鼠海马表达降低。 APP17肽和小剂量救脑益智胶囊水提液治疗能影响 D-半乳糖脑病小鼠脑内 PP-1的表达 ,使之接近正常。

血尿酸对大鼠阿尔茨海默病生物标记物表达的影响

目的观察不同血尿酸水平对大鼠阿尔茨海默病生物标记物β-淀粉样肽前体蛋白(amyloid recurosr protein,APP)及β分泌酶-1(beta-site amyloid precursor protein cleaving enzyme-1,BACE1)表达的影响。方法采用腹腔注射氧嗪酸钾盐(oxonic acid Potassium salt,OAPS)的方法建立不同水平高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)大鼠模型,HE染色观察大鼠海马区形态学变化;Western blot检测海马区APP及BACE1的表达,并进行统计学分析。结果与正常对照组比较,OAPS处理组血尿酸水平明显升高(P<0.01),海马区APP及BACE1的表达明显上调(P<0.001),与低剂量组比较,中、高剂量组血尿酸水平升高(P<0.05),海马区APP及BACE1表达减少(P<0.05),与中剂量组比较,高剂量组血尿酸水平增高(P<0.01),高剂量组的大鼠海马组织APP的表达减少(P<0.05),BACE1表达无统计学差异性(P>0.05)。结论高于正常水平的血尿酸可能为AD发生或发展的危险因素,其水平越高对AD危险性越低。

积雪草乙酸乙酯提取物对快速老化模型小鼠SAMP8记忆行为及脑内基因APP和BACE1表达影响的研究

目的:探讨积雪草乙酸乙酯提取物对快速老化模型小鼠SAMP8记忆行为和大脑淀粉样肽前体蛋白(APP)、淀粉蛋白前β位分解酶1(BACE1)基因表达的影响。方法:将SAMP8随机分为模型对照组、积雪草乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组(以生药量计为40、20、10 g·kg-1)和石杉碱甲组(0.386 mg·kg-1),8只/组,各药物组按设计剂量连续给药2个月,模型对照组给予等体积双蒸水灌服。采用Morris水迷宫(MWM)方法观察SAMP8行为学改变,应用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定SAMP8脑内APP和BACE1 m RNA含量的变化。结果:Morris水迷宫测试中,与模型对照组比较,积雪草乙酸乙酯提取物高、中剂量组和石杉碱甲组的逃避潜伏期显著缩短(p<0.01)、停留时间显著延长(p<0.01)及平台象限百分比显著增大(p<0.01或p<0.05),积雪草乙酸乙酯提取物中剂量组和石杉碱甲组的寻求次数比模型对照组明显增多(p<0.01);RT-PCR结果显示积雪草乙酸乙酯提取物高、中剂量组和石杉碱甲组SAMP8大脑的APP和BACE1 m RNA表达水平显著降低(p<0.05)。结论:积雪草乙酸乙酯提取物对SAMP8学习记忆功能有明显改善作用,并能降低脑内APP和BACE1 m RNA的表达。

APLP2在子宫内膜癌中的表达及其对预后的预测价值

目的探讨子宫内膜癌中淀粉样肽前体样蛋白2(APLP2)的表达,分析其与各临床参数的相关性。方法通过数据挖掘,分析335例肿瘤基因图谱(TCGA)数据库中的子宫内膜癌RNA-SEQ数据并结合患者的完整生存期信息,采用Kaplan-Meier法分析APLP2表达与子宫内膜癌患者生存之间的关系。采用real-time PCR技术检测正常子宫内膜和子宫内膜癌各30例冰冻组织中APLP2 mRNA的表达情况。应用免疫组织化学法检测88例子宫内膜癌组织和32例正常子宫内膜组织中APLP2蛋白的表达。结果 Kaplan-Meier生存曲线分析表明,APLP2低表达的子宫内膜癌患者整体生存率明显降低(HR=2.87,P=0.002)。实时荧光定量PCR检测结果提示,APLP2 mRNA在子宫内膜癌组织中表达明显低于正常内膜组织(P=0.031)。免疫组织化学结果显示:APLP2蛋白在子宫内膜癌组织中的阳性表达率明显低于正常子宫内膜组织(P=0.025),其表达水平与雌激素受体表达水平相关(P=0.010)。结论 APLP2在子宫内膜癌中起到抑癌基因的功能。APLP2基因可能通过雌激素受体途径起作用。APLP2可能成为子宫内膜癌预后预测及治疗的靶点。

APLP2在恶性肿瘤中的研究进展

淀粉样肽前体样蛋白2(APLP2)作为淀粉样前体蛋白(APP)家族中的一员,广泛存在于哺乳动物的全身组织细胞中,是一种高度保守的单次跨膜糖蛋白。在生理状态下,APLP2具有调节其所在细胞部分功能的作用,例如在哺乳动物神经细胞中,APLP2具有促进哺乳动物神经细胞迁移的作用。另外,APLP2在人体中具有维持铜的稳态、维持位于细胞膜表面的主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)类分子的表达平衡以及维持葡萄糖和胰岛素平衡的作用。近年来,越来越多的研究发现,APLP2在恶性肿瘤中发挥着一定的作用,例如通过启动细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号转导通路促进肿瘤细胞的增殖,通过调节肌动蛋白结构增加肿瘤的转移速度以及通过更多地结合MHCⅠ类分子从而发挥抗肿瘤细胞凋亡的作用。本文对APLP2在恶性肿瘤组织中的表达情况及相关机制的研究进展作一综述。

APLP2基因多态性与冠心病的相关性研究

目的探讨淀粉样肽前体样蛋白2(APLP2)基因单核苷酸多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病发生率的关联性。方法选择2010年8月-2016年10月在新疆医科大学第一附属医院心脏中心住院并行冠状动脉造影术的998例患者。根据冠脉造影结果分为病例组(n=405)和对照组(n=593),采用改进的多重连接检测反应方法对APLP2基因两个多态性位点rs190276777和rs3740881进行了基因分型,并分析两组间频率分布差异。结果APLP2基因rs190276777多态性位点的基因型分布、隐性模型(CC+CG vs GG)和相加模型(CC+GG vs CG)中的分布频率在病例组和对照组存在明显差异(P<0.001)。Logistic回归分析结果显示APLP2基因rs190276777多态性位点表现为冠心病的独立危险因素(OR=1.968,95%CI:1.209~3.204,P=0.006)。结论APLP2基因rs190276777位点多态性可能是冠心病发病的潜在危险因素,人群中携带APLP2基因rs190276777多态性位点者罹患冠心病的可能性更高。