淀粉水解液对纤维素酶合成的诱导作用

以淀粉为原料,在特定条件下制备成一种可溶性水解液。经高效液相色谱等手段检测发现,内含纤维二糖等诱导物。实验证明,这种淀粉水解液能有效地诱导里氏木霉(Trichoderma reesei Rut C30)合成纤维素酶。在自由菌丝产酶条件下,滤纸酶活和纤维二糖酶活分别为1.51IU/mL和0.10IU/mL;采用固定化菌丝细胞在一批加料条件下产酶,滤纸酶活为1.30IU/mL,略低于自由菌丝产酶的结果,但纤维二糖酶活(0.19IU/mL)要比自由菌丝发酵高得多。作者认为,若采用分批添料技术,有利于消除因葡萄糖浓度过高对产酶形成的抑制作用,酶活可望进一步得到提高。

高效液相色谱法测定奶制品和淀粉水解液中的糖

本文采用乙二胺作为硅胶柱改善剂的高效液相色谱法测定了奶制品和淀粉水解液中糖的含量。对样品处理方法及色谱条件作了探讨，采用Ｐｈ（Ａｃ）_２－Ｎａ_２Ｃ_２Ｏ_４－Ｋ_２ＨＰＯ_４处理样品，含０．０１％乙二胺的乙腈－水（６５：３５，Ｖ／Ｖ）作流动相，示差折光检测器检测。本方法操作简单、价廉、准确。

添加纤维二糖、淀粉水解液对纤维素酶制备的影响

里氏木霉（ＴｒｉｃｈｄｅｒｍａｒｅｓｅｉＲｕｔＣ３０）以经蒸汽爆破预处理的玉米秆为底物制备纤维素酶，产酶ｐＨ值维持在５．０左右，底物浓度为３．７５％（玉米秆，干基）时，产酶３天，滤纸酶活力和纤维二糖酶活力达１．７６ＩＵ／ｍＬ和０．３８ＩＵ／ｍＬ，纤维二糖酶活力高，酶水解得率达８０．２％；在试验培养基中添加纤维二糖对纤维素酶的合成具有抑制作用，培养基中添加纤维二糖浓度在０．２５～１．５０ｇ／Ｌ时，滤纸酶活力和纤维二糖酶活力同时下降３０％～４０％；淀粉水解液对纤维毒酶合成的影响是由葡萄糖的抑制和复合糖的诱导共同作用的结果，在用本研究培养基制备纤维酶过程中添加淀粉水解液，从经济角度来说是不适宜的。

发夫酵母利用淀粉水解液发酵合成虾青素的研究

发夫酵母269菌株能够直接发酵玉米淀粉或马铃薯淀粉水解液进行虾青素的生物合成。淀粉水解液的主要成分为葡萄糖,另外还有少许二糖和极限糊精,在添加适量其它营养物质后,可被269菌株利用生产虾青素。摇瓶实验结果表明,培养72h后,发夫酵母的生物量为12.5g/l,虾青素的体积产率为11.86mg/l;在10L罐分批发酵实验中,72h后发夫酵母的生物量可达17.5g/l,色素的体积产率达19.5mg/l;在10L罐恒pH补料发酵实验中,128h后发夫酵母的生物量可达49.5g/l,色素的体积产率达54.3mg/l。

α－淀粉酶水解液发酵生产麦角隐亭的研究

用５％麦粉的α－淀粉酶水解液培养麦角菌ＡＴＣＣ２００１９，结果其发酵液能产生麦角隐亭（５０．１６±２．４０）μｇ／ｍＬ，与３０％蔗糖的发酵培养基的产碱量（２０．７４±３．５３）μｇ／ｍＬ相比，两者有差异（ｐ＜０．０５）．在１０％蔗糖的培养基中，发酵第４天后补加５％麦粉的α－淀粉酶水解液，麦角隐亭的产量为（４７．１２±６．３４）μｇ／ｍＬ，也高于碳源为３０％蔗糖的产碱量（１９．８９±２．４０）μｇ／ｍＬ，两者差异显著，ｐ＜０．０１．而两种方法的菌丝体生长量均相差无几，ｐ＞０．０５．

用于微生物油脂发酵的木薯淀粉水解工艺的优化

为了提高木薯淀粉的发酵产脂能力,采用正交实验和均匀设计法对木薯淀粉酶法水解工艺进行了优化,结果表明α-淀粉酶量、糖化酶量和液化温度对木薯淀粉水解有显著影响。当淀粉酶量为756 U/g,糖化酶量为602 U/g,液化温度为92°C,其水解DE值达到97.3%。以该水解液进行皮状丝胞酵母B3(T.cutaneum B3)油脂发酵时,其生物量和油脂产量分别为16.38 g/L和7.22 g/L,比葡萄糖作为碳源的生物量和油脂产量高46.25%和41.12%,利用木薯淀粉水解液作为新型发酵碳源生产微生物油脂是一种理想的途径。

匍枝根霉淀粉发酵产纤维素酶的条件研究

以匍枝根霉TP-02(Rhizopus stolonifer TP-02)为出发菌株,首次利用淀粉水解液为主要碳源,快速合成纤维素酶。从碳源、氮源、培养温度、初始p H、装液量和接种量等方面研究该菌株的产酶条件。获得最佳培养基和培养条件为:10%淀粉水解液,麸皮浸出汁5%,NH_4Cl 0.5%,KH_2PO_40.5%,MgSO_4·7H_2O 0.4%,CaCl_20.4%,酵母粉0.6%;发酵温度30℃,装液量80 m L/(250 m L),初始p H 5.0,接种量8%。通过摇瓶实验优化培养基和培养条件后,获得滤纸酶活为9.66 IU/m L。研究中进一步利用该培养基在5 L发酵罐中发酵至60 h时酶活达到最大值,其中滤纸酶活、外切酶活、内切酶活和β-葡萄糖苷酶分别为16.51、15.39、11.48和6.17 IU/m L。与以往纤维素类物质为碳源发酵产纤维素酶相比,淀粉水解液发酵获得的纤维素酶酶系组成有了较大的变化,特别是关键的外切酶活有了大幅度提高,而发酵时间缩短了将近1倍。

淀粉的硝酸氧化法制草酸实验结果及工艺

本文在研究淀粉的硝酸氧化法制草酸时,摒弃了把硝酸溶液逐步加入硫酸、催化剂和糖的混合溶液中的操作方法,而是采用了将糖液逐步加入硫酸、硝酸和催化剂的混合溶液中的操作方法。避免了硝酸溶液局部瞬间浓度过大造成的恶果,明显提高了产率。

响应面优化法在纤维素酶合成培养基设计上的应用

以里氏木霉(Trichoderma reesei)RUTC30为产酶菌株,经酵母发酵除去葡萄糖后的脱葡萄糖淀粉水解液为碳源,采用Plackett-Burman(PB)设计法寻找培养基组成中对产酶影响最大的因素,并经响应面试验设计优化最佳产酶条件。试验得到对产酶影响最大的两个因素分别为脱葡萄糖淀粉水解液质量浓度和氯化钙质量浓度,经最陡爬坡和响应面试验建立了滤纸酶活与两者之间的模型。对此模型求解得到,当脱葡萄糖淀粉水解液质量浓度为28.85 g/L、氯化钙质量浓度为0.67 g/L时,产酶120 h理论酶活为7.52 FPIU/mL,156 h达到最大酶活为11.16 FPIU/mL,β-葡萄糖苷酶活最大为0.79 IU/mL。

海藻糖的MTSase及MTHase酶促合成条件的研究

本室收藏一株产 MTSase和 MTHase两酶并能将淀粉水解物转化为海藻糖的菌株 Micrococcus luteus。实验发现 ,菌体在对数生长期细胞内的 MTSase和 MTHase累积量极少 ,但在其基本停止生长后继续培养 12 h,胞内MTSase和 MTHase两酶含量急剧增加。两酶联合作用的最适反应条件为 p H6 .5 ,温度 4 0℃ ;最适底物是 DE值为11.6、浓度为 15 %的淀粉水解液。

麦白霉素发酵培养基的改进

研究了淀粉水解液全部替代葡萄糖作为碳源发酵麦白霉素的工艺条件。用正交实验得出摇瓶培养基消毒后的最佳基质浓度为总糖 5 .0g 10 0mL ,还原糖 3.8g 10 0mL ,氨基氮 60mg mL ,溶解磷 30 0 μg mL。以 5 0L发酵罐进行实验 ,得出了麦白霉素的发酵代谢曲线和淀粉的适宜水解条件。经 30t发酵罐放大实验结果表明 ,与葡萄糖作碳源相比 ,用淀粉水解液作碳源发酵麦白霉素 ,发酵单位提高 2 3.0 % ,生产成本降低 38.0 %。

用于荧光辅助糖电泳寡糖标尺的构建

荧光辅助糖电泳(FACE)是一种简洁廉价的分离糖类方法。寡糖首先与8-氨基萘基-1,3,6-三磺酸(ANTS)反应记,然后,ANTS标记的寡糖通过在32%丙烯酰胺-2.4%双丙烯酰胺组成的分离胶上电泳从而得以相互分离。结果表明,电泳谱能准确反映寡糖的聚合度梯度,因而,一种具有连续聚合度的淀粉水解液的荧光标记电泳图谱可以作为荧光辅助糖电泳的子量标尺。

重组枯草芽孢杆菌发酵廉价原料生产普鲁兰酶

[目的]构建长野芽孢杆菌普鲁兰酶突变体枯草芽孢杆菌工程菌株,优化发酵条件,筛选廉价的培养基原料生产普鲁兰酶。[方法]利用分子生物学手段,将基因pul324和表达载体p WB980连接,构建表达质粒p WB-pul324并转化Bacillus subtilis WB600;对表达产物进行SDS-PAGE分析和初始酶活的测定。进一步优化发酵条件,对不同碳源和氮源进行发酵培养基的筛选,同时研究不同金属离子的添加和培养基初始p H、接种量对发酵产酶的影响。[结果]获得基因工程菌B.subtilis WB600/p WB-pul324,SDS-PAGE电泳结果显示在89 k Da处有特异性条带,发酵初始酶活为12.34 U/ml;筛选得到玉米淀粉水解液和玉米浆干粉为培养基最适碳源和氮源,其最适浓度分别为50 g/L和30 g/L。Mn^(2+)、Fe^(3+)、Fe^(2+)和Tween-80的添加能提高发酵产酶活力。在最适初始p H 6.5,以最适5%接种量接种于优化后的培养基中,摇瓶发酵80 h普鲁兰酶的酶活达到414.48 U/ml。[结论]实现了普鲁兰酶突变体在枯草芽孢杆菌中的高效表达,筛选获得的培养基主要原料经济低廉,经过发酵条件优化后,重组菌酶活达到414.48 U/ml,是之前研究结果(20.16U/ml)的20倍。

选择饲料酵母应注意什么

现在我国市场上大体有三种饲料酵母，第一种饲料酵母，生产工艺为深层液体发酵，菌种采用单一酵母菌，培养基为糖蜜、淀粉水解液、淀粉厂、豆制品厂、造纸厂的废液等。这种酵母产品，９０％以上由酵母菌体构成，有酵母特有的香味，蛋白质含量较高，在５５％以上。这种饲料...