铁皮石斛梢枯病病原菌分离鉴定及淀粉酶产色链霉菌代谢产物对其防治效果

梢枯病是浙江省武义县寿仙谷铁皮石斛种植基地一种常见的真菌病害,严重影响铁皮石斛的产量与品质,而鉴定枯梢病的病原菌是有效防治该病害的前提条件。本文通过对铁皮石斛染病组织培养、病原菌分离纯化,柯赫法则验证、形态学观察与基因序列比对分析(Alta1、EF-1α、RPB2、ATP、His 3)等,明确了引起浙产铁皮石斛梢枯病的病原菌为链格孢菌Alternaria alternata。淀粉酶产色链霉菌Streptomyces diastatochromogenes 1628代谢产物对链格孢菌菌丝生长有较强的抑制作用,IC_(50)为0.461%(体积浓度)。田间试验结果表明,在7和14 d的校正防效分别为68.35%和65.97%,均显著高于阳性对照50%多菌灵。本研究明确了铁皮石斛梢枯病病原菌的分类地位,并获得能够有效抑制该病原菌的微生物抑菌物质淀粉酶产色链霉菌代谢产物,为后续浙产铁皮石斛梢枯病的防治提供了实践依据。

7号淀粉酶链霉菌M1033木糖异构酶基因序列分析

测定了来自海南的7号淀粉酶M1033木糖异构酶(Ⅺ)基因的DNA序列。该酶的结构基因由1161bp组成,相当于387个氨基酸残基。其GC含量为72.1克分子％,密码子第三位的GC利用率达98克分子％。在氨基酸序列上,M1033的木糖异构酶与其它放线菌菌株的相比具有较高的同源性;特别是与3种链霉菌菌株的同源性高达90％左右。

冻藏对小麦A链、B链淀粉理化性质及热力学特性的影响

以含水量50%的小麦A链、B链淀粉为原料,利用扫描电镜(SEM)、X-射线衍射(XRD)及差示量热扫描(DSC)研究冻藏处理(-18℃)对其颗粒形态、结晶度、糊化焓、老化度及理化特性的影响,结果表明:经冻藏处理后,小麦A链、B链淀粉颗粒表面有凹槽和裂痕出现;结晶度有增大趋势;糊化热焓分别降低了72.73%、57.22%,老化度分别降低了74%和60.7%;溶解度和黏度分别增大86.8%、196.2%和62.7%、77.3%;蓝值增加了129.3%、96.4%。试验结果可以进一步揭示淀粉在冷冻面制品品质变化中的作用。

淀粉酶产色链霉菌TUST2中ε-聚赖氨酸降解酶的纯化和性质

分离得到产抗菌聚氨基酸ε-聚赖氨酸菌株淀粉酶产色链霉菌TUST2,从中纯化了ε-聚赖氨酸降解酶,并对其性质进行了研究.结果表明,该酶为膜结合蛋白.为提取该降解酶,先收集菌体细胞并用超声波破碎,细胞膜部分用1.0mol/LNaSCN溶液溶解.将粗酶液进行SephadexG100凝胶柱层析分离.用100mmol/L磷酸缓冲液洗脱,收集活性部分.纯化后的样品用SDS-PAGE检测,酶亚基分子量约为54700.酶活力在pH=6.0～9.0间稳定,最适宜pH=7.0.酶的最适温度为30℃,在10～50℃水浴30min酶活力未见明显下降.研究了不同金属离子对酶活力的影响,结果表明,Zn2+,Cu2+和Fe3+可分别提高酶活力29.72%,15.85%和15.08%;但Ag+,Hg2+,Co2+和Mn2+对酶活力有强烈的抑制作用.Ca2+,K+和Ba2+对酶活力没有影响.添加4%Tween-80能提高酶活力10%,但EDTA能强烈抑制酶活力.研究结果表明,此降解酶的性质与白色链霉菌产生的ε-聚赖氨酸降解酶的性质相似.

交联高链磁性淀粉的制备及其结构的研究

以链淀粉含量50%的交联玉米淀粉为原料,采取四种不同的磁化工艺引入磁性粒子,采用扫描电镜观测磁性淀粉颗粒形貌、表面结构及磁性粒子的大小和分布。结果表明,制备磁性淀粉的最佳工艺为氧化磁化法,其形成的磁粒大小和分布均匀,对淀粉形状和结构破坏较小,可形成纳米级(11.16nm^17.86nm)的超顺磁性淀粉。

氨基甲酸酯支链淀粉的制备

以温水浸出法从玉米淀粉提取的支链淀粉为原料,以氯化铜为催化剂,以尿素为酯化剂,制备了氨基甲酸酯支链淀粉。分别测定了氨基甲酸酯支链淀粉及玉米淀粉、支链淀粉的IR光谱、X-衍射光谱、凝沉性、透光率、糊化温度、黏度及黏度热稳定性。试验结果表明:氨基甲酸酯化支链淀粉与支链淀粉和玉米淀粉相比,具有抗凝沉性强、透光率高、糊化温度低、黏度及黏度热稳定性高等特点;氨基甲酸酯支链淀粉与马铃薯淀粉的X-衍射光谱基本相同,晶体结构为B型。

长链脂肪酸淀粉酯合成及应用研究进展

长链脂肪酸淀粉酯是一类具有特殊的热塑性、疏水性、乳化性和可生物降解性的变性淀粉,在食品、纺织、化妆品、医药等行业有着广泛的应用。本文系统地介绍了长链脂肪酸淀粉酯的性质、合成方法和应用领域;分析了各种制备方法的特点,并指出了今后研究方向和发展前景。

不同链淀粉含量玉米微晶淀粉理化性质研究

分别以蜡质玉米淀粉、玉米淀粉及高直链玉米淀粉为原料,在酸醇介质中制备不同水解率微晶淀粉,测定不同微晶淀粉水解性能并研究其颗粒形貌、结晶结构、溶解度及消化性。结果表明:淀粉颗粒内部结构致密性依次减弱,支链淀粉含量高的淀粉较易被试剂进攻;经酸醇处理后,三种微晶淀粉均保留原来晶型,颗粒形态没明显变化,没破碎和膨胀出现,但颗粒表面变粗糙;随直链淀粉含量增加,相似条件(水解率和温度)淀粉溶解度逐渐降低;in-vitro消化体系中三种淀粉及其微晶淀粉消化速度依次降低。

不同链淀粉含量玉米淀粉结构特性及其降解性能的研究

利用Olympus Vanox BHS-2型多功能光学显微镜和Brabande黏度测定仪观察不同链淀粉含量的玉米淀粉的结构及其黏度特性,采用In-Vitro消化模型模拟人体消化道环境和微生物群在半生物体内模型中分解底物的模拟人体消化方法,研究了不同链淀粉含量玉米淀粉降解性能。结果表明,链淀粉含量越高,淀粉颗粒越小,其淀粉颗粒也由近圆形向椭圆形变化,而且不均匀,脐眼越不明显;同等温度下的玉米淀粉黏度越小,获得淀粉糊的难度越大;不同链淀粉含量的玉米淀粉的酶降解规律和生物降解规律一致。玉米淀粉降解性能与其链淀粉含量有关,但不会随着链淀粉含量增加而变得难降解,与链淀粉含量之间没有线性关系。

淀粉链支比对淀粉/琼脂复合膜微结构及性能的影响

采用流延法制得不同配比的淀粉/琼脂复合膜,研究了不同链支比的淀粉对淀粉/琼脂复合膜微结构及性能的影响。对制得的复合膜进行扫描电镜(SEM)观察、傅里叶红外光谱(FTIR)测试、X-射线衍射(XRD)测试、机械性能测试以及亲疏水性能测试,对不同配比淀粉/琼脂复合膜的微结构及性能进行了对比。研究结果表明,琼脂含量一定时,Waxy/琼脂复合膜的断裂伸长率小于另外两种;随着琼脂含量的增加,各复合膜的拉伸强度增加,且G50/琼脂复合膜的水接触角显著增加,而琼脂较弱的亲水性降低了复合膜表面的亲水性。

酶促合成中长链脂肪酸淀粉酯的性质研究

通过对玉米淀粉经中长链脂肪酸酶促酯化改性后的理化性质的分析，考察其性质的变化，阐明其潜在应用价值，为其实际应用提供理论依据。中长链脂肪酸的引入不仅提高了淀粉乳的黏度、凝沉稳定性和冻融稳定性，且获得了良好的乳化性（67％-98％），且乳化效果明显好于明胶（40％）和蔗糖酯（50％），但与单甘脂（75％）相似。与辛烯基琥珀酸淀粉酯和醋酸淀粉酯相比，低取代度中长链脂肪酸淀粉酯的乳化性（92．36％～97．89％）和冻融稳定性（析水率为17％～20％）要优于辛烯基琥珀酸淀粉酯（析水率为47．2％）和醋酸淀粉酯（析水率为68．63％）。因此，酶促合成的中长链脂肪酸淀粉酯可以作为一种新型的、更为安全的乳化剂和冻融稳定剂广泛的应用到食品、医药及化妆品等领域。

淀粉特性粘度与链淀粉含量的关系

本文研究了马铃薯淀粉、链淀粉、支淀粉和链一支淀粉混合物在9∶1二甲亚砜—水溶剂中的特性粘度,并推导出了原淀粉的特性粘度与链淀粉含量的关系表达式。

淀粉酶产色链霉菌1628中toyF基因的克隆与丰加霉素合成相关性

为考察编码腺苷琥珀酸裂解酶toyF基因对淀粉酶产色链霉菌Streptomyces diastatochromogenes 1628合成丰加霉素的影响,本研究设计简并引物,首次克隆获得了菌株1628的toyF基因,并构建了敲除质粒p KC1132-toyF’,通过接合转移转入菌株1628,获得toyF基因缺失株1628-ΔTOYF。结果表明,与原始菌株1628相比,缺失株1628-ΔTOYF中TOYF的酶活和丰加霉素产量分别降低66.7%、87.5%。在缺失株1628-ΔTOYF中回补表达toyF基因构建了重组菌1628-ΔTOYF/toyF。重组菌1628-ΔTOYF/toyF中的TOYF酶活和丰加霉素产量,较缺失株1628-ΔTOYF分别提高了2.7和8.3倍。由此可见,toyF基因是参与菌株1628生物合成丰加霉素的关键酶基因。本文toyF基因的克隆及其功能研究,为克隆完整的丰加霉素生物合成基因簇及其丰加霉素生物合成机制的研究奠定了基础。

甘氨酸对淀粉酶产色链霉菌Cbγ4产ε-聚赖氨酸的影响

为了研究甘氨酸对淀粉酶产色链霉菌Cbγ4产ε-聚赖氨酸的影响,在种子培养阶段添加不同浓度的甘氨酸。结果表明,在种子培养初期添加3 g/L甘氨酸,天冬氨酸激酶活性会明显提高,ε-聚赖氨酸最高可积累0.51g/L,比对照组高27.5%。5L自控式发酵罐发酵ε-聚赖氨酸试验中,种子液中添加甘氨酸组比对照组明显提高了菌体耗糖速度,缩短了达到最高生物量的积累时间,ε-聚赖氨酸产量也提高至12.87g/L,糖酸转化率也比对照组提高了30.6%。因此甘氨酸可作为一种新型营养物质用于ε-聚赖氨酸的生产。

非水相酶法催化长链脂肪酸淀粉酯反应研究进展

长链脂肪酸淀粉酯作为改性淀粉的一种重要类型具有广泛的应用前景。酶作为生物催化剂在非水相中可对淀粉和长链脂肪酸进行酯化,该反应具有底物选择性高、产物专一性强、条件温和、产物可生物降解等优点。本文从酶催化合成反应的机理、酶法催化长链脂肪酸淀粉酯的制备方法、取代度的测定方面进行综述。

菌丝体形态对淀粉酶产色链霉菌CGMCC3145发酵生产ε-聚赖氨酸的影响

采用淀粉酶产色链霉菌CGMCC3145发酵生产ε-聚赖氨酸(ε-PL),考察Mg2+和孢子浓度对菌丝体形态和ε-PL的影响。结果表明,Mg2+可以使菌丝体更好地分散,培养基中添加0.5 g/L Mg2+,ε-PL比对照组提高了30.91%;发酵初始时添加Mg2+对ε-PL的生物合成最有利。当接种1.0×105 cfu/mL孢子悬液时,菌丝球直径为1.0×108 cfu/mL的2.66倍。相反,ε-PL产量、生物量、菌丝球的体积和菌丝球个数/mL与孢子接种浓度呈正相关,当接种1.0×108 cfu/mL孢子悬液时,上述4个指标分别比接种1.0×105 cfu/mL时提高68.2%、58.8%、126.2%和114.9%。

链淀粉含量对抗性淀粉形成影响的研究

本文采用经典碘量法及氯化钙法对通过酶法制备所得的各抗性淀粉（RS）样品进行链淀粉含量测定。测定结果表明普鲁兰酶的作用使样品中链淀粉含量大大提高,为形成高含量抗性淀粉提供基本条件。试验证明,并非链淀粉含量越高,RS含量就越高;RS含量除了与链淀粉含量有关之外,链淀粉分子量大小也是决定因素之一。但链淀粉含量偏低的样品,其RS含量肯定偏低,因为形成酶抗性晶体的主要是直链分子。

磁性交联高链玉米淀粉的制备及性能研究

采用四种磁化工艺制备了不同的磁性淀粉。通过扫描电子显微镜、X-射线衍射仪和古埃(Gouy)磁天平法对磁性淀粉进行了研究。结果表明所有的磁化淀粉中都含有磁性铁化合物,吸附共沉淀法、共沉淀法和包埋法形成的磁性粒子主要为磁赤铁矿(Fe3O4),而氧化磁化法制备的磁性粒子主要为磁铁矿(Fe2O3)。氧化磁化是制备磁性淀粉较好的工艺,磁粒分布和大小均匀,可形成纳米超顺磁性离子(11.16nm^17.86nm)。氧化磁化和吸附共沉淀磁化制备的磁性淀粉磁化率随铁离子加入量的增加快速增加,达到一定后保持稳定,包埋法制备的磁性淀粉磁化率与磁赤铁矿包埋量呈线性关系。

淀粉酶产色链霉菌杀灭钉螺研究

从钉螺孳生土壤中分离得一株放线菌(编号218),经鉴定为淀粉酶产色链霉菌。实验室用摇瓶培养物0.1％浸杀钉螺,48h校正死亡率为96.0％—100.0％;以工业生产菌粉10mg/L浸杀钉螺,48h校正死亡率达98.0％,100mg/L浸泡螺卵,48h孵出率为9.0％。现场用菌粉75mg/L浸泡48h,钉螺校正死亡率为96.9％,试验区植物无枯黄。对鱼类有一定的毒性,但作用缓慢。

淀粉酶链霉菌BAC基因组文库的构建及鉴定

提取淀粉酶链霉菌SM33基因组DNA，用Hind III部分酶解后回收40kh～60kb大小的高分子量DNA，与质粒载体pIndigoBAC536连接，电击转化EP1300感受态细胞，经蓝自斑筛选共挑取了5184个白色克隆。从文库中随机挑选10个克隆，酶切检测平均插入片段约为50kh，覆盖了32．4倍基因组。并且插入片段均具有9～15个Not I酶切位点，符合链霉菌基因组特征。通过对BAC文库的筛选，获得苹果酸脱氢酶基因（mdh）的保守序列，与已知的链霉菌mdh具有很高的相似性。淀粉酶链霉菌BAC基因组文库的建立，对基因克隆、基因组物理图谱、次级代谢途径、新抗生素的发现以及工业用酶的应用等研究均有重要意义。