河南淇河鲫Carassius auratus的生物学

淇河发源于山西省陵川县境内,流经河南省林县、淇县,于小河口村入卫河,全长161.5公里,是海河水系的一条三级支流。淇河盛产鲫鱼,当地俗称淇河鲫。淇河鲫产量很高,为淇河的主要经济鱼类之一,其肉味鲜美,营养丰富,甚为人们所喜爱。我国《诗经(毛诗)》中曾有“藿藿竹竿,以钩于淇”的诗句;古诗中还有“以其食鱼,唯淇之鲫”的记载。中国科学院考古研究所,曾经在淇河南面的辉县流璃阁区的战国时代墓中祭器内,发现鱼骨,其中以鲫骨最多。明嘉靖二十四年,淇县《县志》上册一卷土产鳞族中,专有鲫的记载,据传于万历年间“淇河鲫”被列为贡品。可见“淇河鲫”确系淇县历史上的名贵食用鱼。

水蕹菜浮床覆盖度对淇河鲫的生长及营养品质的影响

为了获得淇河鲫池塘养殖中的最佳水蕹菜浮床覆盖度,试验随机选取360尾淇河鲫,设计水蕹菜浮床覆盖度为0%(C0)、10%(C1)、20%(C2)和30%(C3)4个试验组,每组3个重复,每个重复30尾鱼,饲养90 d后,测定各试验组养殖水质、淇河鲫的生长、常规营养成分和氨基酸含量,并比较其差异。结果显示,水蕹菜浮床覆盖度仅对鱼肉品质中的甘氨酸、缬氨酸和精氨酸有显著性影响(P<0.05),3种氨基酸的最大值基本上在C1试验组,且各试验组间缬氨酸和精氨酸的含量变化与增重率变化一致。此外,与C0相比,C1、C2和C3试验组均含有较高的粗蛋白和灰分含量及较低的粗脂肪含量,其中C1试验组具有最高的粗蛋白含量和最低的粗脂肪含量。结果表明,10%水蕹菜浮床覆盖度最有利于淇河鲫的优良鱼肉品质的形成,过高的覆盖度则起相反作用。

淇河鲫产业现状及对策分析

从淇河鲫(Carassius auratus in Qihe River)的文化背景、生物学特点、野生资源现状、保护区建设、养殖产业发展等方面对淇河鲫的产业发展现状进行了全面阐述,对制约产业发展的主要因素进行了分析,对促进产业健康发展提出了相应对策。

淇河鲫良种选育阶段性总结

淇河鲫又名双背鲫,产于淇河,是河南省独有地方物种。其体高背厚,形椭圆,肉嫩肥美,鱼肉呈蒜瓣状,汤汁奶白,营养丰富,曾作为贡品故名声大噪,驰誉南北。但其科研起步晚,研究不成体系,良种成为产业化发展的瓶颈。2013年开始,团队采用微卫星标记的家系选育和群体选育相结合的办法,同源精子刺激卵核发育,以体质量增重率为选育目标,历经10年时间开展了淇河鲫良种选育工作,其间因试验场遭受两场洪灾,选育试验被迫中断。

5种开口饵料对淇河鲫仔鱼摄食、生长和存活率的影响

本研究采用丰年虫幼体、熟蛋黄、豆浆、商业开口料、脱壳丰年虫卵5种常见的淡水鱼开口饵料对淇河鲫(Carassius auratus)仔鱼进行了25 d的培育试验,探讨不同开口饵料对其开口摄食率、存活率、生长率和形态参数的影响,从而筛选出淇河鲫最理想的开口饵料。研究结果显示:投喂24 h后,蛋黄组的开口摄食率达到100%,其他各组的开口摄食率也都大于88%,各组之间无显著性差异(P>0.05);在0~15 d时,各组存活率呈现出明显的下降趋势,15 d后,各组的存活率基本保持稳定,25 d后,丰年虫幼体组的存活率显著大于蛋黄组和豆浆组(P<0.05);25 d后,丰年虫幼体组的生长效果最好,其体重和体长分别增长了39.10倍和1.65倍,其末体重、末体长、日增体重、日增体长、体重和体长特定生长率均显著高于其他组(P<0.05),其次为蛋黄组,而另外三组表现出较差的生长效果;在形态参数方面,25 d后,丰年虫幼体组的肥满度显著大于其他组(P<0.05),其次为脱壳丰年虫卵组。综上,5种常见开口饵料中,丰年虫幼体是淇河鲫仔鱼最理想的开口饵料。

淇河鲫研究进展与开发策略

对淇河鲫(Carassius auratus in Qihe river)的生物学性状、经济和养殖性状、种质资源等研究进行了总结,概述了淇河鲫资源保护与增殖的主要措施,分析了淇河鲫发展中存在的主要问题,提出了保护和综合开发淇河鲫的建议。

SOST基因在淇河鲫肌间骨骨化过程中的表达研究

为探索硬化蛋白(sclerostin,SOST)基因在淇河鲫肌间骨骨化过程中的调控作用,本研究以淇河鲫仔稚鱼为研究对象,利用整体骨骼染色法对肌间骨的形态发生进行观察,并采用q RT-PCR、Western Blot和免疫组织化学技术检测SOST基因在肌间骨不同骨化阶段的m RNA和蛋白表达变化情况。结果显示,淇河鲫发育至24 dpf(day post fertilization),肌膈中出现纤维束;25 dpf髓弓小骨出现,28 dpf脉弓小骨出现,33 dpf髓弓小骨出现分叉,45 dpf肌间小骨发育完全。SOST基因在肌间骨骨化发生各阶段均有表达,23 dpf的表达量最低(P<0.05),随着肌间小骨的骨化发育,SOST基因呈递增趋势,45 dpf表达量显著高于其他骨化阶段(P<0.05);SOST蛋白在45 dpf时显著高于23和27 dpf(P<0.05),与其他发育阶段无显著差异(P>0.05)。SOST m RNA和蛋白变化趋势基本相同,都在23dpf处于最低,肌间骨全部出现后表达量达到最高,与淇河鲫肌间骨的形态发生趋势一致。因此,推测SOST与淇河鲫肌间骨骨化具有一定的相关性,可调控肌间骨的分化和形成。

淇河鲫与野生鲫形态及染色体差异研究

对淇河鲫和普通野生鲫的传统形态学性状和框架性状进行了统计学比较研究,并对其染色体数量进行了检测。试验结果表明,(1)淇河鲫为三倍体,3n=156±,野生鲫为二倍体,2n=100±。(2)淇河鲫在体高、体厚等方面显著大于野生鲫,符合"双倍鲫"的形态特征,且侧线鳞数也多于野生鲫;而野生鲫在头长、尾高方面占优。(3)淇河鲫相对怀卵量显著高于野生鲫,而相对肠长显著低于野生鲫,这与淇河鲫长期处于人工饲养条件有关。

低氧环境下poly I:C刺激对淇河鲫肝胰脏抗氧化防护的影响

明确低氧环境下poly I:C刺激对淇河鲫抗氧化水平的影响,对于理解低氧环境下鱼类对病原类似物的应激反应及免疫能力具有重要的意义。本实验选择体质量为(23±2)g,体长为(11±1)cm的健康淇河鲫,不同溶解氧含量[(1.0±0.2)、(2.0±0.2)、(4.0±0.2)和(6.0±0.2)mg/L)]下饲养7 d后,实验组每尾鱼腹腔注射2 mg/m L poly I:C 100μL,对照组每尾注射0.75%Na Cl溶液100μL,分别在注射后12、24、48、96和168 h时测定肝胰脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性;分析Cu/ZnSOD、Mn-SOD、CAT和GPx基因的m RNA表达变化,同时检测丙二醛(MDA)含量。结果显示,低氧暴露7 d后,亚低氧水平(DO 4 mg/L)时淇河鲫肝胰脏抗氧化酶活性和m RNA表达量均显著高于正常溶氧组6 mg/L,说明在亚低氧条件下,淇河鲫通过抗氧化酶活性增加,在一定程度上降低了低氧的不利影响。低氧(DO 1和2 mg/L)时,抗氧化酶活性和m RNA表达量均显著低于6 mg/L,显示低氧条件下淇河鲫肝胰脏抗氧化防护能力降低,脂质过氧化产物MDA含量随着溶解氧含量的降低而升高。低氧环境下利用poly I:C刺激鱼体,抗氧化酶活性和m RNA表达量在48、96和168 h时显著低于对照组,显示低氧环境下病原类似物poly I:C刺激进一步加剧了鱼体抗氧化防护能力的下降,从而导致严重的氧化应激胁迫。注射poly I:C后MDA的含量显著高于对照组,说明低氧条件下注射poly I:C加剧了淇河鲫肝胰脏氧化应激程度。研究表明,低氧环境下鱼类抗氧化防护能力下降,产生氧化应激胁迫;低氧环境下病原类似物poly I:C刺激可加剧鱼体抗氧化防护水平的下降,从而减弱对外界病原的防御能力。

淇河鲫与两野生鲫鱼群体遗传多样性的ISSR分析

应用ISSR技术对淇河鲫、金堤河鲫、沁河鲫3个群体进行遗传多样性研究。结果表明:(1)筛选8个引物共得到94个扩增位点,其中多态位点82个,多态位点百分率为87.23%。(2)Popgene分析结果,淇河鲫群体的遗传多样性水平相对较低,PPB=61.70%,H=0.2036,I=0.3085。(3)3个群体间的遗传分化系数GST=0.1303,基因流Nm=3.3359。表明3个群体的遗传分化尚未达到种群的分化水平。(4)金堤河鲫和沁河鲫群体间遗传距离较近,淇河鲫有一定的遗传分化,形成了较稳定的、独立的遗传结构。

淇河鲫IL-8cDNA克隆及组织表达分析

IL-8是最早发现的趋化因子,属于CXC亚家族,与鱼类非特异性免疫水平关系密切。实验采用同源克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)方法,从淇河鲫总RNA反转录产物中获得了641 bp IL-8cDNA序列,其中包含102 bp的5'非编码区,242 bp的3'非编码区和297 bp的开放阅读框。该基因编码由98个氨基酸残基组成的前体蛋白,前22个氨基酸残基为信号肽。肽链中含有4个保守半胱氨酸,前2个半胱氨酸被1个精氨酸分隔,形成CXC结构。第一个半胱氨酸前缺乏ELR基序,其组成是DPR。由氨基酸同源性分析和进化分析可知,淇河鲫IL-8与鲤、鳙、草鱼、鲢等鲤科鱼类的进化关系较近,与鲤IL-8的同源性最高(94%)。通过实时荧光定量PCR检测,淇河鲫IL-8在被检测的8个组织中都有表达,其中在肌肉中的表达量最高,其次为脾脏、头肾和脑等。研究结果对调控淇河鲫非特异性免疫能力,提高淇河鲫健康养殖水平具有一定参考价值。

2种微生态制剂对淇河鲫幼鱼摄食、生长和体成分的影响

试验研究了EM菌及酵母细胞壁多糖对淇河鲫幼鱼生长和体成分的影响。以1200尾淇河鲫幼鱼为试验对象,随机分为4组(A、B、C、D),每组3个重复,每重复100尾试验鱼。A组(对照)、B组(泼洒EM菌1mL/m3)、C组(投喂添加酵母细胞壁多糖4g/kg的饲料)、D组(泼洒EM菌1mL/m3+投喂添加酵母细胞壁多糖4g/kg的饲料),试验期30d。结果显示,与对照组相比,淇河鲫质量增加率分别提高31.22%、101.38%、59.89%,饵料系数分别下降6.78%、14.41%、7.63%;EM菌1 mL/m3组鱼体粗蛋白含量显著提高、粗脂肪含量显著降低(P<0.05);酵母细胞壁多糖4g/kg组鱼体粗灰分含量显著提高(P<0.05);EM菌1mL/m3+酵母细胞壁多糖4g/kg组鱼体粗蛋白含量显著提高(P<0.05);试验组必需氨基酸、鲜味氨基酸、总氨基酸含量均显著高于对照组(P<0.05);EM菌1mL/m3组花生四烯酸、二十二碳六烯酸含量显著高于对照粗(P<0.05),酵母细胞壁多糖4g/kg组和EM菌1mL/m3+酵母细胞壁多糖4g/kg组各种脂肪酸含量与对照组差异不显著(P>0.05)。

硫酸铜和高锰酸钾对淇河鲫仔鱼的急性毒性研究

[目的]研究药物对淇河鲫仔鱼的急性毒性。[方法]在室内常温、静水条件下,以淇河鲫仔鱼为受试生物,以致死率为指标,研究了硫酸铜和高锰酸钾对淇河鲫仔鱼的急性毒性。[结果]:①在同一暴露时间,随着硫酸铜和高锰酸钾溶液浓度的增大,淇河鲫仔鱼的死亡率逐渐上升;②硫酸铜244、8和96 h的半致死浓度(LC50)分别为3.8、2.51、.6 mg/L,安全浓度(SC)为0.16 mg/L;高锰酸钾244、8和96 h的半致死浓度(LC50)分别为5.143、.953、.04 mg/L,安全浓度(SC)为0.304 mg/L;③根据实验结果,建议在淇河鲫仔鱼疾病防治中,硫酸铜和高锰酸钾都应慎用或者适当降低使用浓度。

淇河鲫肌肉生长抑制素基因的克隆与表达

肌肉生长抑制素(MSTN)是动物肌肉发育和生长过程中的负调控因子。为了明确淇河鲫MSTN基因序列及其在肌肉生长发育中的调控功能,本研究利用RACE方法克隆淇河鲫MSTN全长c DNA序列,q RT-PCR分析其在不同组织和胚胎发育阶段的表达情况。结果显示,淇河鲫MSTN c DNA序列全长2094 bp(no.KC851952.1),包含86 bp 5′非编码区、880 bp 3′非编码区和1128 bp开放阅读框,编码375个氨基酸残基,前22个氨基酸残基为信号肽,34~256位氨基酸残基为TGF-β前肽域,281~375是TGF-β结构域,具蛋白酶水解位点RIRR和C端生物活性区的9个保守半胱氨酸残基。蛋白同源分析发现淇河鲫MSTN与鲤形目鱼类相似性较高,与哺乳动物和鸟类的相似性最低。系统进化分析显示,淇河鲫MSTN与鲫、鲤、鳡等鲤科鱼类亲缘关系较近。实时定量PCR分析表明,淇河鲫MSTN基因在各个组织中均有表达,脑中表达量最高,其次为肌肉和肝脏,肠道表达量最低。淇河鲫胚胎发育的各阶段MSTN基因均有表达,受精卵表达量最高,其次为囊胚期,神经胚期表达量最低。推测MSTN与淇河鲫肌肉发育生长具有一定的相关性,可能参与"双背鲫"特征的形成。

淇河鲫肌肉营养成分分析及营养价值评定

测定了10尾淇河鲫的含肉率及其肌肉的常规营养成分和氨基酸组成,并对其营养价值作了综合评定。该鱼含肉65.72%。鱼肉鲜重含蛋白质19.39%,脂肪2.96%。17种氨基酸总量为18.22%,其中7种必需氨基酸量为7.37%。必需氨基酸指数为85.37。氨基酸分和化学分分别为0.56和0.34。

敌百虫和甲醛对淇河鲫仔鱼的急性毒性研究

[目的]研究药物对淇河鲫仔鱼的急性毒性。[方法]在室内常温、静水条件下,以淇河鲫仔鱼为受试生物,以致死率为指标,研究了甲醛和敌百虫对淇河鲫仔鱼的急性毒性。[结果]在同一暴露时间,随着甲醛和敌百虫溶液浓度增大,淇河鲫仔鱼的死亡率逐渐上升。敌百虫24、48、96 h的半致死浓度(LC50)分别为108.63、89.20、75.30 mg/L,安全浓度(SC)为7.53 mg/L;甲醛24、48、96 h的半致死浓度(LC50)分别为165.33、134.04、119.42 mg/L,安全浓度(SC)为11.94 mg/L。[结论]在淇河鲫仔鱼疾病防治中,使用敌百虫较安全,而甲醛要慎用。

淇河鲫生长激素基因的克隆与原核表达

【目的】克隆、分析淇河鲫生长激素(Growth hormone,GH)基因,并进行原核表达。【方法】采用RT-PCR方法对淇河鲫GH基因cDNA进行克隆,对其序列进行分析,并构建其原核表达载体PQE30-GH,进行原核表达。【结果】淇河鲫GH基因长633 bp,与鲫鱼、鲤鱼、团头鲂和斑马鱼具有较高的同源性,且处于同一进化分支上;与胡子鲇、鳗鲡、家鼠和人等的同源性较低。构建的表达载体PQE30-GH含有GH基因完整的阅读框架(ORF),转化到大肠杆菌DH5α中,经终浓度0.1 mol/L IPTG诱导后成功地表达出24 ku的融合蛋白。【结论】淇河鲫GH基因克隆成功。淇河鲫GH基因可以在原核中诱导表达,但表达量较低。

淇河鲫雌核发育克隆系鉴定与性状分析

淇河鲫(Carassius auratus)为河南省的传统优质特色水产品种之一,是我国著名的鲫地方品种。本研究利用15个微卫星标记从85尾淇河鲫样品中共鉴定出21个克隆系,在其中6个克隆系中检测到18尾雄性个体。结果表明:淇河鲫是两性型雌核发育三倍体,遗传多样性水平较高。多元统计分析显示:体高、体宽、背鳍基长等3个性状对体质量的影响达到了极显著的水平(P<0.01),这一结果与体高背厚的淇河鲫种质较优异的生产经验一致。本研究结果提示:可以借鉴两性型雌核发育方正银鲫育种成功经验来开展淇河鲫品种的选育,在选育过程中应关注淇河鲫体高背厚的形态特点。

淇河鲫不同器官组织中抗氧化酶活性和丙二醛含量的比较

通过测定淇河鲫不同器官组织(肝胰脏、肾脏、脾脏、鳃和肌肉)超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量,并进行比较分析,以了解淇河鲫不同器官组织的抗氧化防护能力。结果显示,淇河鲫不同器官组织抗氧化酶活性不同。不同组织器官超氧化物歧化酶的活性为:肝胰脏>肾脏>肌肉>鳃>脾脏,不同器官组织间存在显著性差异(P<0.05);过氧化氢酶活性为:肝胰脏>肾脏>鳃>肌肉>脾脏,不同器官组织间差异显著(P<0.05);谷胱甘肽过氧化物酶活性为:肝胰脏>肾脏>鳃>肌肉>脾脏,差异显著(P<0.05);丙二醛含量测定值为:肝胰脏>肾脏>鳃>肌肉>脾脏,肌肉和脾脏间无统计学差异(P>0.05),其他器官组织间具有显著性差异(P<0.05)。淇河鲫肝胰脏和肾脏的丙二醛含量较高,而抗氧化酶活性也相应较高;脾脏丙二醛含量较低,而抗氧化酶活性也较低,说明丙二醛积累可诱导抗氧化酶活性增加。鱼类不同器官组织抗氧化酶活性和丙二醛含量存在组织特异性,可能与器官组织执行的生理功能和代谢水平不同有关。

黄霉素对淇河鲫生长性能、体成分和消化酶活性的影响

为了确定淇河鲫饲料中黄霉素的适宜添加量,以不添加黄霉素为对照,研究了饲料中添加2,4,6和8mg/kg黄霉素对淇河鲫生长性能、体成分和消化酶活性的影响。结果表明,饲料中添加黄霉素组淇河鲫的生物学综合评价高于对照组;添加4和6 mg/kg黄霉素处理组的饲料系数显著高于对照组(P<0.05);全鱼水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量在各处理组和对照组间差异不显著(P>0.05);各处理组血清中葡萄糖和甘油三酯含量高于对照组;4,6和8 mg/kg黄霉素添加组血清游离脂肪酸含量显著高于对照组(P<0.05);4 mg/kg黄霉素添加组胰蛋白酶活性显著高于对照组和8 mg/kg黄霉素添加组(P<0.05),4和6 mg/kg黄霉素添加组肠蛋白酶活性显著高于对照组(P<0.05);2,4和6 mg/kg黄霉素添加组胰淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05),4 mg/kg黄霉素添加组肠淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05);各黄霉素添加组胰脂肪酶和肠脂肪酶酶活性高于对照组,其中6 mg/kg添加组与对照组相比差异显著(P<0.05)。结果提示,饲料中添加适量黄霉素能促进淇河鲫生长,提高淇河鲫消化酶活性,但不影响鱼体营养成分,其中以添加4 mg/kg黄霉素效果最佳。