激活骨髓和淋巴因子激活的杀伤细胞生物活性的实验研究

目的 :证实激活骨髓 (Activated bone marrow,ABM)具有与淋巴因子激活的杀伤 (LAK)细胞不同的生物学效应。方法 :应用重组白细胞介素 - 2 (r IL - 2 )、抗 CD3 单抗体外激活骨髓和外周血单个核细胞 ,以 MTT比色分析法测定 ABM、L AK细胞的杀伤活性 ,采用甲基纤维素半固体培养法进行粒 -巨噬细胞系祖细胞 (CFU- GM)、红系祖细胞 (BFU- E)培养。结果 :r IL- 2 +抗 CD3 单抗激活的 ABM组杀伤活性最强 (6 5 .8± 9.2 ) % ,r IL - 2激活的 ABM组次之为 (5 6 .3± 7.9) % ,活性强于相同条件下的 L AK组 ,两组差异具有显著性 (P<0 .0 1)。增殖倍数与相同条件下的 LAK细胞相比差异亦具有显著性。体外激活 3～ 5 d的 ABM与同期培养的未激活的骨髓细胞相比 BFU- E、CFU- GM形成率差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,LAK细胞则不具有造血祖细胞活性。结论 :ABM的杀伤活性和增殖效应明显强于 L AK细胞 ,且能保持造血祖细胞活性 ,抗 CD3 单抗能够促进 r IL - 2诱导的 ABM抗肿瘤活性和增殖效应 ,不损伤造血祖细胞活性 ,是优于 LAK细胞的过继免疫疗法。

脐血来源淋巴因子激活的杀伤细胞对人卵巢癌裸鼠移植瘤治疗的实验研究

目的研究脐血来源的淋巴因子激活的杀伤细胞用于卵巢癌的过继免疫治疗的可行性。方法用脐血来源的淋巴因子激活的杀伤细胞对人卵巢癌裸鼠移植瘤进行治疗,并与外周血来源淋巴因子激活的杀伤细胞相对照。结果脐血来源的淋巴因子激活的杀伤细胞有明显的抑瘤作用,治疗23 d裸鼠瘤体体积为6.0 mm3,治疗后瘤体质量为(0.674±0.45)g,无明显移植物抗宿主病的发生。结论脐血可作为过继免疫治疗中效应细胞来源用于卵巢癌的治疗。

脐血淋巴因子激活的杀伤细胞杀瘤活性的研究

目的研究脐血来源的淋巴因子激活的杀伤细胞用于过继免疫治疗的可行性。方法从脐血中分离出单个核细胞,用IL-2刺激扩增;用FCM检测表型变化,MTT比色法检测其对SKOV6及K562细胞的杀伤活性,并与用同样方法所得外周血来源的淋巴因子激活的杀伤细胞相对照。结果脐血来源的淋巴因子激活的杀伤细胞有明显的抑瘤作用。结论脐血可作为过继免疫治疗中效应细胞来源用于癌症的治疗。

树突状细胞诱导的淋巴因子激活的杀伤细胞对肺癌细胞系A549的体外杀伤作用

目的:探讨负载肺癌抗原的树突状细胞(dendritic cells,DC)诱导淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞对肺癌细胞A549的杀伤作用。方法:采用肺癌患者外周血单个核细胞(PBMC)经rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-a诱导和肿瘤冻融抗原刺激诱导获得的DC与LAK细胞按1:20比例共培养2d,获得Ag-DC-LAK细胞作效应细胞,分别用Ag-Dc-LAK、DC-LAK、Ag-LAK和LAK对肺癌细胞系A549细胞进行杀伤实验。结果:以30μg/mL蛋白的肿瘤抗原负载的DC其表型CD1a、CD80、CD86、HLA-DR均显著升高(P<0.05),高于单纯细胞因子诱导成熟的DCs表型,由其刺激增殖的LAK细胞对肺癌细胞A549杀伤率为(71±5)%,明显高于对照组(P<0.05)。结论:经肿瘤抗原刺激诱导成熟的DC可有效传递抗原,增加T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。

NK与淋巴因子激活的NK细胞的抗肿瘤作用与杀伤机制研究

1.淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞因其对肿瘤的广谱杀伤作用而受到广泛重视,临床用于晚期肿瘤继承性免疫治疗获得一定疗效。为提高该疗法的疗效,本项目研究了淋巴细胞在用淋巴因子白细胞介素2(IL2)激活前后,具有抗肿瘤活性的效应细胞。为证明采用较纯的效应细胞可提高肿瘤继承性免疫的疗效提供了实验依据。(1)通过研究课题“自然杀伤(NK)细胞抗大鼠实验性肿瘤肺转移疗效的观察”证实,将部分提纯之NK细胞输入大鼠体内,同时注入粗制IL2。

用淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）治疗晚期癌肿

用淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）治疗晚期癌肿宋明志，王仁福上海医科大学附属肿瘤医院中医科（２０００３２）采用淋巴因子激活杀伤（ＬＡＫ）细胞对各种肿瘤患者进行过继性免疫治疗已有报道。目前临床常采用患者自身外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）经ＩＬ－２诱导而成ＬＡ...

丁酸钠抑制淋巴因子激活杀伤细胞杀瘤活性的研究

目的:探讨低浓度丁酸钠(sodiumbutyrate)对人结肠腺癌细胞SW1116表面细胞间黏附分子1(ICAM1)和癌胚抗原(CEA)表达的影响及其对淋巴因子激活杀伤(LAK)细胞杀伤活性的改变。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测经不同浓度丁酸钠处理4天后SW1116在不同效/靶比下对LAK细胞杀伤敏感性的改变,流式细胞术和免疫荧光法定量和定性检测丁酸钠对ICAM1和CEA表达的影响。结果:MTT显示,经0.5、1和2mmol/L丁酸钠处理后,细胞对LAK细胞杀伤敏感性从74.6%下降至15.9%(效/靶为20),且在一定程度上有浓度依赖性,当效/靶为10时亦呈类似变化,与之对应的ICAM1阳性细胞数从92.2%下降至7.6%,而CEA阳性细胞数从1.2%上升至16.6%,荧光显微镜下与流式细胞术的改变相一致。结论:丁酸钠减弱LAK细胞对人结肠癌细胞SW1116的杀伤,这种作用可能与其降低ICAM1同时增加CEA的表达,从而改变效/靶细胞的结合有关。

淋巴因子激活杀伤细胞的临床应用

淋巴因子激活杀伤细胞的临床应用中山医科大学孙逸仙纪念医院内科张惠宜，曾宪平目前，肿瘤的生物治疗包括以下四个方面：①细胞因子过继治疗：临床应用的主要有白细胞介素、干扰素（ＩＦＮ）、克隆刺激因子及肿瘤坏死因子（ＴＮ－Ｆ）等。②肿瘤杀伤细胞过继治疗：自然杀...

锂对淋巴因子激活的杀伤细胞功能的影响

1992年Wu等报道了锂可以增强LAK细胞的杀伤活性及基本体内的抗肿瘤增长作用,并提出了锂可能成为一种新的免疫调节剂的设想,我们在实验中也证实了Wu的上述结论。为了进一步控讨锂的作用机理,我们又做了某些免疫学参数的检测。本文报道锂对淋巴因子激活杀伤细胞ConA刺激反应的影响。

党参多糖对人胚、小鼠脾细胞增殖及体外淋巴因子激活的杀伤细胞活性的诱导作用

本研究观察了党参多糖对人胚胎及小鼠脾淋巴细胞增殖及体外淋巴因子激活的杀伤细胞(简称 LAK 细胞)活性诱导的作用,其在体外可促进有丝分裂素诱导的人胎脾及鼠脾淋巴细胞增殖,作用分别以500μg/ml 及250μg/ml 浓度为最强,也可与白细胞介素2(简称 IL-2)协同诱导人胎脾及鼠脾 LAK 活性,作用以1000μg/ml 为佳。结果提示,党参多糖对两种不同来源的脾细胞由丝裂原诱导的体外淋巴细胞转化及 IL-2诱导的 LAK活性均有促进作用。

克隆化人淋巴因子激活的杀伤细胞治疗晚期肺癌的临床疗效初探

自体LAK细胞和rhIL-2联台应用于化疗失败或不能耐受的晚期实体瘤病人，已取得了确切的疗效，但由于取血量大及大剂量应用IL-2的严重副反应，致使其应用受限，治疗中的死亡率高，而克隆化LAK细胞具有增殖力强，体外存活期长和长时间保存有效杀瘤活性的特点。我们自1991年开始应用军医科院采用半固体-液体两步法培养的克隆化自体LAK细胞治疗15例晚期肺癌病人，

粘附性淋巴因子激活杀伤细胞对肺癌治疗的实验研究

为探索高效的淋巴因子激活杀伤细胞(LAK细胞)的过继免疫疗法，作者参考国外经验．分离培养出一种粘附性淋巴因子激活杀伤细胞(A-LAK细胞)，观察其体外，体内的抗瘤作用，并与普通LAK细胞进行了比较。

淋巴因子激活的杀伤细胞输治肿瘤观察与护理

淋巴因子激活的杀伤细胞输治肿瘤观察与护理李玉珍，郑秀兰１临床资料我科于１９９３年～１９９４年１０月对８例癌症患者给予淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）输注治疗，年龄从５１岁至７８岁。其中肝癌３例，肺癌２例，食道癌转移肺癌１例，胃癌１例，肾癌转移肺癌...

索拉菲尼联合细胞因子活化的杀伤细胞对肝癌的杀伤效应研究

目的探讨索拉菲尼联合细胞因子活化的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)对肝癌细胞的体外杀伤效应。方法取健康人外周血单个核细胞,经IFN-γ、IL-1、IL-2和抗CD3单抗诱导CIK细胞成熟,流式细胞仪检测培养第1、7、14天的CIK细胞表型。Cell Counting Kit-8试剂盒(CCK-8)检测索拉菲尼、CIK细胞及两者联合对肝癌细胞BEL-7402的体外杀伤效应,并用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测肝癌细胞的凋亡率。结果CIK细胞经多种细胞因子诱导培养后,CD3+CD56+细胞比例明显上升,14d时CD3+CD56+细胞比例达(46.83±2.53)%,与第1天比差异有显著性(P<0.01),细胞量扩增了近1000倍。索拉菲尼和CIK细胞在适当浓度及效靶比联合应用时表现出杀伤活性增强(P<0.01)。索拉菲尼联合CIK细胞诱导的肝癌细胞BEL-7402凋亡率达(70.56±2.58)%,明显高于索拉菲尼组(45.38±1.76)%和CIK组(52.18±8.63)%(P<0.05)。结论索拉菲尼与细胞因子活化杀伤细胞疗法联合应用能明显增强对肝癌细胞的体外杀伤效应。

淋巴因子激活的杀伤细胞对有丝分裂期细胞的杀伤作用

为提高淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）临床应用的疗效，采用抗肿瘤化疗药物长春新碱诱导人肺腺癌细胞Ａｎｉｐ９７３进入有丝分裂期，研究ＬＡＫ细胞对有丝分裂期肿瘤细胞的杀伤作用。结果表明，肿瘤细胞进入有丝分裂期后，形态上发生明显的变化，ＬＡＫ铎有丝分裂期肿瘤细胞的杀伤作用明显增高，电镜下，ＬＡＫ细胞与与有丝分裂期肿瘤细胞以绒毛相接触，呈犬牙交错状，靶细胞死亡形式是溶解坏死和凋亡。

MAGE-1相关肽抗原致敏DC活化的淋巴细胞对HCC细胞的体外杀伤作用

目的观察MAGE-1九肽致敏树突状细胞(DC)活化的淋巴细胞对HCC细胞的体外杀伤作用,确定MAGE-1九肽负载DC作为HCC疫苗的可能性。方法用MAGE-1九肽负载DC并活化T淋巴细胞,以不同效靶细胞的比例对正常肝细胞、黑色素瘤细胞、HCC细胞进行杀伤实验,3H掺入法测定杀伤率。结果用MAGE-1九肽负载DC并活化T淋巴细胞对黑色素瘤细胞及HCC细胞均有明显杀伤作用,而对正常肝细胞无杀伤作用;无关抗原负载的DC所活化的淋巴细胞对三种细胞均无杀伤作用;无抗原负载的DC其活化淋巴细胞对靶细胞亦无杀伤作用。结论MAGE-1九肽致敏DC活化淋巴细胞对HCC细胞有明显杀伤作用,MAGE-1基因可作为免疫治疗HCC的攻击靶点,MAGE-1九肽与DC联合可成为免疫治疗HCC的疫苗。

晚期肿瘤99例淋巴因子活性细胞培养分析

目的:探讨提高淋巴因子活性细胞(LAK细胞)单个细胞和总体的抗瘤活性。方法:对99例晚期肿瘤患者进行自体LAK细胞培养,取患者抗凝(肝素)外周血,加入淋巴细胞分层液离心,取得外周血单个核细胞,然后按一定的标准放于37℃、5%CO2环境中培养、扩增、回输。结果:分析得出白细胞介素2、CD3单抗、红细胞、植物凝血素可促进LAK细胞增殖及提高其活性。适当的化疗对LAK细胞的培养无明显影响。结论:LAK细胞回输的最佳时间是7～15d。