ECM重塑下肿瘤淋巴管生成模型的定性分析与数值模拟

肿瘤转移是肿瘤发展过程中的重要环节,也是导致癌症恶化和治疗失败的主要原因之一。以肿瘤转移为背景,本文研究基于肿瘤与细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM)相互作用的肿瘤淋巴管生成模型。首先用数学语言梳理肿瘤淋巴管生成的生物原理,其次做出假设,建立数学模型并进行定性分析。主要通过逼近方法、偏微分方程定性理论和Banach不动点定理证明模型局部解的存在唯一性,以及借助局部解的正则性估计和嵌入不等式证明模型整体解的存在唯一性。最后利用差分数值方法进行数值模拟来说明模型的可靠性与准确性。本文对深入理解肿瘤转移机制、指导癌症治疗以及推动相关研究具有重要意义。

卵巢癌组织中TTF-1、CyclinD1的表达及其与淋巴管生成关系的研究

目的探讨甲状腺转录因子1(TTF-1)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)在卵巢癌组织中的表达情况,分析其与淋巴管生成的关系。方法收集60例卵巢癌组织样本和20例经病理检查证实的正常卵巢组织。制备组织切片进行TTF-1、CyclinD1和D2-40免疫组织化学(免疫组化)染色,基于半定量积分法评价TTF-1、CyclinD1染色结果。依据Weidner评价方法评估D2-40染色结果,计算淋巴管密度(LVD)。结果TTF-1和CyclinD1的阳性表达率在卵巢癌组织中分别为58%和83%,均高于其在正常卵巢组织中的5%和10%(P均<0.001)。病理分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移阳性、腹膜转移阳性、T3~T4期、N1期和M1期的卵巢癌组织中TTF-1及CyclinD1的阳性表达率较高(P均<0.05);患者年龄、组织学类型与卵巢癌组织中TTF-1及CyclinD1的阳性表达率无关(P均>0.05)。病理分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移阳性、腹膜转移阳性的卵巢癌组织LVD较高(P均<0.05)。卵巢癌组织中TTF-1、CyclinD1阳性表达者的LVD均高于阴性表达者(P均<0.05)。结论TTF-1与CyclinD1在卵巢癌组织中呈现高表达。卵巢癌病情较重、出现淋巴管生成和转移者的TTF-1和CyclinD1表达较高。TTF-1和CyclinD1可作为卵巢癌干预的潜在新靶点。

结肠癌相关性调节性B细胞介导淋巴管生成的体外研究

目的:通过共培养模型,验证结肠癌相关性Breg细胞促进淋巴管生成的作用及相关机制。方法:利用结肠癌细胞CT26及MC38与B细胞构建共培养模型,诱导结肠癌相关性Breg细胞,流式细胞术鉴定CD19+IL-10+Breg细胞比例。ELISA法检测结肠癌相关性Breg细胞条件培养基中VEGF-A、VEGF-C和VEGF-D的分泌水平。利用划痕实验及管腔形成实验检测Breg条件培养基干预后淋巴结内皮细胞SVEC4-10的迁移及管腔形成能力。结果:与24 h共培养体系相比,Breg^(CT26)诱导组[(4.90±0.05)%vs.(27.63±1.12)%]和Breg^(MC38)诱导组[(5.85±0.86)%vs.(24.27±2.27)%]在48 h共培养体系中能诱导更多的Breg细胞,且结肠癌相关性Breg诱导组VEGF-A和VEGF-C的表达水平与空白组相比显著增加(P<0.05)。管腔形成实验及划痕实验结果表明,结肠癌相关性Breg细胞能增强SVEC4-10的成管和迁移能力。结论:在肿瘤微环境中,结肠癌细胞通过诱导B细胞向Breg细胞转化,上调VEGF-A和VEGF-C分泌水平,增强SVEC4-10的成管和迁移能力,从而促进肿瘤淋巴管生成。

促心脏淋巴管生成与基于抗心肌纤维化治疗心血管疾病研究进展

淋巴管是一种低压、盲端管状结构,在维持组织液体稳态、免疫细胞运输以及膳食脂质摄取和运输中发挥着重要作用,并参与免疫反应。淋巴管生成的抑制参与了缺血性损伤或压力超负荷后的心脏水肿和心脏重构。新的研究表明,促进淋巴管的生长、重塑和功能发挥可以在一些病理生理条件下减少炎症和减轻疾病严重程度。因此,促进淋巴管生成在心血管疾病中可能成为一种很有前途的治疗方法。当淋巴管重塑不足或适应不良时,它会导致淋巴运输功能障碍,导致慢性间质水肿和炎症,从而触发间质纤维化的发展。本文主要综述了心脏淋巴管在心血管疾病中的作用,介绍了心脏淋巴转运不良与心肌纤维化的相关性以及淋巴管生成在心血管疾病中的潜在益处。以期为心血管疾病的诊治提供新的思路和靶点。

淋巴管生成的调节及其在心肌梗死中的作用研究进展

淋巴管系统调节组织液内稳态、脂质代谢、免疫功能,在体内发挥着重要作用。心肌梗死后,增强淋巴管生成可加快清除浸润的免疫细胞,减少促炎细胞因子的生成,减少水肿、炎症和纤维化,促进受损心脏功能恢复。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)-C及血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)-3是淋巴管生成通路的组成部分,在心脏损伤后维持组织液平衡和心肌功能方面具有至关重要的作用。淋巴管与免疫系统之间密切相关,不同的免疫细胞群对淋巴重塑产生刺激或抑制作用。巨噬细胞是广泛分布在器官和组织中的先天免疫细胞,在器官发育、宿主防御、急性和慢性炎症、组织稳态和重塑等多种生理和病理过程中发挥着重要作用。还需要确定淋巴管生成的更多机制,为临床刺激淋巴管生成治疗心脏疾病提供有效的靶点。本文综述了心肌梗死后心脏及淋巴管基本的病理变化、淋巴管生成的调控因素以及巨噬细胞对淋巴管生成的影响。

抑制肿瘤血管淋巴管生成的VEGFR分子机制及调控的研究进展

血管内皮生长因子受体(VEGFR)是靶向于血管与淋巴管生成的重要的信号分子,是人们研究抑制肿瘤药物的关键作用点,调控肿瘤新生淋巴管上的VEGFR可作为多种类型肿瘤的治疗靶点。由于作用于肿瘤新生淋巴管上的VEGFR的调控机制较为复杂,对抑制淋巴管生成的药物和肿瘤细胞转移之间复杂的相互作用关系了解甚少,为此,本文从血管内皮生长因子(VEGF)及VEGFR、肿瘤淋巴管生成及其调控因子、VEGF家族及其受体为靶点的淋巴管生成的调控、VEGFR为靶点的淋巴管抑制药物四个方面综述抑制肿瘤血管淋巴管生成的VEGFR分子机制及调控的研究进展,探讨肿瘤淋巴管生成中VEGF家族及其受体作用靶点的分子水平上的形成机制,探索可阻断相应作用靶点的理想型药物,为临床更好的治疗肿瘤提供思路。

益气活血解毒方抑制UUO大鼠肺脏淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化

目的研究益气活血解毒方抑制梗阻性肾病大鼠肺脏淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化的作用。方法选用雄性Wistar大鼠80只,随机分为假手术组(Sham)、单侧输尿管结扎组(UUO)、依普利酮治疗组(EPL)和中药治疗组(TCM),每组20只。采用结扎左侧输尿管复制梗阻性肾病大鼠模型。术后给予含药饲料(依普利酮100 mg·kg^(-1)·d^(-1)、益气活血解毒方免煎颗粒1.92 g·kg^(-1)·d^(-1))。180天后摘取大鼠肺脏。HE及天狼星红染色观察肺组织病理,Western blot、免疫组化及免疫荧光染色法检测淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)、血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)、血管内皮生成因子-C(VEGF-C)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、I型胶原蛋白(Collagen I)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB)、血清糖皮质激素诱导蛋白激酶-1(SGK-1)以及盐皮质激素受体(MR)等指标表达情况。结果UUO大鼠肺脏呈现明显的纤维化改变,胶原沉积明显增多,伴有淋巴管增多及大量炎性细胞浸润,α-SMA、Vimentin、LYVE-1、VEGFR3、VEGF-C、IL-1β、MCP-1、TNF-α、NF-κB、p-SGK-1、MR及CollagenⅠ表达增强(P<0.05)。益气活血解毒方治疗后纤维化程度、淋巴管生成及炎症损伤等均明显减轻。结论益气活血解毒方可通过调控MR/NF-κB/VEGF-C通路,抑制肺淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化,减轻梗阻性肾病诱导的肺脏纤维化。

LYVE-1在肿瘤淋巴管生成领域的研究

淋巴管生成可能是肿瘤转移有效的途径之一,但淋巴管生成的基本生理学知识明显落后于血管生成,主要归于缺乏鉴别淋巴管的特异性标志物。最近,随着淋巴管内皮透明质酸受体-1(lymphatic vessel endothelial HA receptor-1,LYVE-1)作为淋巴管内皮标志物被发现,正开辟淋巴管生成、肿瘤淋巴转移研究的新领域。

乳腺癌淋巴管生成与肿瘤转移的关系

目的:探讨乳腺癌肿瘤淋巴管生成与肿瘤转移的关系。方法:免疫组织化学SP法进行VEGFR-3染色标记89例原发性乳腺癌肿瘤淋巴管。结果:所有病例均有不同程度淋巴管生成,但以肿瘤间质组织中淋巴管生成为主,癌巢中未见明显的成形淋巴管。肿瘤淋巴管密度与乳腺癌临床分期和腋淋巴结转移呈正相关,临床分期越晚,肿瘤淋巴管密度越高(P<0.05);腋淋巴结转移组的肿瘤淋巴管密度比无淋巴结转移组高(P<0.05)。结论:乳腺癌淋巴管密度与腋淋巴结转移呈正相关,淋巴管生成主要发生在肿瘤间质组织中。

COX-2在胃癌中的表达及其与淋巴管生成的关系

目的: 研究环氧化酶 2(cyclooxygenase -2,COX -2)在胃癌中的表达及其与胃癌淋巴管生成的关系。方法:采用免疫组织化学SABC法检测胃癌组织中COX 2的表达及肿瘤内淋巴管密度 (LVD)。结果:胃癌组织中COX- 2表达显著高于癌旁组织 (P<0.05),与淋巴结转移呈正相关 (P<0.01)。淋巴管密度与COX 2表达 (P<0.01)和淋巴结转移 (P<0.01)呈正相关。结论:COX-2表达可能和胃癌的发生、淋巴管生成及淋巴结转移有关。

应用免疫组化双标技术研究大肠癌淋巴管生成的特点

目的研究大肠癌淋巴管生成的特点及意义。方法采用淋巴管特异标记podop lan in对96例大肠癌及其相应正常组织进行免疫组化染色,检测其微淋巴管密度(MLD),以CD34标记血管检测微血管密度(MVD)作为对比,以及分别与K i-67进行双标免疫组化染色检测淋巴管/血管增殖活性。结果肿瘤不同区域的淋巴管密度、增殖活性和形态具有明显的异质性,肿瘤边缘区淋巴管密度及增殖活性较其他区域显著地增高(P<0.01),且管腔多呈扩张状,同时肿瘤边缘区淋巴管密度及K i-67指数也较正常大肠组织显著地增高(P<0.01)。结论大肠癌组织存在新生淋巴管,尤以癌组织边缘区明显。

人食管鳞癌组织中血管内皮生长因子C及其受体3和淋巴管生成检测

目的:探讨人食管鳞癌组织中血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其受体3(VEGFR3)的表达及其在淋巴管生成与淋巴结转移中的意义。方法:对59例食管鳞癌标本(Ⅰ级22例、Ⅱ级20例、Ⅲ级17例,47例伴有淋巴结转移),采用免疫组织化学SP法检测VEGF -C及VEGFR3的表达,并应用图像分析方法测定淋巴管密度(LVD)及其积分光密度值(IOD)。结果:VEGF C及VEGFR3表达与肿瘤淋巴结转移相关(P<0.05),而与患者性别和病理学分级无关(P>0.05);人食管鳞癌组织中VEGF- C及VEGFR3的表达有相关关系(P<0.05);癌组织和癌周组织中LVD和IOD与淋巴结转移相关(P<0.01)。结论:食管鳞癌组织中VEGF- C和VEGFR3表达与淋巴结转移、新生淋巴管的形成密切相关,在肿瘤转移方面具有重要作用。

膀胱移行细胞癌环氧化酶2表达与淋巴管和血管生成的关系

【目的】探讨环氧化酶2(COX-2)在膀胱移行细胞癌的表达与微血管、淋巴管生成的关系及其预后意义。【方法】应用免疫组化方法检测81例膀胱移行细胞癌组织中COX-2的表达,同时应用CD34、D2-40分别显色微血管和淋巴管进行微血管和淋巴管计数。并分析其与肿瘤临床病理特征和预后的关系。【结果】COX-2表达阳性率为67.9%。COX-2表达与肿瘤分级呈正相关关系(P=0.016),COX-2表达阳性组MVD和瘤内淋巴管(ITLVD)阳性的比例较阴性组高,两组差异有统计学意义(P=0.046,P=0.030)。瘤内淋巴管阳性与肿瘤分级(P=0.001)和分期(P<0.001)明显相关,瘤旁淋巴管(PTLVD)表达与肿瘤分期(P=0.003)呈正相关。Kaplan-Meier分析表明MVD和瘤内、瘤旁淋巴管阳性对疾病特异性生存有明显的影响(P<0.001,P=0.024和P=0.004),COX-2和瘤内淋巴管阳性者无瘤生存时间较短(P=0.013,P=0.001)。多因素分析表明COX-2表达是膀胱移行细胞癌病人无瘤生存独立的预后因素。【结论】COX-2可能参与膀胱移行细胞癌的发生并促进血管及淋巴管生成,影响肿瘤的复发、进展和预后。

胃癌中幽门螺杆菌L型感染和淋巴管生成因子与淋巴结转移的关系

目的研究胃癌组织中血管内皮生长因子-C、-D、-A(VEGF-C、-D、-A)及成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)的表达和幽门螺杆菌L型(helicobacter pylori L-form,Hp-L型)感染与淋巴结转移的关系。方法应用革兰染色和免疫组化SP法检测112例胃癌组织和30例对照组中的Hp-L型感染情况,同时免疫组化SP法检测上述组织中VEGF-C、-D、-A及FGF-2的表达情况及D2-40标记的微淋巴管密度值(LVD值),分析Hp-L型和淋巴管生成因子表达的关系及与LVD值的关系。结果胃癌组织中革兰染色Hp-L型检出率为65%,免疫组化Hp-L型抗原表达率为62%。胃癌组的Hp-L型阳性率、淋巴管生成因子阳性率及LVD值均高于对照组(均P<0.01);胃癌组中Hp-L阳性组的LVD值和VEGF-C、-D的表达阳性率均高于Hp-L阴性组(均P<0.05);VEGF-C、-D阳性组的LVD值高于阴性组(均P<0.05)。多因素分析发现,TNM分期和LVD值与胃癌淋巴结转移密切相关(均P<0.05)。结论 Hp-L型感染和淋巴管生成因子与胃癌的发生、发展相关,VEGF-C、-D与胃癌淋巴管生成关系密切,Hp-L型感染在肿瘤淋巴管生成和淋巴结转移方面具有一定作用,两方面因素共同促进胃癌的侵袭和转移。

D2-40在宫颈癌淋巴管生成、淋巴管浸润中的临床意义

浸润和转移是恶性肿瘤的重要生物学特性．也是肿瘤难以根治的主要原因。淋巴结转移是官颈癌转移的主要途径之一．其与预后相关性高于原发灶的直接浸润，已成为宫颈癌预后的重要预测指标。近年来，随着淋巴管内皮细胞的特异标记分子的发现，使我们加深了对肿瘤微淋巴管的了解^[1-2]。

血管及淋巴管生成相关基因表达与肿瘤转移率和转移途径的比较分析

目的：研究促进血管及淋巴管生成因子——血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）-A、-C、-D表达水平与肿瘤转移率及转移途径的关系，探讨其在肿瘤转移方面所起的作用，以及是否可作为判断肿瘤转移和预后的指标。方法：建立2种小鼠和4种人的肿瘤动物模型，观察肺、肝及腹股沟、腋下、髂血管和腹主动脉旁淋巴结大小及肿瘤转移情况。实时荧光定量．PCR（real—time fluorogentic quantitative PCR，RFQ—PCR）检测体外培养的肿瘤细胞及小鼠体内生长的肿瘤组织内VEGF—A、-C、-D及血管内皮生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR）-2、-3和淋巴管内皮细胞标志物——淋巴内皮细胞透明质酸受体-1（lymphatic vessel endothelial HA receptor—1，LYVE—1）的表达水平。结果：2种小鼠和4种人的肿瘤动物模型中61％～100％出现了肺转移，16％～100％出现了肝转移，2种小鼠肿瘤动物模型中26％～100％出现了淋巴结转移。结果表明，VEGF—A在肿瘤组织中表达量的增加将伴随着更高的肝、肺转移率。肿瘤组织中VEGF—C的表达水平与肿瘤的淋巴转移存在相关性，但VEGF—D表达水平增加与肿瘤淋巴结转移的发生率并不平行。结论：VEGF—A表达水平与肿瘤血道转移关系密切，VEGF—C在肿瘤淋巴结转移中起重要作用。

iNOS表达与喉癌组织中淋巴管生成及血管生成的相关性分析

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)在喉癌中的表达及其与喉癌淋巴管生成、血管生成及预后的相关性。方法:应用免疫组化法和实时荧光定量PCR方法检测iNOS在45例喉癌和20例声带息肉组织中的表达,5’-核苷酸酶染色法计数淋巴管密度(lymphatic microvessel density,LVD),CD34染色计数微血管密度(microvessel density,MVD),并结合临床病理特征和生存资料进行相关分析。结果:喉癌组织中iNOS的表达较声带息肉组显著增加(P<0.05),iNOS表达与瘤内和瘤周LVD、MVD、淋巴结转移、TNM临床分期、淋巴管侵润有关(P<0.05)。iNOS阳性表达与生存率负相关(P<0.05)。结论:喉癌组织中iNOS过表达能够促进喉癌淋巴管生成和血管生成。检测iNOS表达可成为判断喉癌预后新的生物学指标。

淋巴管生成与肿瘤转移

淋巴结转移是肿瘤分期的重要内容和预后指标。淋巴管生成不仅参与了正常胚胎淋巴管发育、组织修复,而且在肿瘤淋巴结转移等病理状况下也具有十分重要的作用。近年来多种淋巴管内皮标记物如LYVE-1、Prox-1、Podoplanin的发现和淋巴管生成模型的建立,使得人们逐渐认识到淋巴管生成因子VEGF-C、VEGF-D的表达和分子调控,以及其受体VEGFR-3在促进肿瘤淋巴结转移过程中的地位。抗肿瘤淋巴管生成已经成为肿瘤生物治疗的新靶点,并证实阻断VEGF-C/VEGF-D/VEGFR-3信号通路可以抑制肿瘤淋巴结转移。

淋巴管生成与结直肠癌病期进展的关系

背景与目的:淋巴道转移是影响结直肠癌(colorectalcancer,CRC)患者预后的重要因素,血管内皮生长因子-C(vascularendothelialgrowthfactor-C,VEGF-C)与血管内皮生长因子受体-3(vascularendothelialgrowthfactorreceptor-3,VEGFR-3)结合,促进淋巴管生成与淋巴道转移。本文探讨结直肠癌组织中VEGF-C、VEGFR-3与淋巴管密度(lymphangialdensity,LAD)的相关性及其与临床病理因素的关系。方法:构建含结直肠癌与正常结直肠组织各105例的微阵列,用免疫组织化学方法检测VEGF-C、VEGFR-3及Podoplanin。结果:与正常组织相比,结直肠癌VEGF-C与VEGFR-3表达均上调,LAD相应增加。VEGF-C与VEGFR-3表达无相关性。VEGF-C阳性组中的LAD高于阴性组。淋巴结转移、远处转移以及晚期结直肠癌VEGF-C呈高表达;VEGFR-3在淋巴结转移以及DukesYC期病例中表达升高;LAD在淋巴结转移、DukesYC期病例中明显升高。结论:VEGF-C、VEGFR-3与结直肠癌淋巴管生成、淋巴结转移以及病期进展有关。

非小细胞肺癌VEGF-C表达与淋巴管生成和淋巴转移关系的研究

背景与目的近年来的研究表明,血管内皮生长因子C(VEGFC)通过与其配体(VEGFR3)的结合介导肿瘤淋巴管生成,是形成肿瘤淋巴道转移的最重要因素。淋巴道转移是非小细胞肺癌(NSCLC)常见的主要扩散途径。基于此,本研究用新的淋巴管内皮标志物podoplanin检测NSCLC组织中淋巴管,用淋巴管密度(LVD)表示淋巴管生成情况,探讨NSCLC内VEGFC表达与淋巴管生成和淋巴转移的关系。方法收集66例NSCLC和8例炎性假瘤组织标本,应用免疫组化检测VEGFC、podoplanin的表达,计算VEGFC阳性表达率及淋巴管密度值,分析两者的关系。结果NSCLC组织内VEGFC阳性表达率(75.8%)显著高于肺炎性假瘤(12.5%)(P<0.01),高中分化(76.3%)和低分化(75.0%)之间无显著性差异(P>0.05),淋巴结阳性组中VEGFC阳性率(86.5%)显著高于淋巴结阴性组(62.1%)(P<0.05)。NSCLC组织内LVD(20.4±5.9)显著高于肺炎性假瘤(10.9±4.9)(P<0.01);VEGFC阳性组LVD(21.3±6.0)显著高于VEGFC阴性组(17.7±5.1)(P<0.05),淋巴结阳性组LVD(21.9±5.9)显著高于淋巴结阴性组(18.5±5.5)(P<0.05)。结论淋巴管生成可能是NSCLC淋巴结转移的重要因素,VEGFC参与NSCLC淋巴管生成,从而促进淋巴结转移。