葡萄球菌肠毒素B基因原核表达系统的构建及其表达产物促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用的研究

构建葡萄球菌肠毒素B（staphylococcal enterotoxins B，SEB）基因原核表达系统，了解重组表达产物rSEB促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长的作用．采用高保真PCR从金黄色葡萄球菌FRIS6B株DNA中扩增全长SEB基因片段，T—A克隆后测序，构建SEB基因原核表达系统pET32α-SEB—E．coliBL2IDE3．采用SDS-PAGE检测rSEB表达产量，Ni—NTA亲和层析法提纯rSEB．采用TCID50法测定rSEB对Vero细胞的细胞毒性作用并计算TCID50值．采用MTT比色法分别检测不同浓度rSEB体外对小鼠脾细胞、人外周血单个核细胞（PBMC）的促增殖作用以及对HepG2细胞（人肝腺癌细胞）、HeLa细胞（人宫颈癌上皮细胞）的生长抑制作用．与公布的相关序列比较，所克隆的SEB基因核苷酸序列相似性为100％．rSEB表达量约为细菌总蛋白的40％．rSEB对Vero细胞的TCIC50为3．02μg．5．0～20．0μg／ml的rSEB对小鼠脾细胞和人PBMC均有明显的促增殖作用（P〈0．05）．5．0～20．0μg／ml rSEB作用的人PBMC上清均能有效地抑制HepG2细胞和HeLa细胞生长（P〈0．05）．本研究成功地构建了rSEB高效原核表达系统．rSEB仍然具有生物学活性．所建立的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用的检测方法，为以后减毒rSEB突变体的筛选奠定了基础．

羟自由基降解法对海带硫酸多糖生理活性的影响

目的:研究羟自由基降解对海带硫酸多糖理化性质和生理活性的影响。方法:分别利用Harber-Weiss和Fenton体系降解海带硫酸多糖。采用硫酸酚法、比浊法、HPLC法研究降解前后多糖的糖含量、硫酸根含量、分子量等理化性质的变化。采用促小鼠脾淋巴细胞增殖实验研究降解前后多糖的生物学功能变化。结果:经羟自由基降解,海带硫酸多糖的分子量明显降低,降解前后多糖的各项理化性质变化不大。降解前后多糖都能明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖,两者作用效果差异不明显(P>0.05),但降解后多糖能更快的发挥作用。结论:羟自由基降解对海带硫酸多糖的理化性质无影响,但能更好的发挥海带硫酸多糖的生理功能。

以BAFF/APRIL为靶点药物治疗系统性红斑狼疮临床研究进展

系统性红斑狼疮(SLE)是一种以致病性自身抗体和免疫复合物形成并介导器官、组织损伤的自身免疫性疾病,近年来不少国内外学者发现B淋巴细胞在SLE的发病中扮演了重要的角色,本文主要对以BAFF/APRIL为靶点的药物治疗SLE的临床试验进展进行综述。