Vogt-小柳原田综合征患者外周血和脑脊液淋巴细胞共刺激分子的表达

目的 探讨Vogt-小柳原田综合征 (VKH)患者外周血及脑脊液淋巴细胞上B7、CD2 8和CTLA -4分子的表达及意义。方法 采用流式细胞三色直接免疫荧光标记法 ,检测了 3 9例VKH综合征患者外周血T、B淋巴细胞亚群上共刺激分子CD80 (B7-1)、CD86(B7-2 )、CD2 8和CTLA -4的表达。VKH综合征患者分为葡萄膜炎活动期 (18例 )和静止期 (2 1例 )两组。对于 3例初发的VKH综合征患者 ,我们还检查了脑脊液中T淋巴细胞上共刺激分子的表达。结果 VKH综合征活动期患者外周血CD4+ T细胞表面CD2 8分子的表达有所增高 (97 0 %± 3 71% ,正常人为 95 3 %±3 19% ) ,而静止期患者有所下降 (93 7%± 7 5 6% ) ,但三组比较无显著差异。静止期患者CD4+ T细胞表面CTLA -4分子的表达 (2 72 %± 1 42 % )显著高于正常人 (1 73 %± 0 66% ) (P <0 0 5 )。另外 ,VKH综合征活动期患者外周血CD4+ 和CD8+ T细胞表面CD86分子的表达显著低于静止期患者和正常人 (P <0 0 5 )。与自身外周血淋巴细胞比较 ,3例初发VKH综合征患者脑脊液CD4+ T细胞显著增多 (t=3 3 2 5 ,P <0 0 5 ) ,CD4/CD8比值显著升高 (t =3 2 76,P <0 0 5 ) ,CD2 8分子的表达也显著增高 (t =4 2 42 ,P <0 0 5 )。结论 VKH病患者外周血及脑脊液淋巴细胞上B7、CD2

小干扰RNA对大鼠T淋巴细胞CD28基因表达的抑制作用

目的探讨小干扰RNA（siRNA）对大鼠T淋巴细胞共刺激分子CD28基因表达及干扰后的T细胞的功能的影响。方法设计针对目标基因的siRNA，转染大鼠T淋巴细胞，逆转录．聚合酶链反应（RT-7PCR）方法检测CD28mRNA水平，MLR检测转染后的T淋巴细胞的增殖能力，ELISA法检测细胞因子水平。结果siRNA转染大鼠T淋巴细胞后，抑制CD28分子的表达，半定量RT-PCR检测显示T淋巴细胞CD28的mRNA均有明显的下降，siRNA转染48h后，siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3、siRNA-4组CD28基因表达均受到抑制，其抑制率最高为（88．56±4．70）％，T细胞增殖能力、IL2，IFN-γ水平明显低于对照组。结论siRNA可以特异性抑制大鼠T淋巴细胞共刺激分子CD28基因的转录和表达，降低大鼠T细胞的增殖能力，抑制了IL-2，IFN-γ细胞因子的分泌水平。

阻断B7/CD28共刺激通路抑制大鼠肝移植急性排斥反应的研究

目的:建立大鼠原位肝移植(ROLT)急性排斥反应模型,观察细胞毒淋巴细胞抗原4免疫球蛋白(CTLA-4Ig)在大鼠肝移植术后对共刺激分子B7-1/B7-2的影响及其抗排斥反应的作用。方法:采用"二袖套管"法先行建立DA-Lewis大鼠组合肝移植急性排斥反应模型,随机分为对照组(A组)与实验组(B组)两组,于肝移植术后48h每只受体大鼠腹腔内一次性注射CTLA-4Ig 75μg,分别于术后3、5、7和10d采用RT-PCR检测B7-1和B7-2 mRNA在两组肝脏组织中的表达情况,并同时观察其肝功能变化。结果:1)B7-1和B7-2 mRNA在A组高水平表达,而在B组表达明显降低(P<0.01);2)B组动物术后未见明显排斥反应,血清ALT、TBIL和DBIL水平明显低于对照组(P<0.01)。结论:移植术后应用CTLA-4Ig可以降低肝组织中B7-1和B7-2的表达;动态检测B7分子的表达有助于观察肝移植排斥反应的进程。

免疫学

猪FasL基因在猪软骨细胞上的表达和鉴定；重组蓖麻毒紊A链的融合表达、纯化及活性研究；凋亡抑制蛋白survivin在活化T细胞中的表达及其意义；人CD59基因的突变和表达及其活性研究；预先形成的重链二硫键有助于HLA-A2-抗原肽复合物体外折叠；人源噬菌体抗体库的构建及抗人NH-LBP抗体的筛选与鉴定；抗禽流感病毒轻链抗体库的构建；CTL识别的HLA-A2限制性人卵巢癌相关抗原OVA66表位的鉴定；含多抗原表位的嵌合SARS-CoV基因疫苗的构建和免疫原性研究；TM-TNF-α介导的反向信号协同增强sTNF-α，对U937细胞的激活作用；NK92细胞的胞吐效应与SNAP-23蛋白转位相关；CXCL16抗体可阻断BCG和LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤；GM-CSF对抗原化抗体基因免疫TH细胞应答的调节作用；趋化性细胞因子受体在Tc1和Tc2亚群的差异表达；在单个细胞水平上分析抗原特异性Th1／Th2细胞因子产生的关联性；人OX40-Fc分子的构建、真核表达及活性研究；人免疫缺陷病毒Ⅱ型核心蛋白DNA疫苗的实验免疫研究；PD-L1 mAb的制备、鉴定及其特性的研究；噬菌体呈现的多聚多肽3A8诱导Jurkat细胞的凋亡效应；T细胞受体Dβ-Jβ sjTRECs连接区多样性；α-Dystroglycan在胸腺T细胞的表达及其对胸腺发育的作用；Bcl-2家族蛋白参与调节CD3ε和5-氟尿嘧啶介导的T淋巴细胞凋亡；人白细胞介素21在真核细胞中表达及其体外促T细胞增殖作用；小干扰RNA特异性抑制淋巴细胞共刺激分子CD28基因表达的研究；猪-猕猴延迟性异种移植排斥反应的发生机制；天花粉蛋白在不同小鼠品系中区分性下调树突状细胞IL-12分泌和CD80表达；复合HA-2氨基多肽可增强chitosan-DNA疫苗的免疫保护效果；CD4^＋CD25^＋调节性T细胞抑制小鼠自身免疫性甲状腺炎的发生；人β2-微球蛋白在pET-22b（＋）表达载体中的克隆、表达与纯化；B7-1／B7-H1相对比例变化对Hsp70-肽复合物抗肿瘤免疫效应的影响。